免疫組化染色步驟
1. 石蠟切片脫蠟和水化后，用PBS(pH7.4)沖洗三次，每次3分鐘（3x3`）,。
2. 根據(jù)每一種抗體的要求,，對組織抗原進行相應的修復。
3. 如果有必要,，每張切片加1滴（試劑A）室溫下孵育10分鐘,，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性。
PBS沖洗3x3`,。
4. 除去PBS液,，每張切片加1滴或50μl的第一抗體(用戶自選)，室溫下孵育60分鐘或4℃
過夜,，建議參見每種抗體的說明書,。
5. PBS沖洗3x5`。除去PBS液,，每張切片加1滴或50μl酶二抗聚合物(試劑B),，室溫下孵
育40分鐘或37度孵育30分鐘或4度過夜。PBS沖洗3x3`,。
6. 除去PBS液,，每張切片加1滴或50μl新鮮配制的DAB或AEC溶液（詳見DAB或AEC使用
說明書），顯微鏡下觀察3-5分鐘（DAB）或10分鐘（AEC）,。
7. 自來水沖洗，蘇木素復染,，若有必要,，可用0.1%HCl分化，自來水沖洗,，PBS返藍,。
8. 如果用DAB顯色，則切片經(jīng)梯度酒精脫水干燥,，(二甲苯透明),，中性樹膠封固；如果
用AEC顯色,，則切片不能酒精脫水,，而直接用水性封片劑。封片,。