免疫組織化學(xué)方法/基本原理/步驟
（一）酶標(biāo)記抗體組化法   
　　酶標(biāo)抗體技術(shù)是通過共價(jià)鍵將酶連接在抗體上，制成酶標(biāo)抗體,，再借酶對(duì)底物的特異催化作用,，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，于普通顯微鏡或電鏡下進(jìn)行細(xì)胞表面及細(xì)胞內(nèi)各種抗原成分的定位,，根據(jù)酶標(biāo)記的部位可將其分為直接法（一步法）,、間接法（二步法）、橋聯(lián)法（多步法）等,，用于標(biāo)記的抗體可以是用免疫動(dòng)物制備的多克隆抗體或特異性的單克隆抗體,，最好是特異性強(qiáng)的高效價(jià)的單克隆抗體。直接法是將酶直接標(biāo)記在第一抗體上,，間接法是將酶標(biāo)記在第二抗體上,，檢測組織細(xì)胞內(nèi)的特定抗原物質(zhì)。目前通常選用免疫酶組織化學(xué)間接染色法,。
（二）葡萄球菌蛋白A（SPA）免疫檢測技術(shù)  
    葡萄球菌蛋白A（SPA）是一種從金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁分離的蛋白質(zhì),，由于它的一些免疫學(xué)特性，使其成為免疫學(xué)上一種極為有用的工具,。葡萄球菌蛋白A（SPA）免疫檢測技術(shù)是根據(jù)它能與多種動(dòng)物IgG的Fc 端結(jié)合的原理，用SPA標(biāo)記物（酶,、熒光素,、放射性物質(zhì)等）顯示抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的各種免疫檢測實(shí)驗(yàn)。
    SPA 具有和人及多種動(dòng)物如豚鼠,、兔,、豬、犬、小鼠,、猴等 IgG 結(jié)合的能力,，可解決不同動(dòng)物檢測時(shí)，需分別標(biāo)記相對(duì)應(yīng)的二抗的問題,。 SPA結(jié)合部位是Fc段,，這種結(jié)合不會(huì)影響抗體的活性。 SPA具有的結(jié)合力是雙價(jià)的,，每個(gè)SPA分子可以同時(shí)結(jié)合兩個(gè)IgG分子,，也可一方面同IgG相結(jié)合，一方面與標(biāo)記物如熒光素,、過氧化物酶,、、膠體金和鐵蛋白等相結(jié)合,。但需注意的是SPA 對(duì) IgG 免疫球蛋白亞型的結(jié)合有選擇性,，如SPA與人IgG亞型：IgG 1、IgG 2和IgG 4有結(jié)合力,，唯獨(dú)不結(jié)合IgG 3,。只結(jié)合IgA 2 ，而不結(jié)合 IgA 1,。SPA與禽類血清IgG不結(jié)合,。因此應(yīng)注意可能出現(xiàn)的假陰性結(jié)果。SPA 常用 HRP 標(biāo)記,，可應(yīng)用于間接法,。