一,、問(wèn)：用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移,，有時(shí)發(fā)生快速變化,，原因何在,？如何解決,？
答：關(guān)于漂移問(wèn)題：
1.溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置,，保持柱溫恒定
2.流動(dòng)相發(fā)生變化,，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
3.柱子未平衡好，需對(duì)柱子進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的平衡
關(guān)于快速變化問(wèn)題
1.流速發(fā)生變化,，解決辦法是重新設(shè)定流速,，使之保持穩(wěn)定
2.泵中有氣泡，可通過(guò)排氣等操作將氣泡趕出,。
3.流動(dòng)相不合適,，解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合
二、問(wèn)：液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么,？
答：1.篩板堵塞或柱失效,，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子,。
2.存在干擾峰,，解決辦法為使用較長(zhǎng)的柱子，改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
三,、問(wèn)：HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
答：1.樣品量不足,，解決辦法為增加樣品量 醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理
2.樣品未從柱子中流出?？筛鶕?jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動(dòng)相或柱子
3.樣品與檢測(cè)器不匹配,。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長(zhǎng)或改換檢測(cè)器
4.檢測(cè)器衰減太多,。調(diào)整衰減即可,。
5.檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大。解決辦法為降低時(shí)間參數(shù)
6.檢測(cè)器池窗污染,。解決辦法為清洗池窗,。
7.檢測(cè)池中有氣泡。解決辦法為排氣,。
8.記錄儀測(cè)壓范圍不當(dāng),。調(diào)整電壓范圍即可。
9.流動(dòng)相流量不合適,。調(diào)整流速即可,。
10.檢測(cè)器與記錄儀超出校正曲線,。解決辦法為檢查記錄儀與檢測(cè)器,，重作校正曲線。
四,、問(wèn)：做HPLC分析時(shí),，柱壓不穩(wěn)定，原因何在,？如何解決,？
答：原因可能有：
1.泵內(nèi)有空氣，解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣，對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理,；
2.比例閥失效,，更換比例閥即可；
3.泵密封墊損壞,，更換密封墊即可,；
4.溶劑中的氣泡，解決的辦法是對(duì)溶劑脫氣,，必要時(shí)改變脫氣方法,；
5.系統(tǒng)檢漏，找出漏點(diǎn),，密封即可,；
6.梯度洗脫，這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的,。
五,、問(wèn)：我購(gòu)買的HPLC柱驗(yàn)收測(cè)試時(shí)柱壓過(guò)高，請(qǐng)問(wèn)為什么,？
答：柱壓過(guò)高是HPLC柱用戶最常碰到的問(wèn)題,。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問(wèn)題,，您可按下面步驟檢查問(wèn)題的起因,。 醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理
1.拆去保護(hù)預(yù)柱，看柱壓是否還高,，否則是保護(hù)柱的問(wèn)題,，若柱壓仍高，再檢查,；
2.把色譜柱從儀器上取下,，看壓力是否下降，否則是管路堵塞,，需清洗,，若壓力下降，再檢查,；
3.將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上,，用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子，（此時(shí)不要連接檢測(cè)器,，以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)池）,。這時(shí)，如果柱壓仍不下降,，再檢查,；
4.更換柱子入口篩板,，若柱壓下降，說(shuō)明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升,。若柱壓還高，請(qǐng)與廠商聯(lián)系,。一般情況下,，在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過(guò)濾器便可避免柱壓過(guò)高的問(wèn)題，SGE提供的Rheodyne7315型過(guò)濾器就是解決這一問(wèn)題的最佳選擇,。
