艾滋病因危害巨大,，其檢測結(jié)果稍有偏差都會給受檢者帶來難以承受的災(zāi)難。為便于HIV樣本的保存,，降低運輸費用及HIV抗體確證費用,，世界各國艾滋病防控領(lǐng)域的學(xué)者、研究人員紛紛探索解決方案,。來自我國基層的學(xué)者經(jīng)過十幾年的鉆研,，提出的新方法得到了國內(nèi)多位該領(lǐng)域?qū)＜业恼J可。
血液樣本運送須大動干戈
艾滋病的診斷,、疫情監(jiān)測,、療效觀察等項目的檢測，絕大多數(shù)是在我國市或省疾病預(yù)防控制中心進行的,?；鶎?a href="http://hnhlg.com/news/" target="_blank">醫(yī)療衛(wèi)生單位篩查出的HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本，須由2人或?qū)＼囁椭潦谢蚴〖部刂行臋z測,。由于用于HIV項目檢測的多為血液,、血清、血漿等液體樣本且具有傳染性,，運輸過程中存在著包裝破損,、溢漏、滲出等潛在危險,，所以需要用密閉而堅固的包裝容器,。為防萬一，還須在內(nèi)包裝周圍墊上緩沖吸水材料；又由于血液樣本為液體并富含營養(yǎng),，微生物易于繁殖使其腐敗變質(zhì),，因而需要冷藏；再按有關(guān)規(guī)定進行3層包裝,。這樣,，其包裝不僅復(fù)雜笨重，也浪費了大量的人力,、物力與財力,。
濾紙干血斑準確性難保證
為解決傳統(tǒng)方法在樣本保存、運輸過程中的繁復(fù),，美國食品和藥物管理局批準并推廣應(yīng)用“濾紙干血斑技術(shù)（DBS）”,。
濾紙干血斑技術(shù)是將受檢人員的血液樣本滴在濾紙上，經(jīng)干燥后即為“濾紙干血斑”,?；灂r，將干血斑用打孔器從濾紙上取下,，放入試管等容器中,，加入樣本提取液溶解提取一定時間，然后取其中的液體進行HIV項目檢測,。該技術(shù)的優(yōu)點是將血液滴于濾紙上制成干血斑后,，HIV樣本失去了感染性，不易腐敗變質(zhì),，便于保存,、運輸?shù)取５谖覈氨R旺達,、肯尼亞等國家的實際應(yīng)用中,，卻發(fā)現(xiàn)在制備干血斑的過程中會有約10%的合格樣本變成不合格，從而導(dǎo)致漏診和誤診,。此外,，濾紙干血斑樣本溶解洗脫時間須24～48小時，且檢測時須提前準備,。
干血棉球易運輸結(jié)果準
受濾紙干血斑方法的啟發(fā),，筆者研究了新的方法——血棉球技術(shù)。該技術(shù)是將受檢人員的血液樣本滴在滅菌的醫(yī)用脫脂棉球上,，經(jīng)干燥后,，即成為干血棉球樣本。
棉球載體形態(tài)為立體球狀,，柔軟蓬松,，吸水性極強，每克棉球可容納12克血液，是濾紙的6倍,。所制成的干血棉球樣本載量可多可少,，少至數(shù)微升，多達數(shù)毫升,，可滿足艾滋病,、性病等多種疾病項目的檢測與復(fù)檢要求；干血棉球樣本溶解洗脫時間只需數(shù)十分鐘,，可當天隨時檢測,。重要的是，含100μl血液的干血棉球樣本用100μl提取液提取時,，可獲取約50μl原濃度血液樣本,，用原濃度樣本檢測，提高了檢測結(jié)果的準確性,。
干血棉球技術(shù)集合了液態(tài)血液樣本容量較大,、檢測結(jié)果準確,，而濾紙干血斑樣本便于保存運輸,、病毒失去感染性的優(yōu)點，使二者的優(yōu)勢得到了完美的結(jié)合,。
聯(lián)合確證技術(shù)簡化確診流程
HIV抗體確證試驗也是艾滋病確診的關(guān)鍵環(huán)節(jié),。對于篩查試驗呈陽性反應(yīng)的血液樣本，再用免疫印跡（WB）等方法做確證試驗,。只有當確證試驗陽性時,，才能確診為艾滋病。實驗時,，無論每次檢測樣本是1個還是10個,，同樣都需要一個檢測程序、1個陰性對照,、1個弱陽性對照和1個強陽性對照,。因而檢測樣本數(shù)量越少，平均每個樣本的檢測費用越高,。所以,，為收集較多數(shù)量的樣本，以降低確證試驗費用,，確證試驗多為每兩周檢測1次,。這樣，雖然確證試驗費用相對降低,，卻延長了受檢測人員的結(jié)果等待時間,，并可能造成HIV檢測范圍的縮小。
針對這種情況，筆者研究設(shè)計出“HIV抗體聯(lián)合確證”技術(shù),。這種技術(shù)是對篩查試驗HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本進行稀釋,，通過與WB等確證試驗進行對比實驗研究，確定當樣本稀釋多少(X)倍篩查試驗仍呈陽性反應(yīng)時確診為艾滋病,，其假陽性率與WB等確證試驗的假陽性率相當,。當獲得X值后，在實際工作中,，將篩查試驗呈陽性反應(yīng)的樣本稀釋X倍,，然后用篩查試劑檢測，若仍呈陽性反應(yīng)便直接確診為艾滋??；若呈陰性反應(yīng)，再用WB等確證試驗進行確證,。為使篩查試驗確證HIV抗體結(jié)果更加準確,，亦可將樣本稀釋倍數(shù)提高到2～4X倍。由于本法在HIV抗體較高濃度時用篩查試驗確證,，而在HIV抗體較低濃度時用WB等確證試驗確證,，故稱其為“HIV抗體聯(lián)合確證”。實驗證明,，該方法確保了HIV抗體聯(lián)合確證技術(shù)與傳統(tǒng)HIV抗體確證試驗假陽性率一致的極低效果,。
干血棉球與HIV抗體聯(lián)合確證“兩項新技術(shù)”經(jīng)評價后，70%以上篩查試驗HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本,，可用費用較低的篩查試驗在24～48小時獲得確證結(jié)果,。基層篩查室篩查出的70%以上HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本可在篩查室確證而不必送往確證室,。剩余30%以下的篩查試驗HIV抗體呈陽性反應(yīng)而濃度較低不能確證的樣本,，以及嬰幼兒早期診斷、新發(fā)感染,、病毒載量,、病毒耐藥性等樣本均可以通過郵寄干血棉球的方式運送至省、市疾病預(yù)防控制中心檢測,。
應(yīng)該說,，上述兩項成果的設(shè)計思路并不復(fù)雜，但如果能夠經(jīng)過進一步深入研究加以驗證,，或許可為我們應(yīng)對HIV病毒提供幫助,。
血液樣本運送須大動干戈
艾滋病的診斷,、疫情監(jiān)測,、療效觀察等項目的檢測，絕大多數(shù)是在我國市或省疾病預(yù)防控制中心進行的,?；鶎?a href="http://hnhlg.com/news/" target="_blank">醫(yī)療衛(wèi)生單位篩查出的HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本，須由2人或?qū)＼囁椭潦谢蚴〖部刂行臋z測,。由于用于HIV項目檢測的多為血液,、血清、血漿等液體樣本且具有傳染性,，運輸過程中存在著包裝破損,、溢漏、滲出等潛在危險,，所以需要用密閉而堅固的包裝容器,。為防萬一，還須在內(nèi)包裝周圍墊上緩沖吸水材料；又由于血液樣本為液體并富含營養(yǎng),，微生物易于繁殖使其腐敗變質(zhì),，因而需要冷藏；再按有關(guān)規(guī)定進行3層包裝,。這樣,，其包裝不僅復(fù)雜笨重，也浪費了大量的人力,、物力與財力,。
濾紙干血斑準確性難保證
為解決傳統(tǒng)方法在樣本保存、運輸過程中的繁復(fù),，美國食品和藥物管理局批準并推廣應(yīng)用“濾紙干血斑技術(shù)（DBS）”,。
濾紙干血斑技術(shù)是將受檢人員的血液樣本滴在濾紙上，經(jīng)干燥后即為“濾紙干血斑”,?；灂r，將干血斑用打孔器從濾紙上取下,，放入試管等容器中,，加入樣本提取液溶解提取一定時間，然后取其中的液體進行HIV項目檢測,。該技術(shù)的優(yōu)點是將血液滴于濾紙上制成干血斑后,，HIV樣本失去了感染性，不易腐敗變質(zhì),，便于保存,、運輸?shù)取５谖覈氨R旺達,、肯尼亞等國家的實際應(yīng)用中,，卻發(fā)現(xiàn)在制備干血斑的過程中會有約10%的合格樣本變成不合格，從而導(dǎo)致漏診和誤診,。此外,，濾紙干血斑樣本溶解洗脫時間須24～48小時，且檢測時須提前準備,。
干血棉球易運輸結(jié)果準
受濾紙干血斑方法的啟發(fā),，筆者研究了新的方法——血棉球技術(shù)。該技術(shù)是將受檢人員的血液樣本滴在滅菌的醫(yī)用脫脂棉球上,，經(jīng)干燥后,，即成為干血棉球樣本。
棉球載體形態(tài)為立體球狀,，柔軟蓬松,，吸水性極強，每克棉球可容納12克血液，是濾紙的6倍,。所制成的干血棉球樣本載量可多可少,，少至數(shù)微升，多達數(shù)毫升,，可滿足艾滋病,、性病等多種疾病項目的檢測與復(fù)檢要求；干血棉球樣本溶解洗脫時間只需數(shù)十分鐘,，可當天隨時檢測,。重要的是，含100μl血液的干血棉球樣本用100μl提取液提取時,，可獲取約50μl原濃度血液樣本,，用原濃度樣本檢測，提高了檢測結(jié)果的準確性,。
干血棉球技術(shù)集合了液態(tài)血液樣本容量較大,、檢測結(jié)果準確,，而濾紙干血斑樣本便于保存運輸,、病毒失去感染性的優(yōu)點，使二者的優(yōu)勢得到了完美的結(jié)合,。
聯(lián)合確證技術(shù)簡化確診流程
HIV抗體確證試驗也是艾滋病確診的關(guān)鍵環(huán)節(jié),。對于篩查試驗呈陽性反應(yīng)的血液樣本，再用免疫印跡（WB）等方法做確證試驗,。只有當確證試驗陽性時,，才能確診為艾滋病。實驗時,，無論每次檢測樣本是1個還是10個,，同樣都需要一個檢測程序、1個陰性對照,、1個弱陽性對照和1個強陽性對照,。因而檢測樣本數(shù)量越少，平均每個樣本的檢測費用越高,。所以,，為收集較多數(shù)量的樣本，以降低確證試驗費用,，確證試驗多為每兩周檢測1次,。這樣，雖然確證試驗費用相對降低,，卻延長了受檢測人員的結(jié)果等待時間,，并可能造成HIV檢測范圍的縮小。
針對這種情況，筆者研究設(shè)計出“HIV抗體聯(lián)合確證”技術(shù),。這種技術(shù)是對篩查試驗HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本進行稀釋,，通過與WB等確證試驗進行對比實驗研究，確定當樣本稀釋多少(X)倍篩查試驗仍呈陽性反應(yīng)時確診為艾滋病,，其假陽性率與WB等確證試驗的假陽性率相當,。當獲得X值后，在實際工作中,，將篩查試驗呈陽性反應(yīng)的樣本稀釋X倍,，然后用篩查試劑檢測，若仍呈陽性反應(yīng)便直接確診為艾滋??；若呈陰性反應(yīng)，再用WB等確證試驗進行確證,。為使篩查試驗確證HIV抗體結(jié)果更加準確,，亦可將樣本稀釋倍數(shù)提高到2～4X倍。由于本法在HIV抗體較高濃度時用篩查試驗確證,，而在HIV抗體較低濃度時用WB等確證試驗確證,，故稱其為“HIV抗體聯(lián)合確證”。實驗證明,，該方法確保了HIV抗體聯(lián)合確證技術(shù)與傳統(tǒng)HIV抗體確證試驗假陽性率一致的極低效果,。
干血棉球與HIV抗體聯(lián)合確證“兩項新技術(shù)”經(jīng)評價后，70%以上篩查試驗HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本,，可用費用較低的篩查試驗在24～48小時獲得確證結(jié)果,。基層篩查室篩查出的70%以上HIV抗體呈陽性反應(yīng)的樣本可在篩查室確證而不必送往確證室,。剩余30%以下的篩查試驗HIV抗體呈陽性反應(yīng)而濃度較低不能確證的樣本,，以及嬰幼兒早期診斷、新發(fā)感染,、病毒載量,、病毒耐藥性等樣本均可以通過郵寄干血棉球的方式運送至省、市疾病預(yù)防控制中心檢測,。
應(yīng)該說,，上述兩項成果的設(shè)計思路并不復(fù)雜，但如果能夠經(jīng)過進一步深入研究加以驗證,，或許可為我們應(yīng)對HIV病毒提供幫助,。
