馬峻 周紅林 蘇雷 季維智
中國科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所,昆明,650223
摘 要：在植物及低等動(dòng)物線蟲中, 引入外源性雙鏈RNA(dsRNA)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞中同源mRNA降解, 從而干擾其內(nèi)源基因的表達(dá), 這可能是有機(jī)體防范病毒或轉(zhuǎn)座子誘導(dǎo)DNA突變的一種生理機(jī)制, 稱為RNA干涉(RNA interference, RNAi). 利用RNAi研究basonuclin基因在卵母細(xì)胞發(fā)生過程中的功能. 將basonuclin特異的dsRNA導(dǎo)入小鼠生發(fā)泡期卵母細(xì)胞, 可有效降低其mRNA的豐度, 這種降解作用與dsRNA的濃度及作用時(shí)間成正比, 但不影響非同源基因的表達(dá), 證明basonuclin dsRNA能特異識(shí)別、降解其內(nèi)源基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物. 免疫組化實(shí)驗(yàn)顯示, dsRNA能降低卵母細(xì)胞中basonuclin蛋白的水平, 但其效率不如RNAi對tPA及cMos基因活性的抑制, 這可能是由于basonuclin蛋白的半衰期較長, 而生發(fā)泡期卵母細(xì)胞在體外存活時(shí)間較短. 結(jié)果表明, dsRNA能阻抑卵母細(xì)胞中同源基因的表達(dá), 其作用相當(dāng)于基因敲除. 質(zhì)粒表達(dá)的發(fā)夾環(huán)型dsRNA也可以有效降解basonuclin轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物, 這為研究basonuclin在卵母細(xì)胞發(fā)育早期的功能提供了新的手段.
關(guān)鍵詞：RNAi dsRNA basonuclin 卵母細(xì)胞 基因功能
分類號：Q95 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
