馬峻 周紅林 蘇雷 季維智
中國科學院昆明動物研究所,昆明,650223
摘 要：在植物及低等動物線蟲中, 引入外源性雙鏈RNA(dsRNA)會導致細胞中同源mRNA降解, 從而干擾其內(nèi)源基因的表達, 這可能是有機體防范病毒或轉(zhuǎn)座子誘導DNA突變的一種生理機制, 稱為RNA干涉(RNA interference, RNAi). 利用RNAi研究basonuclin基因在卵母細胞發(fā)生過程中的功能. 將basonuclin特異的dsRNA導入小鼠生發(fā)泡期卵母細胞, 可有效降低其mRNA的豐度, 這種降解作用與dsRNA的濃度及作用時間成正比, 但不影響非同源基因的表達, 證明basonuclin dsRNA能特異識別,、降解其內(nèi)源基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物. 免疫組化實驗顯示, dsRNA能降低卵母細胞中basonuclin蛋白的水平, 但其效率不如RNAi對tPA及cMos基因活性的抑制, 這可能是由于basonuclin蛋白的半衰期較長, 而生發(fā)泡期卵母細胞在體外存活時間較短. 結果表明, dsRNA能阻抑卵母細胞中同源基因的表達, 其作用相當于基因敲除. 質(zhì)粒表達的發(fā)夾環(huán)型dsRNA也可以有效降解basonuclin轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物, 這為研究basonuclin在卵母細胞發(fā)育早期的功能提供了新的手段.
關鍵詞：RNAi dsRNA basonuclin 卵母細胞 基因功能
分類號：Q95 文獻標識碼：A
