中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物生理生化國(guó)家重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,果樹分子發(fā)育實(shí)驗(yàn)室,北京,100094
摘 要:淀粉降解代謝與種子萌發(fā)、葉片光合作用,、塊根貯藏及肉質(zhì)果實(shí)的發(fā)育密切相關(guān). 體外酶學(xué)實(shí)驗(yàn)普遍認(rèn)為, β-淀粉酶是催化淀粉水解的重要酶之一, 然而由于其在生活細(xì)胞中經(jīng)常定位于葉綠體或質(zhì)體之外, 與淀粉基質(zhì)在亞細(xì)胞水平上相互隔離, 所以該酶在植物活體內(nèi)的生理功能至今尚不清楚. 用蘋果果實(shí)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)表明, 在果實(shí)發(fā)育過程中, β-淀粉酶活性由低到高, 與淀粉含量大致呈現(xiàn)互為消長(zhǎng)的變化. Western blotting實(shí)驗(yàn)證明, 在果實(shí)發(fā)育過程中, β-淀粉酶的表觀數(shù)量也是由少到多, 與活性的變化一致. 利用膠體金免疫電子顯微鏡定位技術(shù)證明, 果實(shí)內(nèi)β-淀粉酶主要定位于質(zhì)體內(nèi), 圍繞淀粉粒分布較多, 其他亞細(xì)胞區(qū)域內(nèi)β-淀粉酶分布很少, 說明該酶主要分布于其功能區(qū)域, 這種亞細(xì)胞分布特點(diǎn)在果實(shí)整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育期沒有變化. 在亞細(xì)胞水平上明確地展示出植物生活細(xì)胞中β-淀粉酶與其淀粉基質(zhì)居于同一亞細(xì)胞區(qū)域內(nèi). 質(zhì)體內(nèi)膠體金分布密度隨著果實(shí)發(fā)育的推進(jìn)增加顯著, 發(fā)育后期的質(zhì)體內(nèi)或淀粉粒上存在高密度的膠體金顆粒, 這個(gè)結(jié)果與Western blotting實(shí)驗(yàn)相互印證. 可以認(rèn)為, (-淀粉酶參與了果實(shí)細(xì)胞質(zhì)體中淀粉的水解過程.
關(guān)鍵詞:β-淀粉酶 Western blotting 亞細(xì)胞定位 蘋果果實(shí)
分類號(hào):S66 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A