微生物學報Acta Microbiologica Sinica 48(10):1314~1318; 4 October 2008
中華根瘤菌Sinorhizobium sp.1128自體誘導物合成
酶基因的克隆及對生理功能的影響
曲媛,,楊夢華,,鄭會明,鐘增濤*,,朱軍
(南京農(nóng)業(yè)大學生命科學學院,,農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)環(huán)境微生物工程重點開放實驗室,,南京 210095)
摘要:【目的】從中華根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128中克隆自體誘導物合成酶基因,從而研究該基因在Sinorhizobium sp. 1128群體感應系統(tǒng)中的作用,?!痉椒ā坷没蛐蛄型葱员葘σ约胺肿涌寺〉姆椒ǎ瑥闹腥A根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128中克隆自體誘導物合成酶基因,;利用大腸桿菌異源表達,、C18反相薄層層析(TLC)的方法研究該基因的特性;通過中間片段融合的方法缺失該基因,,并通過結(jié)瘤實驗研究該基因?qū)inorhizobium sp. 1128生理功能的影響,?!窘Y(jié)果】以草木樨中華根瘤菌Sinorhizobium medicae WSM419自體誘導物合成酶基因Smed_1560序列設計引物,通過PCR擴增在Sinorhizobium sp. 1128中尋找到一新的自體誘導物合成基因,,命名為traI2,。該基因在大腸桿菌Escherichia coli DH5 中表達后能產(chǎn)生兩種自體誘導物分子。在Sinorhizobium sp.1128中將該基因缺失,,自體誘導物活性下降,;回復突變后,自體誘導物活性得到恢復,,結(jié)瘤實驗結(jié)果表明該基因能影響根瘤菌的結(jié)瘤效率,。【結(jié)論】中華根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128群體感應系統(tǒng)是一個復雜的交互系統(tǒng),,它對結(jié)瘤的生理功能具有一定的影響,。
關鍵詞:Sinorhizobium sp. 1128;群體感應,;自體誘導物合成酶
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