微生物學(xué)報(bào)Acta Microbiologica Sinica 48(10)：1314~1318; 4 October 2008
中華根瘤菌Sinorhizobium sp.1128自體誘導(dǎo)物合成
酶基因的克隆及對(duì)生理功能的影響
曲媛，楊夢(mèng)華,，鄭會(huì)明,，鐘增濤*，朱軍
(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,，農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)環(huán)境微生物工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，南京 210095)
摘要：【目的】從中華根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128中克隆自體誘導(dǎo)物合成酶基因,，從而研究該基因在Sinorhizobium sp. 1128群體感應(yīng)系統(tǒng)中的作用,。【方法】利用基因序列同源性比對(duì)以及分子克隆的方法,，從中華根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128中克隆自體誘導(dǎo)物合成酶基因,；利用大腸桿菌異源表達(dá)、C18反相薄層層析(TLC)的方法研究該基因的特性,；通過(guò)中間片段融合的方法缺失該基因,，并通過(guò)結(jié)瘤實(shí)驗(yàn)研究該基因?qū)inorhizobium sp. 1128生理功能的影響,。【結(jié)果】以草木樨中華根瘤菌Sinorhizobium medicae WSM419自體誘導(dǎo)物合成酶基因Smed_1560序列設(shè)計(jì)引物,，通過(guò)PCR擴(kuò)增在Sinorhizobium sp. 1128中尋找到一新的自體誘導(dǎo)物合成基因,，命名為traI2。該基因在大腸桿菌Escherichia coli DH5 中表達(dá)后能產(chǎn)生兩種自體誘導(dǎo)物分子,。在Sinorhizobium sp.1128中將該基因缺失,，自體誘導(dǎo)物活性下降；回復(fù)突變后,，自體誘導(dǎo)物活性得到恢復(fù),，結(jié)瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該基因能影響根瘤菌的結(jié)瘤效率?！窘Y(jié)論】中華根瘤菌Sinorhizobium sp. 1128群體感應(yīng)系統(tǒng)是一個(gè)復(fù)雜的交互系統(tǒng),，它對(duì)結(jié)瘤的生理功能具有一定的影響。
關(guān)鍵詞：Sinorhizobium sp. 1128,；群體感應(yīng),；自體誘導(dǎo)物合成酶
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