脂質(zhì)體靶向制劑及質(zhì)量控制評價淺談
 
  http://www.cde.org.cn 發(fā)布時間：2002/11/29 04:15:31 PM
 
脂質(zhì)體靶向制劑及質(zhì)量控制評價淺談
審評二部 張學(xué)農(nóng)
一,、靶向制劑的定義與分類
靶向制劑亦稱靶向給藥系統(tǒng)(targeting drug delivery system，TDDS),。系指載體將藥物通過局部給藥或全身血液循環(huán)而選擇性地濃集定位于靶組織,、靶器官、靶細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的給藥系統(tǒng),。
靶向制劑特點：定位濃集,、控制釋藥、無毒及生物可降解性等,。
靶向制劑主要有如下幾類：
1,、被動靶向制劑(passive targeting preparation) 又稱為淋巴系統(tǒng)靶向性。利用脂質(zhì)體進(jìn)入體內(nèi)即被巨噬細(xì)胞作為異物吞噬特點形成天然傾向的富集作用,。
2,、主動靶向制劑 (active targeting preparation)系指用經(jīng)過修飾的藥物載體作為“導(dǎo)彈”，將藥物定向地運送到靶區(qū)濃集發(fā)揮藥效,。
3,、物理化學(xué)靶向制劑 (Physical and chemical targeting preparation) 應(yīng)用物理化學(xué)方法使靶向制劑在特定部位發(fā)揮藥效。
二,、脂質(zhì)體(liposome)
（一）,、脂質(zhì)體 (liposome): 系指將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的微型泡囊體。
（二）,、脂質(zhì)體的分類
脂質(zhì)體按照所包含類脂質(zhì)雙分子層的層數(shù)不同,，分為單室脂質(zhì)體和多室脂質(zhì)體。
小單室脂質(zhì)體(SUV)：粒徑約0.02～0.08m,；大單室脂質(zhì)體 (LUV）為單層大泡囊,，粒徑在0.1～lm,。
多層雙分子層的泡囊稱為多室脂質(zhì)體 (MIV)，粒徑在1～5m之間,。
（三）、脂質(zhì)體的組成與結(jié)構(gòu)
脂質(zhì)體的組成：類脂質(zhì)（磷脂）及附加劑,。
1,、磷脂類：包括天然磷脂和合成磷脂二類。磷脂的結(jié)構(gòu)特點為一個磷酸基和一個季銨鹽基組成的親水性基團(tuán),，以及由兩個較長的烴基組成的親脂性基團(tuán),。
天然磷脂以卵磷脂（磷脂酰膽堿，PC）為主,，來源于蛋黃和大豆,，顯中性。
合成磷脂主要有DPPP（二棕櫚酰磷脂酰膽堿）,、DPPE（二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺）,、DSPC（二硬脂酰磷脂酰膽堿）等，其均屬氫化磷脂類,，具有性質(zhì)穩(wěn)定,，抗氧化性強(qiáng)，成品穩(wěn)定等特點,，是目前國外首選的輔料,。
2、膽固醇：膽固醇與磷脂是共同構(gòu)成細(xì)胞膜和脂質(zhì)體的基礎(chǔ)物質(zhì),。膽固醇具有調(diào)節(jié)膜流動性的作用,，故可稱為脂質(zhì)體“流動性緩沖劑”。
（四）,、脂質(zhì)體的制備
1,、注入法:主要用于制備單室脂質(zhì)體，少數(shù)為多室脂質(zhì)體,，其粒徑絕大多數(shù)在2m以下,。
2、薄膜分散法：主要用于制備多室或大單室脂質(zhì)體,，超聲后以單室脂質(zhì)體為主,。
3、超聲波分散法：主要用于制備以單室為主單室脂質(zhì)體,。
4,、逆相蒸發(fā)法：將磷脂溶于有機(jī)溶劑，加入含藥物的緩沖液,，超聲使成穩(wěn)定w/o乳劑,，減壓除去有機(jī)溶劑在旋轉(zhuǎn)器壁上形成薄膜,，加入緩沖液使凝膠脫落，制得水性混懸液,，通過凝膠色譜法或超速離心法,，除去未包入的藥物，即得大單室脂質(zhì)體,。
5,、冷凍干燥法：適合于熱敏感的藥物。
6,、重建脂質(zhì)體：單室或多室型,。是目前國外應(yīng)用最為廣泛的制備方法之一。其具有工藝穩(wěn)定,、適合于工業(yè)化生產(chǎn),、質(zhì)量易于控制、產(chǎn)品穩(wěn)定性好等特點,。
（五）,、脂質(zhì)體的質(zhì)量控制與評價
1、形態(tài),、粒徑及其分布
采用掃描電鏡,、激光散射法或激光掃描法測定。根據(jù)給藥途徑不同要求其粒徑不同,。如注射給藥脂質(zhì)體的粒徑應(yīng)小于200nm,，且分布均勻，呈正態(tài)性,，跨距宜小,。
2、包封率和載藥量
包封率：包封率＝（脂質(zhì)體中包封的藥物/脂質(zhì)體中藥物總量）×100％
一般采用葡聚糖凝膠,、超速離心法,、透析法等分離方法將溶液中游離藥物和脂質(zhì)體分離，分別測定,，計算包封率,。通常要求脂質(zhì)體的藥物包封率達(dá)80%以上。
載藥量：載藥量＝[脂質(zhì)體中藥物量/（脂質(zhì)體中藥物＋載體總量）]×100％
載藥量的大小直接影響到藥物的臨床應(yīng)用劑量,，故載藥量愈大,，愈易滿足臨床需要。載藥量與藥物的性質(zhì)有關(guān),，通常親脂性藥物或親水性藥物較易制成脂質(zhì)體,。
3、脂質(zhì)體的穩(wěn)定性
1)、物理穩(wěn)定性:主要用滲漏率表示,。
滲漏率＝（放置前介質(zhì)中藥物量－放置后介質(zhì)中的藥量）/制劑中藥量x100%
膽固醇以加固脂質(zhì)雙分子層膜,，降低膜流動，可減小滲漏率,。
2),、化學(xué)穩(wěn)定性：
(1)磷脂氧化指數(shù)：氧化指數(shù)＝A233nm=A215nm；一般規(guī)定磷脂氧化指數(shù)應(yīng)小于0.2,。
(2)磷脂量的測定：基于每個磷脂分子中僅含1個磷原素,，采用化學(xué)法將樣品中磷脂轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)磷后測定磷摩爾量（或重量），即可推出磷脂量,。
4,、防止氧化的措施：
防止氧化的一般措施有充入氮氣,，添加抗氧劑-生育酚,、金屬絡(luò)合劑等；也可直接采用氫化飽和磷脂,。
5,、脂質(zhì)體的滅菌：
滅菌的一般方法有過濾除菌、無菌操作,、－射線照射（60鈷15～20kGy）,、121℃熱壓滅菌等。
（六）,、脂質(zhì)體的特點
1,、靶向性和淋巴定向性：肝、脾網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的被動靶向性,。用于肝寄生蟲病,、利什曼病等單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)疾病的防治。如肝利什曼原蟲藥銻酸葡胺脂質(zhì)體,，其肝中濃度比普通制劑提高了200～700倍,。
2、緩釋作用：緩慢釋放,，延緩腎排泄和代謝,，從而延長作用時間。
3,、降低藥物毒性：如兩性霉素B脂質(zhì)體可降低心臟毒性,。
4、提高穩(wěn)定性：如胰島素脂質(zhì)體,、疫苗等可提高主藥的穩(wěn)定性,。
（七）、脂質(zhì)體作為藥物載體的臨床應(yīng)用
1,、抗腫瘤藥物載體：阿霉素脂質(zhì)體和順鉑脂質(zhì)體已在國外上市,。
2,、抗寄生蟲藥物載體：苯硫咪唑脂質(zhì)體和阿苯達(dá)唑脂質(zhì)體等。利用脂質(zhì)體的被動靶向性,，提高藥物的生物利用度,，減少用量，降低毒副作用,。
3,、抗菌藥物載體：慶大霉素脂質(zhì)體和兩性霉素B，可減少藥物的耐藥性,，降低心臟毒性,。
4、激素類藥物載體,。
（八）,、給藥途徑
脂質(zhì)體的給藥途徑主要包括(1)靜脈注射；(2)肌內(nèi)和皮下注射,；(3)口服給藥,；(4)眼部給藥；(5)肺部給藥,；(6)經(jīng)皮給藥,；(7)鼻腔給藥。
(九),、脂質(zhì)體的體內(nèi)過程
脂質(zhì)體與細(xì)胞之間作用的主要形式包括膜間轉(zhuǎn)運（細(xì)胞膜的脂質(zhì)交換）,、接觸釋藥、吸附,、融合和內(nèi)吞,。
（十）、脂質(zhì)體的發(fā)展趨勢及存在問題
1. 趨勢：高效,、低毒和靶向,。
2. 問題：穩(wěn)定性較差，防止?jié)B漏,。
國外脂質(zhì)體的開發(fā)及上市情況
藥 物 適 應(yīng) 癥 公司 上市情況
制霉菌素
胞壁三肽
紫杉醇脂質(zhì)體
表阿霉素
兩性霉素B
鹽酸阿霉素
慶大霉素
兩性霉素B
阿霉素
柔紅霉素
甲肝疫苗 霉菌感染
激活殺腫瘤巨噬細(xì)胞
非小細(xì)胞肺癌等
卡波濟(jì)肉瘤
霉菌感染
癌癥
細(xì)胞內(nèi)文原體
霉菌感染
卡波濟(jì)肉瘤
癌癥
免疫疫苗 Argus
汽巴－甲基公司（諾華公司）
Science Biotechnology Inc.
Liposome Technology Inc.
The Liposome Company(TLC)
The Liposome Company(TLC)
The Liposome Company(TLC)
Nexstar
Nexstar
Nexstar
Swiss Serum institute II期（美國和印度）

97年美國市場
臨床III期

90年歐洲市場,，
92上市
1996年美國和歐洲
1994年瑞士上市
（十一）、新型靶向脂質(zhì)體
1,、前體脂質(zhì)體：將脂質(zhì)吸附在極細(xì)的水溶性載體如氯化鈉,、山梨醇等聚合糖類（增加脂質(zhì)分散面積）制成前體脂質(zhì)體，遇水時脂質(zhì)溶脹,，載體溶解形成多層脂質(zhì)體,，其中載體的大小直接影響脂質(zhì)體的大小和均勻性。前體脂質(zhì)體可預(yù)防脂質(zhì)體之間相互聚集，且更適合包封脂溶性藥物,。
2,、長循環(huán)脂質(zhì)體: 經(jīng)過PEG修飾，以增加脂質(zhì)體的柔順性和親水性,，通過單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬,，減少脂質(zhì)體脂膜與血漿蛋白的相互作用，延長循環(huán)時間,，稱為長循環(huán)脂質(zhì)體(long-circulating liposome),。長循環(huán)脂質(zhì)體有利于肝脾以外的組織或器官的靶向作用。同時,，將抗體或配體結(jié)合在PEG的末端,，既可保持長循環(huán)，又可保持對靶體的識別,。
3,、免疫脂質(zhì)體：脂質(zhì)體表面聯(lián)接抗體，對靶細(xì)胞進(jìn)行識別,，提高脂質(zhì)體的靶向性,。如在絲裂霉素（MMC）脂質(zhì)體上結(jié)合抗胃癌細(xì)胞表面抗原的單克隆抗體3G 制成免疫脂質(zhì),，在體內(nèi)該免疫脂質(zhì)體對胃癌靶細(xì)胞的M85殺傷作用比游離MMC提高4倍,。
4、熱敏脂質(zhì)體：利用在相變溫度時,，脂質(zhì)體的類脂質(zhì)雙分子層膜從膠態(tài)過渡到液晶態(tài),，脂質(zhì)膜的通透性增加，藥物釋放速度增大的原理制成熱敏脂質(zhì)體,。例如將二棕櫚酸磷脂（DPPC）和二硬脂酸磷脂(DSPC)按一定比例混合,，制成的3H甲氨喋呤熱敏脂質(zhì)體，再注入荷Lewis肺癌小鼠的尾靜脈后,，再用微波加熱腫瘤部位至42℃,，病灶部位的放射性強(qiáng)度明顯的高于非熱敏脂質(zhì)體對照組。
5,、pH敏感性脂質(zhì)體：由于腫瘤間質(zhì)的pH比周圍正常組織細(xì)胞低,，選用對pH敏感性的類脂材料，如二棕櫚酸磷脂或十七烷酸磷脂為膜材制備成載藥脂質(zhì)體,。當(dāng)脂質(zhì)體進(jìn)入腫瘤部位時,，由于pH的降低導(dǎo)致脂肪酸羧基脂質(zhì)化成六方晶相的非相層結(jié)構(gòu)，從而使膜融合,，加速釋藥,。
總之，脂質(zhì)體作為藥物載體是臨床應(yīng)用較早，發(fā)展最為成熟的一類新型靶向制劑,。目前,，美國FDA批準(zhǔn)上市的脂質(zhì)體產(chǎn)品有兩性霉素B、阿霉素脂質(zhì)體,。批準(zhǔn)進(jìn)入臨床試驗的脂質(zhì)體有丁胺卡鈉霉素,。未來脂質(zhì)體的研究主要集中在以下三個方面:
1、膜結(jié)構(gòu)與載藥性質(zhì)之間的關(guān)系,；
2,、脂質(zhì)體在體內(nèi)的靶向特性；
3,、在體外培養(yǎng)中將基因和其他物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)有望成為基因藥物載體,。