1,、低溫定期移植保藏法,。將需要保藏的菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,，適溫培養(yǎng)，當(dāng)菌絲健壯地長滿斜面時取出,，放在3-5℃低溫干燥處或4℃冰箱,、冰柜中保藏，每隔4-6個月時間移植轉(zhuǎn)管一次,，具體應(yīng)根據(jù)菌種特性決定,。保藏時要注意環(huán)境溫度不能太高，以防霉菌通過棉塞進(jìn)入管內(nèi),。因此,，若用棉塞，可用干凈的硫酸紙或牛皮紙包扎棉塞，即可減少污染的機(jī)會,，也可防止培養(yǎng)基干燥。除草菇菌種外,，其他食用菌菌種都能采用此法保藏,。
2、液體石蠟保藏法,。取化學(xué)純液體石蠟（要求不含水分,、不霉變）裝于三角瓶中加棉塞并包紙，在1公斤/平方厘米壓力下滅菌1小時,，再放入40℃恒溫箱中數(shù)天,，以蒸發(fā)其中水分，至石蠟油完全透明為止,。將處理好的石蠟油移接在空白斜面上,，28-30℃下培養(yǎng)2-3天，證明無雜菌生長方可使用,。然后用無菌操作的方法把液體石蠟注入待保藏的斜面試管中,。注入量以高出培養(yǎng)基斜面1-1.5厘米，塞上橡皮塞,，用固體石蠟封口,，直立于低溫干燥處保藏。保藏時間在一年以上,，在低溫下,，保藏時間還可延長。
3,、沙土管保藏法,。取河沙用水浸泡洗滌數(shù)次，過60目篩除去粗粒,，再用10%鹽酸浸泡2-4小時,，除去其中有機(jī)物質(zhì)，再用水沖洗至流水的ph達(dá)到中性,，烘干備用,。同時取貧脊土或菜園土用水浸泡，使呈中性,，沉淀后棄去上清液,，烘干碾細(xì)，用100目篩子過篩,，將處理好的沙與土以（2-4）:1混勻,，用磁鐵吸出其中的鐵質(zhì)，然后分裝小試管或安瓿內(nèi)，每管裝量0.5-2克,，塞棉塞,，用紙包扎滅菌（1.5公斤/平方厘米，1小時）,，再干熱滅菌（160℃,，2-3小時）1-2次，進(jìn)行無菌檢驗(yàn),，合格后使用,。將已形成孢子的斜面菌種，在無菌條件下注入無菌水3-5毫升,，刮菌苔,，制成菌懸液，再用無菌吸管吸取菌液滴入砂土管中,，以浸透砂土為止,。將接種后的沙土管放入盛有干燥劑的真空干燥器內(nèi)，接上真空泵抽氣數(shù)小時,，至沙土干燥為止,。真空干燥操作需在孢子接入后48小時內(nèi)完成，以免孢子發(fā)芽,。制備好的沙土管用石蠟封口,，在低溫下可保藏2-10年。
4,、濾紙片保藏法,。取白色（收集深色孢子）或黑色（收集白色孢子）濾紙，剪成4×0.8厘米的小紙條,，平鋪在培養(yǎng)皿中用紙包裹進(jìn)行滅菌（1公斤/平方厘米,，30分鐘）。采用鉤懸法收集孢子,，讓孢子落在濾紙條上,。將載有孢子的濾紙條放入保藏試管中，再將保藏試管放入干燥器中1-2天,，除去濾紙水分,，使濾紙水分含量達(dá)2%左右，然后低溫保藏,。
5,、自然基質(zhì)保藏法
⑴麥粒保藏法：取無癟粒、無雜質(zhì)的小麥淘洗干凈,，浸泡12-15小時,，加水煮沸15分鐘,，繼續(xù)熱浸15分鐘，使麥粒脹而不破,，瀝干水分?jǐn)傞_晾曬,，使麥粒的含水量在25%左右。將碳酸鈣,、石膏拌入熟麥粒中（麥粒,、碳酸鈣、石膏比例為10公斤:133克:33克）,，拌和均勻后裝入試管中，每管約2-3克,，然后清洗試管,，塞棉塞，滅菌1.5（1.5公斤/平方厘米,，2小時）,，經(jīng)無菌檢查合格后備用，試管基質(zhì)冷卻后接種,，適溫培養(yǎng),，待菌絲長滿基質(zhì)后用石蠟涂封棉塞，放低溫保藏,。2年左右轉(zhuǎn)接一次,。
⑵麩曲保藏法。取新鮮麩皮,，過60目篩除去粗粒,。將麩皮和自來水按1:1拌勻，裝入小試管,，每管約裝1/3高度,，加棉塞用紙包扎，高壓滅菌（1.5公斤/平方厘米,，30分鐘）,，經(jīng)無菌檢查合格后備用，將生長在斜面培養(yǎng)基上的健壯菌種,，移種至無菌麩曲管中,，移種時注意盡管搗勻小試管中的麩皮，呈疏松狀態(tài),，在適溫下培養(yǎng)至菌絲長滿麩皮為止,，將麩曲小管置干燥器中，在低溫或適溫下保藏,。
6,、生理鹽水保藏法。取純氯化鈉0.7-0.9克，放入100%毫升蒸餾水中,，攪拌均勻分裝試管,，每管5-10毫升，進(jìn)行滅菌（1公斤/平方厘米,，30分鐘）,，經(jīng)無菌檢查合格后備用，將待保藏的菌種接入馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中適溫振蕩培養(yǎng)5-7天,。無菌操作吸取少許培養(yǎng)菌種注入經(jīng)檢驗(yàn)合格的生理鹽水試管中,，塞上無菌橡皮塞，用石蠟涂封,，在室溫或低溫保藏,。
7、冷凍真空干燥法,。將已培養(yǎng),、生長豐富的菌體或孢子懸浮于滅菌的血清、卵白,、脫脂奶制成菌懸液,，將懸液以無菌操作分裝于滅菌的玻璃安瓿瓶中，每管約0.3-0.5毫升,，然后用耐壓橡皮管與冷凍干燥裝置連接,，安瓿瓶放在冷凍槽中于-30℃至-40℃迅速冷凍，并在冷凍狀態(tài)下抽空干燥,，并在真空狀態(tài)下熔封安瓿,，在-20℃保存，一般可保存十年以上,，但成本較高,。
8、液氮超低溫保藏法,。首先將要保藏的菌種制成菌懸液備用,；其次，準(zhǔn)備安瓿瓶,，每瓶加入0.8毫升冷凍保護(hù)劑10%（體積比）甘油蒸餾水溶液,，塞棉塞滅菌（1公斤/平方厘米，5分鐘）,。無菌檢查后,，接入要保藏的菌種，火焰熔封瓶口,，檢查是否漏氣,，將封好口的安瓿瓶放在凍結(jié)器內(nèi),，以每分鐘下降1℃的速度緩慢降溫，使保藏品逐步均勻地凍結(jié),，直至-35℃,，以后凍結(jié)速度就不需控制，安瓿凍結(jié)后立即放入液氮罐內(nèi),，在-150至-196℃保藏,，該法只有少數(shù)科研院所使用。
