本報(bào)訊（通訊員潘彥博 記者劉萬生） 9月3日,，記者從中科院大連化學(xué)物理研究所獲悉,，該所研究員鄒漢法,、葉明亮帶領(lǐng)的團(tuán)隊(duì)，在定量蛋白質(zhì)組學(xué)新技術(shù)新方法方面取得進(jìn)展,，發(fā)展了一種基于胰蛋白酶催化的N端穩(wěn)定同位素編碼的氨基酸標(biāo)記的相對(duì)定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法,。相關(guān)研究成果發(fā)表在《德國應(yīng)用化學(xué)》上。
 
蛋白質(zhì)組學(xué)研究的主要內(nèi)容是蛋白質(zhì)的表達(dá)水平,、翻譯后修飾,、蛋白與蛋白相互作用等，最終目的是掌握蛋白質(zhì)的特征與功能,。定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)是蛋白質(zhì)組學(xué)的重要部分,，它可以在實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)鑒定的基礎(chǔ)上，對(duì)蛋白質(zhì)的表達(dá)水平及其存在的變化形式進(jìn)行檢測(cè)和分析,。
 
研究人員分別利用胰蛋白酶的水解活性和連接活性,，實(shí)現(xiàn)了只采用一種酶就完成蛋白酶解和多肽標(biāo)記兩步操作。胰蛋白酶首先作為水解酶,，將蛋白質(zhì)酶解成肽段,，然后又作為連接酶,，催化穩(wěn)定同位素編碼的精氨酸連接到胰蛋白酶酶解后的肽段的N末端，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)肽段和蛋白的相對(duì)定量,。
 
研究發(fā)現(xiàn),，這種酶促標(biāo)記反應(yīng)條件溫和，具有高度區(qū)域?qū)Ｒ恍?，大大減少了肽段降解和副反應(yīng)的發(fā)生,；由于標(biāo)記反應(yīng)只發(fā)生在肽段的N末端，而且每個(gè)肽段只標(biāo)記上一個(gè)含同位素的氨基酸,，所以不會(huì)對(duì)翻譯后修飾的定量研究產(chǎn)生影響。
 
此外,，與一般的標(biāo)記方法不同的是,，這種標(biāo)記反應(yīng)后形成新的肽鍵，由于新的肽鍵也能在串聯(lián)質(zhì)譜中解離,，所以新形成的其他碎片離子,，能大大提高肽段鑒定的準(zhǔn)確度。
 
據(jù)介紹,，這種酶促標(biāo)記反應(yīng)為蛋白質(zhì)組學(xué)定量分析提供了一個(gè)全新的方法和技術(shù)平臺(tái),，具有良好的應(yīng)用前景。