化學(xué)發(fā)光方法(chemicalluminescentimmunoassay,CLIA)檢測(cè)因其具有操作簡便,、反應(yīng)快速、靈敏度高,、特異性強(qiáng),、穩(wěn)定性高、無放射性及毒性危害等特點(diǎn),，被認(rèn)為是最有前途的超微量免疫學(xué)檢測(cè)方法,，因此也越來越受到檢驗(yàn)界的關(guān)注。但目前國內(nèi)尚無用化學(xué)發(fā)光法來檢測(cè)梅毒螺旋體產(chǎn)品,。
北京科美東雅生物技術(shù)有限公司開發(fā)生產(chǎn)的化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒,，彌補(bǔ)了國內(nèi)的空白。
本實(shí)驗(yàn)所有標(biāo)本均經(jīng)臨床確認(rèn),，并與市場(chǎng)上最常見的酶聯(lián)免疫分析法進(jìn)行了比較,，不符合的標(biāo)本，以雅培梅毒診斷試劑作為第3方試劑進(jìn)行驗(yàn)證,，從而探討該國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光試劑盒是否適用于臨床常規(guī)檢測(cè),。
對(duì)象與方法
1.1對(duì)象收集衛(wèi)生部北京醫(yī)院門診及住院患者送檢的血清樣品共1200例,，其中經(jīng)臨床確診的有梅毒臨床癥狀、TPPA陽性的梅毒患者血清300例;無基礎(chǔ)疾病,、無特異性疾病的臨床癥狀,、TPPA陰性的正常人血清900例。
1.2標(biāo)本收集所有標(biāo)本均在被采血者空腹,、靜息1Qmin以上采集,。真空采血管抽取靜脈血5ml，于抽血當(dāng)日3300r/min離心10min,，分離出血清,，-20℃冷凍保存。檢測(cè)當(dāng)日,，將所有標(biāo)本取出放于室溫,，全部融化后顛倒混勻，備用,。
1.3儀器與試劑①國產(chǎn)CLIA試劑:梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒(化學(xué)發(fā)光法),，北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào):110411,，有效期:12個(gè)月,。②ELISA試劑:梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，上?？迫A生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),，批號(hào):110129，有效期:12個(gè)月,。③雅培梅毒診斷試劑:梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒(化學(xué)發(fā)光法),，雅培公司生產(chǎn)，批號(hào):111207,，有效期:12個(gè)月,。④儀器:北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的CDM-I型化學(xué)發(fā)光儀。
1.4檢測(cè)方法對(duì)1200份血清樣品分別用CLIA試劑盒和ELISA試劑盒測(cè)定梅毒螺旋體抗體,，分別計(jì)算兩種測(cè)定方法的特異性,、靈敏度和符合率。
1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)采用北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的CDM-I型化學(xué)發(fā)光儀軟件系統(tǒng)及MicrosoftExcel軟件處理,。
2結(jié)果
2.1準(zhǔn)確性應(yīng)用評(píng)價(jià)方法和對(duì)照方法分別檢測(cè)2份梅毒螺旋體抗體陽性參考品,，結(jié)果均為陽性。
2.2敏感度,、特異度分別用評(píng)價(jià)方法和對(duì)照方法測(cè)定300例梅毒螺旋體抗體陽性樣本,，評(píng)價(jià)方法陽性結(jié)果299例，900例正常人血清樣本檢測(cè)結(jié)果為,，評(píng)價(jià)方法陰性899例(表1),，對(duì)不符合標(biāo)本用雅培梅毒診斷試劑進(jìn)行檢測(cè),，結(jié)果為梅毒患者為陽性，正常人為陰性,，評(píng)價(jià)方法出現(xiàn)1例假陽性及2例假陰J吐,。由表1計(jì)算評(píng)價(jià)方法的性能特點(diǎn)為:敏感度為99.3%，特異度為99.9%,，陽性結(jié)果預(yù)測(cè)值為99.7%,，陰性結(jié)果預(yù)測(cè)值99.8%。
