玉米是全球第一大作物,、我國(guó)第二大作物,,而干旱是影響其產(chǎn)量的重要限制因素,。山東大學(xué)生命科學(xué)院張舉仁教授的課題組利用基因芯片技術(shù)研究了開花期玉米頂葉干旱脅迫下基因的表達(dá),。
開花期是玉米需水臨界期,,對(duì)干旱脅迫反應(yīng)最敏感,,此時(shí)逢干旱會(huì)使產(chǎn)量下降幅度最大,。張教授的課題組以開花期玉米為材料,分別對(duì)其進(jìn)行短期和長(zhǎng)期的干旱脅迫,,采用全基因組芯片研究了頂葉中基因的表達(dá)情況,。
分析的結(jié)果表明,有197個(gè)基因在短期脅迫下差異表達(dá)(53%上調(diào)),,而在長(zhǎng)期脅迫下,,則有1009個(gè)基因差異表達(dá)(32%上調(diào))。分離得到的差異表達(dá)基因中約有一半的基因功能未知,,其他基因按功能則可分為:代謝相關(guān),;細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);轉(zhuǎn)錄相關(guān),;蛋白質(zhì)合成,;細(xì)胞防御;細(xì)胞運(yùn)輸,;亞細(xì)胞定位等幾大類,。
分析實(shí)驗(yàn)表明,在短期脅迫下上調(diào)表達(dá)的基因中,,約有1/3的已知功能基因?qū)儆谛盘?hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能的分類范疇,,參與細(xì)胞內(nèi)不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,這表明信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因在玉米對(duì)干旱的早期反應(yīng)中起重要作用,。而在長(zhǎng)期干旱條件下,,頂葉中大量的代謝相關(guān)基因差異表達(dá)。
研究人員指出,,特別值得注意的是滲透因子代謝相關(guān)基因的表達(dá)變化:脯氨酸合成途徑中的兩個(gè)基因P5CS和P5CR表達(dá)上調(diào)而其降解途徑的關(guān)鍵酶基因ProDH表達(dá)下調(diào):海藻糖合成途徑中的TPS和TPP表達(dá)下調(diào)而其降解途徑的酶基因Trehalase表達(dá)上調(diào),。另外,棉子糖合成途徑中的關(guān)鍵基因的表達(dá)也大都受誘導(dǎo)上調(diào),。
張教授課題組的這項(xiàng)研究分離得到眾多開花期玉米干旱脅迫誘導(dǎo)差異表達(dá)的基因,,為下一步鑒定其功能,、明確其在植物抗旱方面的作用,和開展玉米抗旱基因工程研究提供依據(jù),。
張舉仁,,男,,漢族,,1955年2月出生。博士,,山東大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授,,博導(dǎo)。1975年9月進(jìn)入甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)系農(nóng)學(xué)專業(yè)學(xué)習(xí),,1978年考取蘭州大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)研究生,,師從鄭國(guó)錩院士。研究方向?yàn)榧?xì)胞工程,。1982年1月獲碩士學(xué)位,,1985年3月獲理學(xué)博士學(xué)位。1987年晉升為副教授,, 1992年底晉升為教授,。1987年榮獲中科院青年獎(jiǎng)勵(lì)基金。 1991年被國(guó)家教委和國(guó)務(wù)院學(xué)位委員會(huì)授予做出突出貢獻(xiàn)的中國(guó)博士學(xué)位獲得者證書,。1993年10月起享受政府特殊津貼?,F(xiàn)任山東省細(xì)胞生物學(xué)會(huì)理事長(zhǎng)等職。他長(zhǎng)期從事植物細(xì)胞工程和基因工程研究,,發(fā)表論文60余篇,,獲得國(guó)家發(fā)明專利3項(xiàng);獲得省部級(jí)成果獎(jiǎng)3項(xiàng),,其中二等獎(jiǎng)兩項(xiàng),,排名第一。
附:張舉仁教授代表性研究成果和論文
主要代表性工作有:
1,、探索出植物遺傳轉(zhuǎn)化的新方法,,為從多種難于轉(zhuǎn)化的植物獲得大批轉(zhuǎn)基因植株開辟了新途徑。采用該方法已批量獲得了玉米,、小麥和棉花等作物的轉(zhuǎn)基因植株,。并將多個(gè)有用基因分別轉(zhuǎn)入玉米骨干自交系,獲得了抗除草劑,、抗蟲,、或耐鹽及耐旱性大幅度提高的轉(zhuǎn)基因植株及其后代,并培育出轉(zhuǎn)基因玉米自交系,。
2,、 攻克了我國(guó)玉米骨干自交系組織培養(yǎng)難度大的難關(guān),,建立起玉米細(xì)胞工程育種的成套技術(shù),獲得了多種突變體,。并從突變體后代中培育出耐鹽,、抗病或耐低磷玉米自交系及單交種,有2個(gè)品種已通過(guò)省級(jí)審定并廣泛推廣,。
3,、構(gòu)建出玉米高質(zhì)量的cDNA文庫(kù),從中篩選出肌醇磷酸合成酶基因和磷酸肌醇激酶基因等20多個(gè)與植物抗逆相關(guān)的基因,,并對(duì)其中6個(gè)基因進(jìn)行了功能分析和基因表達(dá)研究,。利用抑制性差減雜交技術(shù)構(gòu)建了兩個(gè)干旱脅迫下開花期玉米消減文庫(kù)。對(duì)兩個(gè)文庫(kù)部分克隆進(jìn)行測(cè)序,,獲得了940條cDNA序列,,確定了370條單一的ESTs在干旱脅迫處理中顯著上調(diào),并對(duì)部分感興趣的cDNA進(jìn)行了實(shí)時(shí)定量RT-PCR分析和全長(zhǎng)cDNA克隆,,并設(shè)計(jì)RNAi干擾體進(jìn)行基因功能分析,。
4、以鹽生植物鹽芥為材料進(jìn)行耐鹽相關(guān)基因及其啟動(dòng)子的克隆,,獲得了10條耐鹽相關(guān)基因和3個(gè)基因的啟動(dòng)子區(qū)域,,發(fā)現(xiàn)鹽芥耐鹽相關(guān)基因的功能與擬南芥中直向同源基因的功能基本相同,但表達(dá)譜可有很大差別,,基因啟動(dòng)子區(qū)域序列相似程度很低,,為植物耐鹽機(jī)制的認(rèn)識(shí)提供了重要資料。
5,、在玉米分子育種和基因克隆方面取得了較大突破,。構(gòu)建出我國(guó)玉米“掖478 ×90110” 的RFLP 圖譜;確定了玉米粗縮病抗性是由多基因決定的,,并將其中一個(gè)抗性位點(diǎn)定位在6號(hào)染色體上,,找到了與其緊密連鎖的分子標(biāo)記,為玉米抗粗縮病育種提供快速有效的途徑,;尋找到與大斑病抗性基因Ht2緊密連鎖的分子標(biāo)記,,克隆Ht2基因的工作取得了初步成果。
6,、建立起先進(jìn)的甜菜,、草坪草細(xì)胞工程和基因工程育種體系,獲得了一批具有重要價(jià)值的材料,。采用細(xì)胞工程技術(shù)培育出的生長(zhǎng)迅速高產(chǎn)耐鹽的飼用甜菜新品系在濱海鹽堿地種植顯示出良好的抗性和高產(chǎn)性,。在基因工程研究中,已將能夠提高植物耐鹽性或耐熱性的基因轉(zhuǎn)入黑麥草、早熟禾,、高羊茅和多個(gè)甜菜優(yōu)良品種中,,通過(guò)耐鹽性篩選,獲得了一批耐鹽耐旱的黑麥草,、早熟禾,、高羊茅和甜菜新種質(zhì)。
7,、研制出高效花生增產(chǎn)劑等產(chǎn)品,,獲得了農(nóng)業(yè)新技術(shù)新產(chǎn)品推廣許可證,并大面積推廣,。
8,、較系統(tǒng)研究了亞麻培養(yǎng)細(xì)胞脫分化過(guò)程及影響因素,提出了植物細(xì)胞脫分化階段的新劃分,。
9、誘導(dǎo)玉米未預(yù)處理芽尖直接產(chǎn)生雌,、雄花序,,并研究了基因型和外源因素的影響,對(duì)經(jīng)典的植物發(fā)育階段理論提出了修正,。