陸華中1﹡ 孫德明2 高峰1

1上海市血液中心 上海市輸血研究所 血液工程研究室（中國(guó) 上海,， 200051）

2美國(guó)阿拉巴馬大學(xué)神經(jīng)科神經(jīng)免疫中心（美國(guó) 伯明翰,，AL 35292）

﹡本項(xiàng)目由上海市自然科學(xué)基金資助（資助號(hào)：00ZB14053）

1﹡聯(lián)系人：陸華中,， e-mail: [email protected]

Chin Med J 2002;115(4):686-689

近年來(lái)研究顯示,，NKT細(xì)胞作為一類新的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞在抗腫瘤免疫,，克服移植排斥,，以及抑制自身免疫性疾病的發(fā)生中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,。NKT細(xì)胞的功能異常與多種臨床疾病,，如：腫瘤的轉(zhuǎn)移，自身免疫性疾?。ㄌ悄虿?，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，多發(fā)性硬化等）的發(fā)生有關(guān),。研究還顯示,，調(diào)控NKT細(xì)胞的功能可達(dá)到對(duì)腫瘤以及多種人類疾病的治療效果,。同時(shí)，一些實(shí)驗(yàn)還為人們開展NKT細(xì)胞的檢測(cè)與調(diào)控研究提供了有效的研究工具及研究手段,?；谶@些研究，本實(shí)驗(yàn)室建立了有關(guān)NKT細(xì)胞研究的技術(shù)平臺(tái),。利用這一平臺(tái)我們可以進(jìn)行NKT細(xì)胞的分離,、體外培養(yǎng)、擴(kuò)增與檢測(cè)分析,。我們的工作主要在于探討NKT細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用,。同時(shí)，致力于對(duì)NK/NKT細(xì)胞與普通T細(xì)胞之間在分化,，抗原遞呈與功能方面的共同點(diǎn)與差異的分析比較,。我們相信，充分認(rèn)識(shí)NKT細(xì)胞的作用及其機(jī)制有望為自身免疫性疾病,，移植排斥以及多種腫瘤的治療開辟一條新的途徑,。在此，本文將對(duì)NKT細(xì)胞的總體情況,，以及近年來(lái)的某些研究進(jìn)展作一綜述,。

概述
NKT細(xì)胞是CD4+CD8-或CD4-CD8-T細(xì)胞的一個(gè)亞類。但,，它表達(dá)NK細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記（NK1.1抗原和LY49受體）,，并顯示活化的表型（CD44highLy6ChighIL-2Rβhigh）以及選擇性的TCR受體表型（Vα14/Vβ8��小鼠，Vα24/Vβ11��人）(1-5),。NKT細(xì)胞受非經(jīng)典的MHC-I樣分子CD1d的限制性遞呈,。CD1d除在肝細(xì)胞表達(dá)外，在造血起源的組織細(xì)胞（如：DC,，B細(xì)胞,，T細(xì)胞和巨嗜細(xì)胞）也有表達(dá)。NKT細(xì)胞識(shí)別糖脂類抗原,，如α-GalCer��一種從海綿體中提取的可特異性地與CD1d分子結(jié)合的糖脂(6-10),。

NKT細(xì)胞在肝臟，以及骨髓中占T細(xì)胞總數(shù)的30%-50%,。NKT細(xì)胞表達(dá)半恒定的Vα14-Jα281/Vβ8 TCRs受體（在人類為Vα-JQ/Vβ11）,，同時(shí)，與T,、B細(xì)胞存在某些共性,，這些特征提示其屬于先天性免疫，而非獲得性免疫系統(tǒng)的一部分(10)。

Vα14 NKT細(xì)胞在自身免疫性疾病,，如lpr鼠模型,，糖尿病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡,，多發(fā)性硬化等疾病的發(fā)生以及在防止實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移方面扮演著重要的角色,，表明Vα14 NK T細(xì)胞在多種疾病的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中起調(diào)控作用。同時(shí),，有研究顯示NKT在骨髓移植中亦具有重要作用(11-14),。

NKT細(xì)胞具有三個(gè)主要特征：1）、共表達(dá)αβTCR和NK1.1受體,；2）,、選擇性表達(dá)恒定的Vα14和Vβ8，7,，2受體（C57BL/6 鼠）,；3、受CD1分子的限制性遞呈(1,3,15),。NKT淋巴細(xì)胞是一類特化了的細(xì)胞亞群,，占脾細(xì)胞的4%，成熟胸腺細(xì)胞的10-20%,，以及肝臟和骨髓中T細(xì)胞的30-50%(9),。CD1分子不僅提呈肽類

抗原，同時(shí)也提呈非肽類,，如酯類,，或糖酯類抗原給NKT細(xì)胞。最近研究顯示,，小鼠mCD1分子提呈疏水肽（hydrophobic peptide）給CD8+T細(xì)胞,，同時(shí)也被NK1.1+T細(xì)胞所識(shí)別，后者被認(rèn)為在免疫調(diào)節(jié)反應(yīng)中起重要作用,，因?yàn)槠淇蓪?dǎo)致IL-4的大量分泌,。

2、NKT細(xì)胞亞群

采取NK1.1抗體和CD1d-GalCer四聚物雙染色方法,，至少可將NKT分為3個(gè)主要不同的亞群(16),。1）,、普通NKT細(xì)胞（NK1.1+,，四聚物+）。表達(dá)半恒定的TCR受體,，同時(shí),，在CD1d缺陷小鼠的體內(nèi)發(fā)育障礙。這些細(xì)胞選擇性地聚集在胸腺和肝臟之中。主要為CD4+,，少部分為CD4-CD8-表型,。2）、NK1.1+陽(yáng)性,，但CD1d-GalCer四聚物熒光染色陰性的NKT細(xì)胞,。這些細(xì)胞不表達(dá)半恒定的TCR受體（而是隨機(jī)表達(dá)TCR Vα Vβ受體）。同時(shí),，在其發(fā)育過(guò)程中不依賴于CD1d分子,。這些細(xì)胞主要集中在脾臟和骨髓，而不是在胸腺和肝臟之中,。表型多為CD8+,，或CD4-CD8-。3）,、NK1.1-陰性,，但CD1d-GalCer四聚物染色陽(yáng)性的NKT細(xì)胞。盡管缺乏NK1.1抗原的表達(dá),，但,，這類細(xì)胞卻是CD1d依賴的，并且表達(dá)半恒定的TCRs受體,。

最近,，有研究報(bào)道一種新的NKT細(xì)胞亞群��NK1.1-CD1dhigh。CD1dhigh NKT細(xì)胞可通過(guò)其表面的CD1d分子介導(dǎo)自分泌和/或旁分泌,。同時(shí),，在與α-GalCer作用時(shí)，CD1dhigh NKT細(xì)胞分泌高水平的IL-4和相對(duì)較少的IFN-α,，這些細(xì)胞因子的表達(dá)更有利于Th2樣作用,，而不是Th0樣作用的發(fā)揮，這也是NK1.1+ NKT細(xì)胞的作用特點(diǎn)(17),。

新生兒NKT細(xì)胞與成人NKT細(xì)胞不同,，主要表現(xiàn)在以下特征方面存在差異：1）、新生兒NKT細(xì)胞表達(dá)活化的標(biāo)志,，如CD25,；2）、為多克隆性,；3）,、在接受抗原的初次刺激時(shí)不產(chǎn)生細(xì)胞因子(18)。

典型的NK1.1+TCRβ+細(xì)胞被認(rèn)為是CD4+CD8-,，或CD4-CD8-的,。然而，在缺乏典型NKT細(xì)胞的小鼠體內(nèi)（CD1d1-/-和J281-/-小鼠），由富集的CD8+ T細(xì)胞衍生的LAK細(xì)胞也顯示NK1.1+ CD8+的T細(xì)胞表型(19),。該研究還證實(shí),，CD8+ T細(xì)胞可能是NK1.1+CD8+ T細(xì)胞的前體細(xì)胞。

早期研究也已證實(shí)在正常大鼠體內(nèi)有3種不同的NKR-P1+淋巴細(xì)胞群存在,，包括NKR-P1bright/TCR-/CD3-/CD5-（約5-15%）,，NKR-P1dim/TCRαβ+/CD3+/CD5+（約1-5%）和NKR-P1dim/TCRγδ+/CD3+/CD5+（約0.5-2%）(20)。此外,，一個(gè)共表達(dá)γδ TCR和NK1.1受體的胸腺細(xì)胞亞群,，RT6+/RT6- NKT細(xì)胞，由II-/-小鼠衍生而來(lái),，其中,，大部分的NK1.1- CD4+ T細(xì)胞也是NKT細(xì)胞。其在正常小鼠脾臟中的數(shù)量同NK1.1+ NKT細(xì)胞的數(shù)量一樣多,。而且,，NK1.1- NKT細(xì)胞也可通過(guò)CD1d四聚體熒光染色而進(jìn)行檢測(cè)分析(21)。

3,、影響NK及NKT細(xì)胞發(fā)育的因素

近來(lái)研究顯示,，干擾素調(diào)節(jié)因子1-缺陷（IRF-1 -/-）小鼠因NKT細(xì)胞數(shù)量的嚴(yán)重低下導(dǎo)致IL-15的表達(dá)水平的降低(22)。在肝臟,，NKT細(xì)胞對(duì)使用低劑量抗CD3抗體與TCR受體結(jié)合所觸發(fā)的活化所誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡特別敏感（脾臟中的情況相對(duì)好一些）(23),。應(yīng)用α-GalCer處理小鼠可導(dǎo)致四聚體陽(yáng)性細(xì)胞的迅速消失，在肝臟尤為明顯,。一旦被激活,，NKT細(xì)胞將因?yàn)榈蛲龆豢焖偾宄６贔as缺陷小鼠（C57BL/6-1pr/lpr小鼠）則不會(huì)出現(xiàn)這種情況(24),。在人類,，隨著年齡的增長(zhǎng)，NK及NKT細(xì)胞常會(huì)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)和功能的異常(25),。

NK細(xì)胞可在IL-2,、IL-15的單獨(dú)作用下，或在IL-12與IL-18的聯(lián)合作用下,，由鼠的脾細(xì)胞衍生而成,。經(jīng)后者聯(lián)合作用所生成的NK細(xì)胞屬于一個(gè)同源性的細(xì)胞群（DX5+CD3-），而由IL-2或IL-15單獨(dú)作用所生成的細(xì)胞則由2個(gè)不同的異源性細(xì)胞群組成,，即NK細(xì)胞(DX5+CD3-)和T-NK細(xì)胞(DX5+CD3+)(26),。LFA-1是肝臟NKT細(xì)胞發(fā)育所必需的。

4,、NKT細(xì)胞在免疫反應(yīng)中的調(diào)節(jié)作用

在NOD小鼠,，經(jīng)抗體去除NKT細(xì)胞后可顯著加速疾病的發(fā)生過(guò)程。而給予過(guò)繼輸注經(jīng)α-GalCer,，而非α-ManCer,，預(yù)處理、活化的NKT細(xì)胞后可迅速緩解大腸炎的病情(27),。研究顯示,，誘導(dǎo)自身免疫性眼病系統(tǒng)耐受的發(fā)生需要有CD1-反應(yīng)性NKT細(xì)胞的參與。然而,，這種免疫耐受不能通過(guò)NKT細(xì)胞而被動(dòng)轉(zhuǎn)移,，意味著NKT細(xì)胞在其它免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化方面也起調(diào)節(jié)作用。研究也證實(shí),，NKT細(xì)胞在免疫赦免部位的免疫耐受誘導(dǎo)方面起著獨(dú)特的作用,，而且，這種系統(tǒng)耐受的誘導(dǎo)不需要采用靜脈注射途徑,。

在人類,，已經(jīng)證實(shí)NKT細(xì)胞的數(shù)量下降，或功能改變與自身免疫性疾病的發(fā)生有關(guān),。在多發(fā)性硬化癥復(fù)發(fā),，或緩解期患者體內(nèi)，Vα24-JαQ NKT細(xì)胞的數(shù)量與正常人,，或其它神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病與炎性疾病相比是明顯減少的,。同卵雙胞胎之間，糖尿病患病個(gè)體與無(wú)糖尿病個(gè)體相比,，NKT細(xì)胞的數(shù)量在前者明顯降低,。由這些糖尿病患者體內(nèi)經(jīng)分離所能獲得的Vα24-JαQ NKT細(xì)胞的數(shù)量也明顯減少，同時(shí),，這些NKT細(xì)胞克隆在產(chǎn)生IL-4方面存在缺陷,。至于NK,NKT以及RTC細(xì)胞是否在自身免疫性疾病的發(fā)生方面存在顯著不同的調(diào)節(jié)作用，以及這些細(xì)胞之間是否存在相互聯(lián)系,，只不過(guò)作用于免疫反應(yīng)的不同階段,，尚有待進(jìn)一步的探討。

4,、1 NK及NKT細(xì)胞與炎癥反應(yīng)：

研究顯示,，免疫細(xì)胞向炎癥部位的遷移是NK細(xì)胞依賴的(28)。在肝臟,，NK細(xì)胞向炎癥部位的遷移將加重炎癥反應(yīng)灶的大小以及侵潤(rùn)細(xì)胞的數(shù)量,。神經(jīng)膠質(zhì)瘤侵潤(rùn)細(xì)胞中就含有大量的NKRP1+細(xì)胞成份。CNS中所有炎性細(xì)胞的17%為NK細(xì)胞,，并且主要存在于血管周圍區(qū)域(29),。研究還表明,，CD56+(而不是CD56-)T細(xì)胞對(duì)少突狀細(xì)胞有細(xì)胞毒作用。MIP-1α是促進(jìn)NK細(xì)胞炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵性因子,。

4,、2 RTC與NK及NKT細(xì)胞之間的協(xié)同效應(yīng)：

研究顯示，肝脾NKT細(xì)胞的特異性激活可導(dǎo)致NK細(xì)胞的大量增殖與細(xì)胞毒效應(yīng),。NK細(xì)胞的活化至少部分取決于NKT細(xì)胞所產(chǎn)生的IFN-γ以及抗原遞呈細(xì)胞所產(chǎn)生的IL-12,。而且，由NKT細(xì)胞所引起的NK細(xì)胞的活化具有高度的選擇性,，因?yàn)橛膳杂^者效應(yīng)所引起的T,、B淋巴細(xì)胞反應(yīng)僅僅只出現(xiàn)活化表型的短暫表達(dá)，而且,，幾乎不出現(xiàn)增殖效應(yīng)(30),。CD8+淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞在免疫調(diào)節(jié)中可能存在協(xié)同作用。CD8+細(xì)胞可誘導(dǎo)NK細(xì)胞產(chǎn)生TGF-β, 而TGF-β則反過(guò)來(lái)刺激CD8+ T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為抗體生成抑制細(xì)胞(31),。同一實(shí)驗(yàn)顯示,，抗體生成的抑制需要有CD8+和NK細(xì)胞的共同參與。如果讓NK細(xì)胞與B細(xì)胞單獨(dú)作用,，則要么對(duì)抗體的生成無(wú)作用,，要么因所用B細(xì)胞的不同而產(chǎn)生微弱的促進(jìn)作用。NK細(xì)胞是產(chǎn)生TGF-β的主要效應(yīng)細(xì)胞,。TGF-β選擇性地刺激CD8+細(xì)胞增殖,，同時(shí)，介導(dǎo)CD8+細(xì)胞在免疫反應(yīng)中的抑制效應(yīng),。

4,、3 由活化NKT細(xì)胞所觸發(fā)的免疫級(jí)鏈反應(yīng)：

α-GalCer是一類具有抗腫瘤作用的醣脂類化合物，可與CD1d分子結(jié)合,，并介導(dǎo)小鼠vα14及人 vα24 NKT細(xì)胞的活化,。令人驚訝的是，當(dāng)體內(nèi)注射α-GalCer 90分鐘后,，NK細(xì)胞就顯示出相當(dāng)?shù)幕罨盘?hào),，包括IFN-γ的產(chǎn)生以及CD69的表達(dá)。隨后,，B細(xì)胞和CD8 T細(xì)胞也開始表達(dá)CD69,。這些發(fā)現(xiàn)提示，在體內(nèi),，先天性免疫與獲得性免疫系統(tǒng)之間存在一個(gè)高速的信息交流網(wǎng),，而這一網(wǎng)絡(luò)的觸發(fā)依賴NKT細(xì)胞的活化(32)。

4,、4 CD1-限制性NKT細(xì)胞反應(yīng)：

NKT細(xì)胞識(shí)別由CD1,，特別是CD1d分子所遞呈的抗原,。CD1分子是一種MHC-I樣分子，其遞呈酯類,，或醣酯類,，而不是肽類抗原給T淋巴細(xì)胞。有趣的是,，在缺乏外源性抗原存在的情況下，NKT細(xì)胞也可與CD1d分子相互作用,，導(dǎo)致自發(fā)性反應(yīng)的發(fā)生,。CD1分子基因家族在不同種屬，包括人類非常保守(33),。IL-4,，GM-CSF等淋巴因子是人CD1b表達(dá)的強(qiáng)的誘導(dǎo)因子(34)。CD1分子的誘導(dǎo)表達(dá)可導(dǎo)致NK1+T細(xì)胞的募集,、活化,，并產(chǎn)生大量的淋巴因子。鼠CD1（mCD1）分子在多數(shù)骨髓衍生細(xì)胞為組成性表達(dá),。肽-CD1復(fù)合物為CD8+細(xì)胞毒T細(xì)胞所識(shí)別,。而CD8-NK1.1 T細(xì)胞對(duì)mCD1分子則可產(chǎn)生自發(fā)性反應(yīng)。這種自發(fā)性反應(yīng)能力以及NKT細(xì)胞快速,、大量產(chǎn)生細(xì)胞因子的能力提示該細(xì)胞是一類免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞(35),。與經(jīng)典的I類分子不同，鼠CD1的表達(dá)水平不受IFN-γ的影響,，而人CD1b分子的表達(dá)則可因IL-4和GM-CSF的作用而上調(diào),，盡管影響不是很明顯。

4,、5 NKT細(xì)胞與腫瘤免疫：

NKT細(xì)胞可在體內(nèi)外介導(dǎo)抗腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒效應(yīng),，提示其在腫瘤免疫中起重要作用(6，36),。盡管體外試驗(yàn)支持NKT細(xì)胞可直接作為抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞而發(fā)揮作用,，但不排除NKT細(xì)胞的主要功能是通過(guò)激活其它免疫效應(yīng)細(xì)胞，如NK細(xì)胞來(lái)實(shí)現(xiàn)的可能(6, 32),。一些研究顯示,，小鼠NKT細(xì)胞可被誘導(dǎo)參與抗腫瘤反應(yīng)，但并不意味著這就是此類細(xì)胞的天然功能,。NKT細(xì)胞被證實(shí)是IL-12在體內(nèi)介導(dǎo)抗腫瘤效應(yīng)所必需的,。據(jù)報(bào)道，過(guò)繼性輸注IL-12活化的NKT細(xì)胞可防止B16黑色素瘤在肝臟的轉(zhuǎn)移(37),。而且,，該研究還證實(shí),，在NKT細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤作用的效應(yīng)階段，NKT細(xì)胞直接參與了細(xì)胞毒效應(yīng),，而不是細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫反應(yīng),。然而，由于NKT細(xì)胞可快速產(chǎn)生多種具有完全不同免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子,，其對(duì)免疫反應(yīng)的作用是促進(jìn),，還是抑制，尚難以定論,。近來(lái)的報(bào)道顯示,，其在腫瘤的控制與防止復(fù)發(fā)的過(guò)程中，免疫抑制功能可能占主導(dǎo)地位(38),。

4,、6 同種異體移植耐受與NKT細(xì)胞：

近年來(lái)，有關(guān)NKT細(xì)胞在免疫耐受的誘導(dǎo)與維持方面的作用已見于多方面的文獻(xiàn)報(bào)道,。來(lái)自于兩個(gè)不同動(dòng)物模型所獲得的研究結(jié)果顯示,，NKT細(xì)胞在免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)方面發(fā)揮著極其重要的作用(6， 39),。它不僅可通過(guò)Th2型細(xì)胞因子的分泌介導(dǎo)對(duì)GvHD反應(yīng)的抑制,，同時(shí)，還可在免疫赦免部位介導(dǎo)系統(tǒng)耐受的產(chǎn)生(40),。這些研究結(jié)果充分顯示NKT細(xì)胞在自體,，或同種異體移植耐受反應(yīng)中的作用。而且,，研究還發(fā)現(xiàn),，在vα14 NKT細(xì)胞缺陷小鼠，給予過(guò)繼性輸注 vα14 NKT細(xì)胞可導(dǎo)致移植物在受者動(dòng)物體內(nèi)的長(zhǎng)期植活(41),。CD8+NKT細(xì)胞被證實(shí)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有明顯的溶解作用,，經(jīng)2-3周的擴(kuò)增培養(yǎng)后，溶解率可高達(dá)90%以上,。單次注射經(jīng)體外擴(kuò)增的CD8+NKT細(xì)胞可保護(hù)給予致死量Bcll白血病細(xì)胞感染的受試小鼠免于死亡,。同時(shí)，應(yīng)用經(jīng)體外擴(kuò)增的CD8+NKT細(xì)胞僅產(chǎn)生比脾細(xì)胞顯著降低的GvHD反應(yīng),，而且,，即使是在應(yīng)用10倍于脾細(xì)胞數(shù)量的CD8+NKT細(xì)胞的情況下也是如此。GvHD反應(yīng)的降低與IFN-γ的產(chǎn)生有關(guān),。因?yàn)閼?yīng)用取自于IFN-γ基因敲除小鼠的細(xì)胞則可產(chǎn)生致死性的GvHD反應(yīng),，而應(yīng)用取自于Fas配體、Fas,、IL-2以及穿孔素缺陷小鼠的細(xì)胞則不產(chǎn)生GvHD反應(yīng),。這些結(jié)果提示,，以這種方式擴(kuò)增的CD8+NKT細(xì)胞的應(yīng)用可保留移植物抗白血病效應(yīng)(GvL)，但卻不產(chǎn)生GvHD反應(yīng)(42),。

5,、我們正在開展的工作

在上海市自然科學(xué)基金的資助下，我們與日本麒麟公司正在開展骨髓移植過(guò)程中NKT細(xì)胞的動(dòng)力學(xué),，以及KRN7000活化NKT細(xì)胞在減少GvHD反應(yīng)與加強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)雙向調(diào)節(jié)作用方面的合作研究,。本項(xiàng)目的目的在于闡明：1）、控制NKT細(xì)胞數(shù)量及功能狀態(tài)是否有利于移植骨髓的成活,；2）,、調(diào)控NKT細(xì)胞的功能對(duì)減少GvHD反應(yīng)與加強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)是否有效；3）,、活化NKT細(xì)胞（比如：應(yīng)用刺激物）,，或控制NKT細(xì)胞的數(shù)量是否可作為一種可上調(diào)所期望的免疫反應(yīng),，同時(shí)下調(diào)不需要的免疫反應(yīng)的有效方法而被應(yīng)用,；4）、以活化的NKT細(xì)胞作為一種細(xì)胞治療制品應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是否可達(dá)到抗GvHD與抗腫瘤的治療效果,。為解決上述問(wèn)題,，我們?cè)诒緦?shí)驗(yàn)室建立了有關(guān)NKT細(xì)胞研究的技術(shù)平臺(tái)，并在以下方面開展了初步的工作：1）,、NKT細(xì)胞的體外培養(yǎng)與擴(kuò)增：α-GalCer（100g/ml置于100%DMSO中）,，65℃ 5分鐘, 震蕩1分鐘，然后,，置于37℃,，至少30分鐘。在活化NKT細(xì)胞時(shí),，將濃度為30-100ng/ml的α-GalCer加入培養(yǎng)皿中,。并在第2，4,，9天時(shí),，加入濃度為50U/ml 的IL-2。擴(kuò)增的V24+ V11+ NKT細(xì)胞以抗-Vα24,，抗-Vβ11和以抗CD3單抗聯(lián)合標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)分析,。2）、NKT細(xì)胞的表型與功能檢測(cè)分析,；3）,、正在建立相關(guān)的腫瘤及移植動(dòng)物模型。我們相信,，NKT細(xì)胞的成功探索有望為白血病,，以及其它多種惡性腫瘤的治療,，特別是骨髓移植治療的開展開辟一條新的治療途徑。

參考文獻(xiàn)：

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摘自《中華醫(yī)學(xué)雜志》