對(duì)于鑒別T細(xì)胞的抗原決定基,以及監(jiān)控細(xì)胞對(duì)抗原刺激的反應(yīng)來(lái)說(shuō),,以陣列為基礎(chǔ)的新的戰(zhàn)略方法提供了一種敏感,、高通量的工具。
為了確定受體對(duì)某種免疫原刺激的反應(yīng)特征,,針對(duì)特定抗原的T細(xì)胞的鑒定和量化是一種高效的方法,。免疫原刺激可來(lái)自一種病原體,也可來(lái)自一種疫苗,。遺憾的是,,這種方法的實(shí)施過(guò)程讓人望而生畏;確實(shí)存在一些有效的技術(shù)如細(xì)胞增生陣列,,但對(duì)于大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),,這些方法耗時(shí)而且效率低下,。
在生物體內(nèi),當(dāng)縮氨酸向細(xì)胞表面主要組織相容性(MHC)蛋白質(zhì)運(yùn)動(dòng)時(shí),,抗原就會(huì)在免疫系統(tǒng)中出現(xiàn),。2003年,美國(guó)斯坦福大學(xué)的研究人員開(kāi)發(fā)出一種以陣列為基礎(chǔ)的系統(tǒng),,該系統(tǒng)利用固定的MHC-縮胺酸復(fù)合體來(lái)捆綁和隔離針對(duì)特定抗原決定基的T細(xì)胞,,展示了高通量T細(xì)胞分析方法的新前景。今天,,馬薩諸塞州大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員Lawrence Stern和博士后Jennifer Stone將這種技術(shù)向前推進(jìn)了一步,,讓研究人員不僅能夠隔離特定的T細(xì)胞群體,而且還能夠確定它們對(duì)所結(jié)合抗原的反應(yīng)程度和性質(zhì),。
每個(gè)陣列點(diǎn)都含有與不同縮胺酸聯(lián)結(jié)的MHC,旁邊是共同刺激抗體,;然而,,這些陣列點(diǎn)也包含有針對(duì)T細(xì)胞活化后所釋放的細(xì)胞活素類(lèi)抗體。在細(xì)胞與陣列結(jié)合后,,熒光抗體讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯現(xiàn)出來(lái),,并可鑒別出相關(guān)的細(xì)胞活素類(lèi)抗體。Stern說(shuō):“真正的進(jìn)步是用捕獲的抗體再加上我們的MHCs,,這樣不僅能夠吸引,、聯(lián)結(jié)和計(jì)數(shù)細(xì)胞,而且還能夠看到他們?cè)谖㈥嚵猩系墓δ芊磻?yīng),。”因?yàn)樘綔y(cè)過(guò)程是針對(duì)特定的活化作用,,所以這種方法只能發(fā)現(xiàn)交互功能;此外,,通過(guò)同步掃描幾種不同細(xì)胞活素類(lèi),,Stern的小組表明研究人員可確定T細(xì)胞活化過(guò)程的特定性質(zhì)。
Stern希望將這一新技術(shù)應(yīng)用到對(duì)濾過(guò)性毒菌特別是牛豆和登革熱的感染研究上,,他認(rèn)為這種技術(shù)有望成為快速鑒別由病原體所產(chǎn)生的免疫性縮胺酸的有力工具,。Stern說(shuō),如果人們能夠檢測(cè)到血液中的反應(yīng)信號(hào),,那將意味著這一技術(shù)非常有用,。對(duì)于一個(gè)注射過(guò)疫苗或者暴露于感染環(huán)境中的人來(lái)說(shuō),要檢測(cè)其血液中的細(xì)胞頻率,,這一方法所具有的敏感度是足夠的,,“我們事實(shí)上還不能檢測(cè)從個(gè)人身上獲取的外周血樣品,但這在將來(lái)的發(fā)展中具有優(yōu)先地位”,。
然而,,更重要的是這種先導(dǎo)性研究所展示了一種高效又經(jīng)濟(jì)的方法的希望,。Stern說(shuō):“這種技術(shù)的長(zhǎng)處在于它讓我們真正能將現(xiàn)有的陣列平行安放和小型化,這樣它們就能處理大規(guī)模的樣品了,。”“很可能,,你可以將部分血液樣品或一個(gè)血液產(chǎn)品放在上面,并進(jìn)行處理,,然后就只要用眼睛讀出結(jié)果即可,。”在與新型病原體威脅作斗爭(zhēng)的過(guò)程中,這種方法為臨床醫(yī)生和一線研究人員提供了一種重要方法,,讓他們可以搶先一步,。
注:亦農(nóng)翻譯自2005年第五期的《自然-方法學(xué)》,版權(quán)為英國(guó)NPG出版集團(tuán)所有,。