對(duì)于鑒別T細(xì)胞的抗原決定基,,以及監(jiān)控細(xì)胞對(duì)抗原刺激的反應(yīng)來說,以陣列為基礎(chǔ)的新的戰(zhàn)略方法提供了一種敏感,、高通量的工具,。
為了確定受體對(duì)某種免疫原刺激的反應(yīng)特征,針對(duì)特定抗原的T細(xì)胞的鑒定和量化是一種高效的方法,。免疫原刺激可來自一種病原體,,也可來自一種疫苗。遺憾的是,,這種方法的實(shí)施過程讓人望而生畏,;確實(shí)存在一些有效的技術(shù)如細(xì)胞增生陣列,但對(duì)于大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)來說,,這些方法耗時(shí)而且效率低下,。
在生物體內(nèi),當(dāng)縮氨酸向細(xì)胞表面主要組織相容性(MHC)蛋白質(zhì)運(yùn)動(dòng)時(shí),,抗原就會(huì)在免疫系統(tǒng)中出現(xiàn),。2003年,美國斯坦福大學(xué)的研究人員開發(fā)出一種以陣列為基礎(chǔ)的系統(tǒng),,該系統(tǒng)利用固定的MHC-縮胺酸復(fù)合體來捆綁和隔離針對(duì)特定抗原決定基的T細(xì)胞,,展示了高通量T細(xì)胞分析方法的新前景。今天,,馬薩諸塞州大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員Lawrence Stern和博士后Jennifer Stone將這種技術(shù)向前推進(jìn)了一步,,讓研究人員不僅能夠隔離特定的T細(xì)胞群體,而且還能夠確定它們對(duì)所結(jié)合抗原的反應(yīng)程度和性質(zhì),。
每個(gè)陣列點(diǎn)都含有與不同縮胺酸聯(lián)結(jié)的MHC,,旁邊是共同刺激抗體;然而,,這些陣列點(diǎn)也包含有針對(duì)T細(xì)胞活化后所釋放的細(xì)胞活素類抗體,。在細(xì)胞與陣列結(jié)合后,熒光抗體讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯現(xiàn)出來,,并可鑒別出相關(guān)的細(xì)胞活素類抗體,。Stern說:“真正的進(jìn)步是用捕獲的抗體再加上我們的MHCs,這樣不僅能夠吸引,、聯(lián)結(jié)和計(jì)數(shù)細(xì)胞,,而且還能夠看到他們?cè)谖㈥嚵猩系墓δ芊磻?yīng)。”因?yàn)樘綔y過程是針對(duì)特定的活化作用,,所以這種方法只能發(fā)現(xiàn)交互功能,;此外,通過同步掃描幾種不同細(xì)胞活素類,,Stern的小組表明研究人員可確定T細(xì)胞活化過程的特定性質(zhì),。
Stern希望將這一新技術(shù)應(yīng)用到對(duì)濾過性毒菌特別是牛豆和登革熱的感染研究上,,他認(rèn)為這種技術(shù)有望成為快速鑒別由病原體所產(chǎn)生的免疫性縮胺酸的有力工具。Stern說,,如果人們能夠檢測到血液中的反應(yīng)信號(hào),,那將意味著這一技術(shù)非常有用。對(duì)于一個(gè)注射過疫苗或者暴露于感染環(huán)境中的人來說,,要檢測其血液中的細(xì)胞頻率,,這一方法所具有的敏感度是足夠的,“我們事實(shí)上還不能檢測從個(gè)人身上獲取的外周血樣品,,但這在將來的發(fā)展中具有優(yōu)先地位”,。
然而,更重要的是這種先導(dǎo)性研究所展示了一種高效又經(jīng)濟(jì)的方法的希望,。Stern說:“這種技術(shù)的長處在于它讓我們真正能將現(xiàn)有的陣列平行安放和小型化,,這樣它們就能處理大規(guī)模的樣品了。”“很可能,,你可以將部分血液樣品或一個(gè)血液產(chǎn)品放在上面,并進(jìn)行處理,,然后就只要用眼睛讀出結(jié)果即可,。”在與新型病原體威脅作斗爭的過程中,這種方法為臨床醫(yī)生和一線研究人員提供了一種重要方法,,讓他們可以搶先一步,。
注:亦農(nóng)翻譯自2005年第五期的《自然-方法學(xué)》,版權(quán)為英國NPG出版集團(tuán)所有,。