微生物學(xué)報(bào) Acta Microbiologica Sinica
48(1):15~20; 4 January 2008
摘要:以pBeloBAC11為載體,成功構(gòu)建了蘇云金芽胞桿菌YBT-1765的基因組人工染色體(BAC)文庫(kù)和質(zhì)粒BAC文庫(kù),。根據(jù)已克隆的包含復(fù)制子ori165在內(nèi)的3.6kb片段中編碼復(fù)制蛋白R(shí)ep165的核苷酸序列設(shè)計(jì)探針, 通過(guò)染色體步移方式, 對(duì)質(zhì)粒文庫(kù)和基因組文庫(kù)進(jìn)行篩選, 得到13個(gè)覆蓋YBT-1765菌株中質(zhì)粒pBMB165不同區(qū)域的克隆子,。通過(guò)HindⅢ和BamHⅠ酶切分析, 建立了質(zhì)粒pBMB165的物理圖譜和線狀重疊連鎖圖, 并測(cè)算出該質(zhì)粒的大小為82kb,。根據(jù)部分核苷酸序列初步統(tǒng)計(jì)了pBMB165上轉(zhuǎn)座因子的存在機(jī)率,。YBT-1765菌株基因組文庫(kù)的構(gòu)建和物理圖譜的繪制為克隆蘇云金芽胞桿菌大質(zhì)粒提供了一套可行的方案, 成功解決了大質(zhì)粒難克隆的問(wèn)題,。
關(guān)鍵詞:蘇云金芽胞桿菌; 大質(zhì)??寺? BAC文庫(kù); 物理圖譜
中圖分類號(hào): Q93, Q78 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0001-6209(2008)01-0015-06
微生物學(xué)報(bào) Acta Microbiologica Sinica
48(1):15~20; 4 January 2008
基金項(xiàng)目: 國(guó)家“863 計(jì)劃”(2006AA02Z174, 20006AA10A212); 國(guó)家“973 項(xiàng)目”(2003CB114201)
*通訊作者,。Tel: +86-27-87283455; Fax: +86-27-87280670; E-mail: [email protected]
**作者簡(jiǎn)介: 同等貢獻(xiàn)作者,。王莉(1981− ), 女, 碩士研究生, 主要從事芽胞桿菌分子生物學(xué)研究。E-mail: [email protected]
收稿日期: 2007-05-08; 修回日期: 2007-06-27
ISSN 0001-6209; CN111995/Q
全文下載:蘇云金芽胞桿菌大質(zhì)粒pBMB165的克隆與分析
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