微生物學(xué)報 Acta Microbiologica Sinica
48(1)：15~20; 4 January 2008
摘要：以pBeloBAC11為載體,成功構(gòu)建了蘇云金芽胞桿菌YBT-1765的基因組人工染色體(BAC)文庫和質(zhì)粒BAC文庫,。根據(jù)已克隆的包含復(fù)制子ori165在內(nèi)的3.6kb片段中編碼復(fù)制蛋白Rep165的核苷酸序列設(shè)計探針, 通過染色體步移方式, 對質(zhì)粒文庫和基因組文庫進(jìn)行篩選, 得到13個覆蓋YBT-1765菌株中質(zhì)粒pBMB165不同區(qū)域的克隆子,。通過HindⅢ和BamHⅠ酶切分析, 建立了質(zhì)粒pBMB165的物理圖譜和線狀重疊連鎖圖, 并測算出該質(zhì)粒的大小為82kb。根據(jù)部分核苷酸序列初步統(tǒng)計了pBMB165上轉(zhuǎn)座因子的存在機(jī)率,。YBT-1765菌株基因組文庫的構(gòu)建和物理圖譜的繪制為克隆蘇云金芽胞桿菌大質(zhì)粒提供了一套可行的方案, 成功解決了大質(zhì)粒難克隆的問題。
關(guān)鍵詞：蘇云金芽胞桿菌; 大質(zhì)?？寺? BAC文庫; 物理圖譜
中圖分類號： Q93, Q78 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0001-6209(2008)01-0015-06
微生物學(xué)報 Acta Microbiologica Sinica
48(1)：15~20; 4 January 2008
基金項目: 國家“863 計劃”(2006AA02Z174, 20006AA10A212); 國家“973 項目”(2003CB114201)
*通訊作者,。Tel: +86-27-87283455; Fax: +86-27-87280670; E-mail: [email protected]
**作者簡介: 同等貢獻(xiàn)作者。王莉(1981− ), 女, 碩士研究生, 主要從事芽胞桿菌分子生物學(xué)研究,。E-mail: [email protected]
收稿日期: 2007-05-08; 修回日期: 2007-06-27
ISSN 0001-6209; CN111995/Q
全文下載：蘇云金芽胞桿菌大質(zhì)粒pBMB165的克隆與分析
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