微生物學報Acta Microbiologica Sinica
48(5):667~671;4 May 2008
斜臥青霉114-2 cbh1基因的TAIL-PCR克隆及與抗阻遏突變株JU-A10的比較
劉自勇,孫憲昀,曲音波*
(山東大學微生物技術國家重點實驗室,濟南250100)
基金項目:國家自然科學基金(30570049);國家“973項目”(2003CB716006)
*通訊作者。Tel:+86-531-88364429;Fax:+86-531-8856-5234;E-mail:[email protected]
作者簡介:劉自勇(1983?),男,河北清河人,碩士研究生,研究方向為資源與環(huán)境微生物學,。E-mail:[email protected]
摘要:
【目的】研究斜臥青霉(Penicillium decumbens)114-2與其抗阻遏突變株JU-A10外切酶基因序列的差異,。
【方法】用熱不對稱交錯PCR(TAIL-PCR)和RT-PCR擴增得到斜臥青霉114-2外切葡聚糖酶Ⅰ(cbh1)基因全長和cDNA全長。
【結果】cbh1基因全長為1500 bp,,含有兩個內(nèi)含子,,編碼453個氨基酸(GenBank,EF397602)??寺〔⒎治隽?.9 kb的cbh1基因上游序列,,分別發(fā)現(xiàn)了葡萄糖代謝抑制因子CREⅠ維素酶轉錄調控蛋白ACEΙ的兩個的潛在結合位點。
【結論】在相同的培養(yǎng)條件下,,其抗阻遏突變株JU-A10的外切酶活明顯高于野生株114-2,。兩菌株的cbh1基因序列完全一致,說明外切酶活明顯提高不是由于cbh1基因發(fā)生突變引起的,。
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