微生物學(xué)報(bào)Acta Microbiologica Sinica
48(5)：667~671;4 May 2008
斜臥青霉114-2 cbh1基因的TAIL-PCR克隆及與抗阻遏突變株JU-A10的比較
劉自勇,孫憲昀,曲音波*
(山東大學(xué)微生物技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,濟(jì)南250100)
基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金(30570049);國家“973項(xiàng)目”(2003CB716006)
*通訊作者,。Tel:+86-531-88364429;Fax:＋86-531-8856-5234;E-mail:[email protected]
作者簡介:劉自勇(1983?),男,河北清河人,碩士研究生,研究方向?yàn)橘Y源與環(huán)境微生物學(xué),。E-mail:[email protected]
摘要：
【目的】研究斜臥青霉（Penicillium decumbens）114-2與其抗阻遏突變株JU-A10外切酶基因序列的差異。
【方法】用熱不對稱交錯(cuò)PCR(TAIL-PCR)和RT-PCR擴(kuò)增得到斜臥青霉114-2外切葡聚糖酶Ⅰ(cbh1)基因全長和cDNA全長,。
【結(jié)果】cbh1基因全長為1500 bp,，含有兩個(gè)內(nèi)含子，編碼453個(gè)氨基酸(GenBank,EF397602),?？寺〔⒎治隽?.9 kb的cbh1基因上游序列，分別發(fā)現(xiàn)了葡萄糖代謝抑制因子CREⅠ維素酶轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白ACEΙ的兩個(gè)的潛在結(jié)合位點(diǎn),。
【結(jié)論】在相同的培養(yǎng)條件下,，其抗阻遏突變株JU-A10的外切酶活明顯高于野生株114-2,。兩菌株的cbh1基因序列完全一致，說明外切酶活明顯提高不是由于cbh1基因發(fā)生突變引起的,。
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