微生物學報Acta Microbiologica Sinica
48(7)：929~934;4 July 2008
祭芳1,2,，陳正賢3，徐劍宏1,，陸瓊嫻1,，史建榮1*
（1江蘇省農(nóng)業(yè)科學院，南京210014）
（2南京農(nóng)業(yè)大學植物保護學院,，南京210014）
（3浙江大學生物技術(shù)研究所,，杭州310029）
摘要：【目的】小麥赤霉病菌產(chǎn)生的毒素不僅在病害發(fā)展過程中具有加重赤霉病的作用，而且污染谷物導致嚴重的食用安全性問題,。由于赤霉病的普遍發(fā)生,，有必要建立快速、靈敏,、有效的毒素檢測方法,，本試驗旨在制備可用于檢測被脫氧雪腐鐮刀菌烯醇污染的糧谷類特異性單克隆抗體?！痉椒ā勘緦嶒炇紫葘⒚撗跹└牭毒┐迹―ON）的衍生物3-半琥珀酰-脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(3-HS-DON-OVA)與卵清蛋白（OVA）采用碳化二亞胺法進行偶聯(lián)得到人工抗原,，以此人工抗原免疫BAL B/C小鼠，取該鼠脾細胞與SP2/O鼠骨髓瘤細胞融合,，經(jīng)篩選和克隆,，得到了1株能穩(wěn)定分泌DON抗體的單克隆細胞株(3B2)，并制備單克隆抗體腹水,?！窘Y(jié)果】經(jīng)檢測3B2的抗體類型及亞類均為IgG1，其輕鏈為κ鏈,。腹水通過間接酶聯(lián)免疫吸附測定效價在1×10?7以上,。該單克隆抗體與脫氧雪腐鐮刀菌烯醇特異性結(jié)合反應的50%抑制質(zhì)量濃度為29μg/L，除與3-acetyldeoxynivalenol（3-Ac-DON）的交叉反應率為78.38%,，與其他脫氧雪腐鐮刀菌烯醇結(jié)構(gòu)類似物無交叉反應,。【結(jié)論】本實驗所制備的單克隆抗體有較高的靈敏度和特異性,，具有較好的應用價值,。
關(guān)鍵詞：脫氧雪腐鐮刀菌烯醇;單克隆抗體;酶聯(lián)免疫吸附測定
全文下載：抗脫氧雪腐鐮刀菌烯醇單克隆抗體的制備
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