微生物學(xué)報(bào)  4 May 2009, 49(5):580-584

斯氏假單胞菌A1501固氮新基因PST1305的功能分析

樊慧俐,，燕永亮,，李燕，平淑珍,，張維,，陳明，林敏,，陸偉＊

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所,，北京

摘要：【目的】研究斯氏假單胞菌A1501基因組“固氮島”中PST1305基因在A1501生物固氮過程中所起的作用?！痉椒ā坷猛粗亟M與三親接合的方法構(gòu)建PST1305的非極性突變株,。乙炔還原法測(cè)定固氮酶活。RT-PCR分析PST1305基因與其周圍基因轉(zhuǎn)錄單元的關(guān)系,Real-Time PCR比較PST1305在最佳固氮與非固氮條件下表達(dá)水平的差異,?！窘Y(jié)果】突變株np1305的固氮酶活顯著降低，功能互補(bǔ)菌株np1305Comp 能基本恢復(fù)細(xì)胞的固氮作用,。PST1305與其上游的nifB ,、fdxN 、下游的nifQ 等基因位于同一個(gè)轉(zhuǎn)錄單元,，組成一個(gè)操縱子,。基因芯片表明,，PST1305 基因在固氮比非固氮條件下表達(dá)量顯著上調(diào)（約38.7倍）,，Real-Time PCR 驗(yàn)證支持這一結(jié)果?！窘Y(jié)論】PST1305基因參與固氮過程,，其突變會(huì)影響固氮酶的活性，該基因可能通過參與A1501固氮酶電子傳遞或者固氮酶的氧保護(hù)過程影響固氮效率,。

關(guān)鍵詞：斯氏假單胞菌A1501 ,；生物固氮；Real-Time PCR  ,；固氮新基因

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