三氯化鋁沉淀法濃縮水體中的病毒
邱并生
(《微生物學(xué)通報(bào)》編委會(huì) 北京 100101)
近年來, 水源性病毒疾病的爆發(fā)在世界范圍內(nèi)被大量報(bào)道, 大量研究證實(shí)[1], 外環(huán)境水體及淤泥是病毒存活循環(huán)的主要場(chǎng)所, 并因此頻頻引發(fā)傳染病的流行。但在生活環(huán)境的各種水體中, 除生活污水外, 其所含有的病毒濃度往往很低, 以目前現(xiàn)有的檢測(cè)方法, 仍然達(dá)不到不經(jīng)濃縮而直接從水中檢測(cè)病毒的目的,。同時(shí), 食源性病毒的感染劑量非常低, 10?100個(gè)病毒粒子即可引發(fā)感染,。病毒在離體條件下存活力很強(qiáng), 對(duì)各種理化因子有較強(qiáng)的抵抗力, 耐乙醚和弱酸, 用氯仿、反復(fù)凍融,、超聲波處理都不能使其失活,。因此, 水環(huán)境中微量存在的病毒仍然對(duì)人類的健康帶來很大的威脅。
在我國(guó), 雖然已經(jīng)建立起了以PCR為主導(dǎo)的病毒快速檢測(cè)方法, 但是對(duì)于水樣本的前處理技術(shù)至今沒有找到十分理想的病毒濃縮方法, 無法有效去除樣本中的抑制物, 這些因素都嚴(yán)重制約了針對(duì)水中食源性病毒的檢測(cè)和預(yù)防,。要掌握各種水體中病毒污染的基本狀況, 樣品中病毒的濃縮是能否得以成功檢測(cè)的關(guān)鍵,。另外, 目前世界上絕大多數(shù)國(guó)家所執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)中, 對(duì)病毒的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及其指示生物都沒有做出明確說明, 歸根結(jié)底的原因是由于至今沒有建立起有效的方法。
有鑒于此, 針對(duì)水中病毒研究的熱點(diǎn)和存在問題, 本刊2009年第1期發(fā)表了寇曉霞,、吳清平等[2]針對(duì)自來水和污水兩種不同水體中病毒的濃縮方法,。在現(xiàn)有的檢測(cè)和濃縮方法的基礎(chǔ)上, 通過不斷創(chuàng)新, 解決現(xiàn)有方法中存在的主要問題, 摸索制約水體中病毒濃縮方法的關(guān)鍵點(diǎn), 評(píng)價(jià)不同方法的優(yōu)劣和實(shí)用性。三氯化鋁沉淀法最大的優(yōu)點(diǎn)是可適用于絕大多數(shù)具有不同水質(zhì)特性的水樣, 特別是可以克服膜過濾法因易堵塞而對(duì)水體懸浮物濃度有嚴(yán)格限制的缺陷,。另外, 就檢測(cè)條件而言, 該方法無需過濾裝置等, 也省去進(jìn)口的陽(yáng)電濾膜, 從應(yīng)用推廣的角度更為方便, 費(fèi)用成本低, 對(duì)于系統(tǒng)研究我國(guó)水中常見食源性病毒檢測(cè)和監(jiān)測(cè)有一定的應(yīng)用價(jià)值,。
目前, 該課題組對(duì)水體中病毒濃縮方法進(jìn)行了多方面的應(yīng)用。對(duì)廣州河涌水的病毒污染情況進(jìn)行了調(diào)研, 初步了解和掌握了病毒的污染狀況,。廣州市河涌水中食源性病毒污染的總陽(yáng)性率為37.8％,。其中有7個(gè)點(diǎn)呈諾如病毒陽(yáng)性, 8個(gè)點(diǎn)呈輪狀病毒陽(yáng)性。文獻(xiàn)[3?4]報(bào)道此類病毒的流行月份,、季節(jié)性與環(huán)境水中調(diào)查的病毒污染情況基本吻合, 說明了臨床發(fā)病與環(huán)境中此類病毒的污染有一定的相關(guān)性,。另外還有些點(diǎn)呈甲肝病毒陽(yáng)性和星狀病毒陽(yáng)性,。調(diào)研結(jié)果表明三氯化鋁沉淀法濃縮水體中病毒的方法具有實(shí)用性。
關(guān)鍵詞: 水, 病毒, 濃縮, 檢測(cè)
參 考 文 獻(xiàn)
[1] Koopmans M, Von Bonsdorff CH, Vinjé J, et al. Foodborne viruses[J]. FEMS Microbiol Rev, 2002, 26(2): 187?205.
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[3] Xu J, Yang Y, Sun J, et al. Molecular epidemiology of rotavirus infections among children hospitalized for acute gastroenteritis in Shanghai, China, 2001 through 2005[J]. J Clin Virol, 2009, 44(1): 58?61.
[4] Yu J, Cheng WX, Yang XM, et al. Viral agents associated with acute gastroenteritis in children hospitalized with diarrhea in Lanzhou, China[J]. J Clin Virol, 2009, 44(3): 238?241.
Concentration of viruses in water samples determined by AlCl3 precipitation
QIU Bing-Sheng
(The Editorial Board of Microbiology China, Beijing 100101, China)
Keywords: Water, Virus, Concentration, Detection
