李孟森（海南醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室,海口,571101）
李平風(fēng)（北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)系,北京,100083）
李剛（北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)系,北京,100083）
杜國光（海南醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室,?？?571101）
摘 要：為探討甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, AFP)對腫瘤細(xì)胞增殖的促進作用. 用從人臍帶血中提取的AFP作用于體外培養(yǎng)的HeLa細(xì)胞, 通過MTT計數(shù),、 [3H]-TdR參入法、流式細(xì)胞儀等研究細(xì)胞增殖, 并用放射免疫法測定細(xì)胞內(nèi)cAMP,、共聚焦顯微鏡掃描細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度等觀察細(xì)胞內(nèi)第二信使物質(zhì)的改變及測定32P轉(zhuǎn)移反映細(xì)胞內(nèi)蛋白激酶A(PKA)活性; 用Western 印跡分析法分析突變型p53,、 p21ras蛋白表達(dá). 結(jié)果顯示AFP(濃度大于10 mg/L)對HeLa細(xì)胞增殖有明顯的促進作用. 在AFP(20 mg/L)作用下, HeLa細(xì)胞cAMP濃度升高300%; Ca2+濃度最大升高154.9%、 PKA活性最大升高100%. 突變型p53和p21ras 分別增高81.1%(24 h)和96.2%(24 h). 抗甲胎蛋白單克隆抗體能有效地阻斷AFP促HeLa細(xì)胞增殖作用. 以上表明, (1)AFP具促HeLa細(xì)胞增殖的生理功能; (2)AFP促進HeLa細(xì)胞增殖的作用是通過影響細(xì)胞內(nèi)cAMP和Ca2+濃度以及PKA活性進而促進一些原癌基因的表達(dá)來實現(xiàn)的.
關(guān)鍵詞：甲胎蛋白; 細(xì)胞增殖; 信號轉(zhuǎn)導(dǎo); 基因表達(dá)
分類號：R979.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A
