1,、 干制標(biāo)本
植物臘葉標(biāo)本 植物臘葉標(biāo)本要保管在密封干燥的臘葉標(biāo)本櫥內(nèi)
新制標(biāo)本 因?yàn)槌S泻οx和蟲卵寄生,,入櫥最好用 藥消毒,。就是用二硫化碳約0。5KG盛在容器內(nèi),,放入殺蟲箱(1。7平方米)中,,兩日后開箱,,使毒氣散盡,拿出標(biāo)本。二硫化碳?xì)怏w比空氧重,。藥品應(yīng)放在標(biāo)本上面,?;蛘甙盐瓷吓_紙的標(biāo)本放入0。5%升汞酒精(工業(yè)用75%)溶液中浸一次,,制好后入櫥,。升汞)有毒,并不能與金屬起化學(xué)作用,,切忌使用金屬器械,。用時要帶橡皮手套,,事后用肥皂北朝洗手,標(biāo)本用什么藥品殺蟲,,應(yīng)在臺紙上注明,,以防中毒。
臘葉標(biāo)本櫥內(nèi)要放樟腦精以防蟲害,。
分類 入櫥標(biāo)本要進(jìn)行分類才便于利用,。植物根,、莖,、葉花果實(shí)的干制標(biāo)本,,可按課本上的次序排列。分類標(biāo)本在按照分類系統(tǒng),,分科排列,。目前標(biāo)本室常用的分類系統(tǒng)有恩格斯(AENGLER)、克朗奎(A,。CRONGUIST)等分類系統(tǒng)。櫥門上應(yīng)有分科目錄表,,櫥內(nèi)要有分科標(biāo)簽,,便于查找,。
維修 如果標(biāo)本中的葉片脫落,可用毛筆刷膠水(植物膠)在葉背面,,按照自然姿態(tài)貼好,陰干。枝莖斷裂的要用醋酸乙烯膠粘貼,再貼上膠水紙。發(fā)霉和蟲蛀的標(biāo)本,,用毛筆蘸95%酒精或10%福爾馬林液洗刷,干后用毛筆刷除霉斑,。臺紙和蓋紙破損的要調(diào)換新的,。
移動標(biāo)本,手腳要輕,,不要翻轉(zhuǎn)顛倒,。入櫥標(biāo)本,,不要太擠,。標(biāo)本外借,要多用填紙包裝,,注意防潮,。
植物種子標(biāo)本 要選擇典型無病蟲害的新種子,清除雜質(zhì)后曬干,,裝入種子瓶中,,并貼上標(biāo)簽,,經(jīng)常檢查,以防發(fā)霉蟲蛀,。
昆蟲標(biāo)本和植物病蟲害等盒裝標(biāo)本 大型昆蟲的腹部和柔軟部分以及烘干的幼蟲,,都容易發(fā)霉。盒裝的昆蟲生活史,、病蟲害等標(biāo)本里的安瓿容易破碎和標(biāo)簽脫落,,可將損壞部分掉換℃℃,。植物損壞部分可按照維修臘葉標(biāo)本方法維修。盒裝標(biāo)本內(nèi)應(yīng)放入樟腦,、硅膠等防蟲防潮藥品,。
其它 化石標(biāo)本要防止震動和碰撞,,損壞時用石膏填補(bǔ)和聚醋酸乙烯膠(乳白膠水)粘接,。鳥卵標(biāo)本卵殼損壞,可分塊取下粘貼,。循環(huán)系統(tǒng)干制標(biāo)本是用賽璐珞作填充物的,,脆性大,要防震,,如果損壞,,可以用毛筆蘸丙酮液粘接。
浸制標(biāo)本和材料
浸制標(biāo)本和實(shí)驗(yàn)材料都應(yīng)有標(biāo)簽,,標(biāo)簽要貼實(shí),外面涂蠟,,按編號平穩(wěn)地放入生物櫥中保存,。標(biāo)本瓶不能震動,以免打碎,,并且不宜放在有陽光直接照射,、高溫或0℃以下的地放,,以防封蠟熔化和玻璃瓶凍裂。植物實(shí)驗(yàn)材料也可以不用藥液浸制,,標(biāo)本瓶底放些浸有20%福爾馬林的藥棉,,上蓋白紙,再封口材料多時可以在塑料袋里放少量20%福爾馬林液體,,再放入實(shí)驗(yàn)材料,,扎緊袋口。也能長期保存,。要用登記簿按記號記下每瓶標(biāo)本的制作日期和藥液配方,便于日后檢查處理,。原色標(biāo)本要放在有板門的生物櫥內(nèi),,防止因陽光照射而退色。溶液發(fā)黃渾濁和標(biāo)本露出液面,,要及時更換和補(bǔ)充新液(加10%福爾馬林等),。
如果保存的實(shí)驗(yàn)材料將要變質(zhì),,可增加保存液濃度。浸制透明標(biāo)本會產(chǎn)生許多氣泡,,可用注射器抽出,。標(biāo)本上貼字號等如果落下,,可用藥棉吸干脫落部位,用明膠液(明膠克,,浸在50毫升水中泡一天后,再隔水加熱到溶化)粘貼,。如果固定標(biāo)本的玻璃板打碎,,用鉆石刀劃好玻璃,用砂輪獎四邊磨平,,重新固定放入,。
加換溶液和封瓶宜在夏季進(jìn)行,,因?yàn)橄募酒可w容易開啟,轉(zhuǎn)動蓋上的玻璃球,,然后撥出瓶蓋。也可用刀尖除去封蠟后開瓶,。
剝制標(biāo)本
剝制標(biāo)本應(yīng)按號放在生物櫥中,,過大的要自制玻璃櫥箱存放,要防潮,、防腐、防塵,、防蟲,、防鼠。櫥內(nèi)用硅膠或生石灰(用兩層紗布包好)作干燥劑,,用樟腦制劑驅(qū)蟲防霉(用紗布包好),。剝制標(biāo)本不能長期裸露放在櫥頂上積塵,。新剝制的未干標(biāo)本不要放入生物櫥,。
可以用煙熏劑消滅害蟲,,在春季,把標(biāo)本放在消毒箱里,,箱里放碟子,,上面放碗,碗里放硫磺,,碗上放鐵片條,,點(diǎn)著硫磺,,密封箱蓋,。兩日后打開箱蓋,,拿出標(biāo)本放入生物櫥中保存,。
脊椎動物標(biāo)本如果損壞,要選用種類,、性別,、大小相似的動物,,切下?lián)p壞的相應(yīng)部分,用大頭針固定,,涂上40%福爾馬林液防腐,,干后作修補(bǔ)用材料。修補(bǔ)后再整形涂色,。如魚的鰭條,、爬行動物的趾骨等斷裂,可切成兩個斜面,,用聚醋酸乙烯膠帖,。大型哺乳動物缺損可用油灰填補(bǔ),,再拔下腋窩,、腹部等處毛,用聚醋酸乙烯膠帖在油灰上,。
骨骼標(biāo)本
骨骼標(biāo)本要防止震動和撞散,用后蓋好,。受潮脫膠,,關(guān)節(jié)容易掉落。陽光久射要發(fā)黃變色,。骨骼斷裂或脫落時,,可用聚醋酸乙烯膠帖(用線固定)。
切片標(biāo)本
切片標(biāo)本要編號放在特別分格切片的木盒內(nèi),,盒內(nèi)兩側(cè)刻很多凹溝,,載波片的兩側(cè)沿凹溝插入,使載玻片直立在盒中,。每盒可裝50~100片,。盒子要直放,使標(biāo)本保持平放位置,。盒內(nèi)應(yīng)有每片標(biāo)本的編號和名稱目錄,,以方便查找使用。木盒應(yīng)放在干燥地方,,避免日光照射。切片也可用玻片標(biāo)本夾(格隔)保存,。
常用染料性能簡介
(一)天然染料
1,、蘇木精 蘇木精是從南美的蘇木(熱帶豆科植物)干枝中用乙醚浸制出來的一種色素,是最常用的染料之一,。蘇木精不能直接染色,,必須暴露在通氣的地方,使他變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)后才能使用,,這叫做"成熟"。蘇木精的"成熟"過程需時較長,,配置后時間愈久,,染色力愈強(qiáng)。被染材料必須經(jīng)金屬鹽作媒劑作用后才有著色力,。所以在配制蘇木精染劑時都要用媒染劑,。常用的媒染劑有硫酸鋁按,、鉀明礬和鐵明礬等。
蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體,,易溶于酒精,,微溶于水和甘油,是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料,,他能把細(xì)胞中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色,。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異,用酸性溶液(如鹽酸-酒精)分化后呈紅色,,水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色,用堿性溶液(如氨水)分化后呈藍(lán)色,,水洗后呈藍(lán)黑色,。
2、洋紅 洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產(chǎn)的雌性胭脂蟲干燥后,,磨成粉末,,提取出蟲紅,,再用明礬處理,除去其中雜質(zhì),,就制成洋紅,。單純的洋紅不能染色,要經(jīng)酸性或堿性溶液溶解后才能染色,。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,,堿性溶液有氨水,、硼砂等。
洋紅使細(xì)胞核的優(yōu)良染料,,染色的標(biāo)本不易褪色,。用作切片或組織塊染都適宜,尤其適宜于小型材料的整體染色,。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年,。洋紅溶液出現(xiàn)渾濁時要過濾后再用。
(二)人工染料
人工染料,,即苯胺染料或煤焦油染料,種類很多,,應(yīng)用極廣,。它的缺點(diǎn)是經(jīng)日光照射容易褪色,苯胺藍(lán),、亮綠,、甲基綠等更易褪色。在制片中注意掌握酸堿度,,并避免日光直射,也能經(jīng)幾年不褪色,。
1,、酸性品紅 酸性品紅是酸性染料,呈紅色粉末狀,,能容于水,,略溶于酒精(0.3%)。他是良好的細(xì)胞制染色劑,,在動物制片上應(yīng)用很廣,在植物制片上用來染皮層,、髓部等薄壁細(xì)胞和纖維素壁,。他跟甲基綠同染,能顯示線粒體,。
組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中,,可增強(qiáng)它的染色力,。酸性品紅容易跟堿起作用,,所以染色過度,,易在自來水中褪色。
2,、剛果紅 剛果紅是酸性染料,,呈棗紅色粉末狀,能溶于水喝酒精,,遇酸呈藍(lán)色,。他能作染料,,也用作指示劑。他在植物制片中常作為蘇木精或其他細(xì)胞染料的襯墊劑,。他用來染細(xì)胞質(zhì)時,,能把膠制或纖維素染成紅色。在動物組織制片中用來染神經(jīng)軸,、彈性纖維,、胚胎材料等,。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色,,也可用作類淀粉染色,,由于他能溶于水和酒精,,所以洗滌和脫水處理要迅速,。
3,、甲基藍(lán) 甲基藍(lán)是弱酸性染料,能溶于水和酒精,。甲基藍(lán)在動植物的制片技術(shù)方面應(yīng)用極廣,。他跟伊紅合用能染神經(jīng)細(xì)胞,也是細(xì)菌制片中不可缺少的染料,。它的水溶液是原生動物的活體染色劑,。甲基藍(lán)極易氧化,,因此用他染色后不能長久保存,。
4,、固綠 固綠是酸性染料,能溶于水(溶解度為4%)和酒精(溶解度為9%),。固綠是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細(xì)胞組織的染色劑,,在染細(xì)胞和植物組織上應(yīng)用極廣。他和蘇木精,、番紅并列為植物組織學(xué)上三中最常用的染料,。
5,、蘇丹Ⅲ 蘇丹Ⅲ是弱酸性染料,呈紅色粉末狀,,易溶于脂肪和酒精(溶解度為0.15%),。蘇丹Ⅲ是脂肪染色劑。
6,、伊紅 這類染料種類很多,。常用的伊紅Y,是酸性染料,,呈紅色帶藍(lán)的小結(jié)晶或棕色粉末狀,溶于水(15攝氏度是溶解度達(dá)44%)和酒精(溶于無水酒精的溶解度為2%),。伊紅在動物制片中廣泛應(yīng)用,,是很好的細(xì)胞質(zhì)染料,常用作蘇木精的襯染劑,。
7,、堿性品(復(fù))紅 堿性品紅是堿性染料,,呈暗紅色粉末或結(jié)晶狀,,能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。堿性品紅在生物學(xué)制片中用途很廣,,可用來染色膠原纖維、彈性纖維,、嗜復(fù)紅性顆粒和中樞神經(jīng)組織的核質(zhì),。在生物學(xué)制片中用來染維管束植物的木質(zhì)化壁,又作為原球藻,、輪藻的整體染色,。在細(xì)菌學(xué)制片中,長用來鑒別結(jié)核桿菌,。在 爾根氏反應(yīng)中用作組織化學(xué)試劑,已核查脫氧核糖核酸,。
8,、結(jié)晶紫 結(jié)晶紫是堿性染料,能溶于水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%),。結(jié)晶紫在細(xì)胞學(xué),、組織學(xué)和細(xì)菌學(xué)等方面應(yīng)用極廣,是一種優(yōu)良的染色劑,。他是細(xì)胞核染色常用的,用來顯示染色體的中心體,,并可染淀粉,、纖維蛋白、神經(jīng)膠質(zhì)等,。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細(xì)胞核不能成功時,,用它能得到良好的結(jié)果。用番紅和結(jié)晶紫作染色體的二重染色,,染色體染成紅色,紡錘絲染成紫色,,所以也是一種顯示細(xì)胞分裂的優(yōu)良染色劑,。用結(jié)晶紫染纖毛,效果也很好,。用結(jié)晶紫染色的切片,,缺點(diǎn)是不易長久保存。
9,、龍膽紫 龍膽紫是混合的堿性染料,,主要是結(jié)晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,,龍膽紫能跟結(jié)晶紫互相替用,。醫(yī)藥上用的紫藥水,主要成分是甲基紫,,需要時能代替龍膽紫和結(jié)晶紫,。
10、中性紅 中性紅是弱堿性染料,,呈紅色粉末狀,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%),。它的堿性溶液中呈現(xiàn)黃色,,在強(qiáng)堿性溶液中呈藍(lán)色,而在弱酸性溶液中呈紅色,,所以能用作指示劑,。中性紅無毒,,常做活體染色的染料,,用來染原生動物和顯示動植物組織中活細(xì)胞的內(nèi)含物等,。陳久的中性紅水溶液,用作顯示尼爾體的常用染料,。
11,、番紅 番紅是堿性染料,能溶于水和酒精,。番紅是細(xì)胞學(xué)和動植物組織學(xué)生常用的染料,能染細(xì)胞核,、染色體和植物蛋白質(zhì),,示維管束植物木質(zhì)化、木栓化和角質(zhì)化的組織,,還能染孢子囊。
12,、亞甲藍(lán)或美藍(lán) 亞甲藍(lán)或美藍(lán)是堿性染料,,呈藍(lán)色粉末狀,能溶于水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%),。亞甲藍(lán)是動物學(xué)和細(xì)胞學(xué)染色上十分重要的細(xì)胞核染料,,其優(yōu)點(diǎn)是染色不會過深,。
13,、甲基綠 甲基綠是堿性染料。它是綠色粉末狀,,能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%),。甲基綠是最有價值的細(xì)胞和染色劑,細(xì)胞學(xué)上常用來染染色質(zhì),,跟酸性品紅一起可作植物木質(zhì)部的染色,。
二、常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制
(一) 反應(yīng)劑
1,、檢查葡萄糖試劑
配方一 本尼迪克(Benedict)溶液
(1) 在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克無水碳酸鈉。
(2) 在50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅,。
把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,,邊加邊攪拌,如果產(chǎn)生沉淀,,要過濾,。本尼迪克溶液配制后能長期使用(存放時間較久而產(chǎn)生沉淀是,取上層清液使用,,不必重新配制),。
本尼迪克溶液用來測試食物,、血液和尿中的葡萄糖,可測出0.15 ~0.20%的葡萄糖,。這種溶液跟未知物同加熱時,,如果未知物中有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉淀物,。
配方二 裴林(Fehling)溶液
(1)把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中,。
(2)把125克氫氧化鉀(鈉)和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。
上述兩種溶液應(yīng)分別保存,。在檢測葡萄糖時,使他們等量的混合,,加入待測物的試管內(nèi),,加熱到沸騰。如果有葡萄糖,,會形成紅色的氧化亞銅沉淀物,。
2,、檢查淀粉的試劑
魯哥氏(Lugol's)溶液(碘液)
取6克碘化鉀溶于20毫升蒸餾水中,,攪拌到溶解后,,加入4克碘,等碘充分溶解,,在加入80毫升蒸餾水,貯存在棕色試劑瓶內(nèi),。
碘液用來測試食物樣品或葉片中的淀粉,,也用作染色劑,例如可染色鞭毛,、纖毛和細(xì)胞核等,。
3、檢查蛋白質(zhì)的試劑
配方一 米倫(Millon)試劑
在60毫升濃硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),,溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋,靜置澄清后,,取它上層的清液備用,。這種試劑可長期保存。
在待測物中加入少量米倫試劑,,加熱,,如果有蛋白質(zhì),會出現(xiàn)紅色,。這種試劑不能用來測定尿中的蛋白質(zhì),。
配方二 雙縮尿試劑
分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。
在3毫升待測物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液,。如果有蛋白質(zhì),會出現(xiàn)紫色反應(yīng),。
4,、檢查脂肪的試劑
蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液
取0.2克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ),放入純酒精中,,加熱,使它充分溶解,,成為飽和酒精溶液,,過濾后密閉在試劑瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?br />
5,、酸堿指示劑
配方一 酚酞試劑和試紙
酚酞試劑 取1克酚酞,,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存,。
酚態(tài)試紙 取1克酚酞,,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸餾水,。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕后,,取出,放在無氨氣影響處晾干,。
酚泰試劑(試紙) pH值變色范圍8.2~10,在酸性和中性溶液中都無色,,再堿性溶液中呈深紅色,。
配方二 紅藍(lán)石蕊試紙
取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中攪拌,,使它溶解,,然后過濾。把濾液分成兩份,。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現(xiàn)紅色為止,。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液,,到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條,,隨后取出濾紙條,,放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾干,,即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙,。
紅石蕊試紙在堿性溶液中變藍(lán),,藍(lán)石蕊試紙在酸性溶液中變紅。
6,、檢查二氧化碳的試劑
檢查二氧化碳的試劑,,可用溴代麝香草酚藍(lán)溶液和石灰水。
配方一 溴代麝香草酚藍(lán)溶液
取0.1克溴代麝香草酚藍(lán),,溶解在100毫升蒸餾水里,滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液,使它成為弱堿性溶液而呈藍(lán)色,。
溴代麝香草酚藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0(黃)~7.6(藍(lán)),。待測物中如果有二氧化碳,會形成碳酸而使溶液變成黃色,。
配方二 石灰水
在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣),,變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,,呈飽和狀態(tài)時為止。在石灰水澄清后,,傾出上層清液,,用濾紙過濾,放在密閉瓶內(nèi)保存,。
如果測定的物質(zhì)中有二氧化碳,,會生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁,。
7,、檢查細(xì)胞生活力的試劑
檢查細(xì)胞有無生活力,,可用中性紅甲基藍(lán)試劑,。配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍(lán)溶液,,這兩種溶液各取1份混合,用來鑒定細(xì)胞的死活,。該試劑使活細(xì)胞的液泡染上紅色,,而使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色。