生物谷報(bào)道:神經(jīng)元是一種相當(dāng)復(fù)雜的細(xì)胞類型,。構(gòu)建出神經(jīng)元的分子組織模型對(duì)研究神經(jīng)元的功能機(jī)制具有重要的意義。但是,,要想構(gòu)建一種神經(jīng)元分子組織定量模型就必須先獲得個(gè)體突觸上蛋白質(zhì)分子數(shù)量的信息,。
由日本東京醫(yī)科齒科大學(xué)醫(yī)學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)系的Yoshiko Sugiyama領(lǐng)導(dǎo)的一個(gè)由多個(gè)日本高校研究人員參與的研究組開(kāi)發(fā)出了一種通過(guò)測(cè)量帶有單個(gè)EGFP分子的微球體的熒光強(qiáng)度來(lái)估計(jì)興奮性突觸上個(gè)體蛋白質(zhì)絕對(duì)數(shù)量的方法。研究結(jié)果公布在8月23日出版的Nature Method上,。
在培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元中,,研究人員觀察到在神經(jīng)元分化和之后穩(wěn)定化期間每個(gè)單獨(dú)的突觸中突觸后蛋白數(shù)量的一種持續(xù)性的增加。到成熟期,,他們計(jì)算出一個(gè)單獨(dú)的興奮性突觸后位點(diǎn)含有100至450個(gè)個(gè)體突觸后蛋白,,包括PSD-95、GKAP,、Shank和Homer,。
這種窄范圍的突觸后蛋白內(nèi)容物意味著相對(duì)簡(jiǎn)單的后突觸分子組成。這種基于EGFP的測(cè)量技術(shù)則為人們提供了一種空前的,、用于估計(jì)大分子復(fù)合體中蛋白質(zhì)量的通用方法,。
原文出處:
Sugiyama Y, Kawabata I, Sobue K, Okabe S.Determination of absolute protein numbers in single synapses by a GFP-based calibration technique. Nat Methods. 2005 Sep;2(9):677-684