日前，廈門伯賽基因轉(zhuǎn)錄技術(shù)有限公司實驗室的研究人員對表達(dá)人ω干擾素（IFN-ω）的巴斯德畢赤酵母的發(fā)酵條件進(jìn)行研究,，確定出最佳發(fā)酵控制條件,，使ω干擾素表達(dá)量達(dá)到90毫克/升,比搖瓶培養(yǎng)的表達(dá)量提高了8倍,。

        ω干擾素是奧地利科學(xué)家Rudelf  Hamptman等于1985年發(fā)現(xiàn)的I型干擾素,，其與α干擾素功能相近,，但抗原性不同。近年來,，研究人員發(fā)現(xiàn)人ω干擾素具有同α干擾素,、γ干擾素以及腫瘤壞死因子相似的,，較強(qiáng)的抗病毒復(fù)制,、抗細(xì)胞增殖等作用，其臨床應(yīng)用已逐漸展開,。如美國Biomedicines公司的重組人ω干擾素用于治療丙型肝炎的臨床試驗已經(jīng)進(jìn)入Ⅱ期臨床,。軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所研制的重組人ω干擾素噴鼻劑也已開始臨床試驗。

        近兩年,，廈門伯賽基因轉(zhuǎn)錄技術(shù)有限公司實驗室構(gòu)建了重組人ω干擾素的分泌型畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)（pPIC9K  IFN-ωGS115）,。ω干擾素的搖瓶表達(dá)量約為10毫克/升，并且分離得到糖基化ω干擾素,，比活達(dá)到1×108國際單位/毫克,。目前，該公司已經(jīng)完成實驗室規(guī)模的分離和純化工作,。為了進(jìn)一步研究開發(fā),，該公司近期對人ω干擾素基因工程菌的發(fā)酵條件進(jìn)行了實驗研究。

        研究人員設(shè)計了三因素三水平正交試驗方案,，采用FBS培養(yǎng)基（二水硫酸鈣0.93克/升,，硫酸鉀18.2克/升，氫氧化鉀4.13克/升,，甘油醇縮丙酮10.0克/升,，磷酸26.7毫升/升，酵母提取物10.0克/升,，七水硫酸鎂14.9克/升,，14%的氨水50~70毫升，PTM4.35毫升/升）,，對pPIC9K  IFN-ωGS115基因工程畢赤酵母菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),，考察了不同溶氧、甲醇濃度和pH值對ω干擾素表達(dá)量的影響。發(fā)酵后用ELISA檢測發(fā)酵上清中目的蛋白濃度,。根據(jù)檢測結(jié)果,，采用直觀分析法對正交試驗結(jié)果進(jìn)行分析。

        研究結(jié)果表明,，溶氧太低或甲醇濃度太高均容易使生長受抑制,，甚至造成菌體死亡；而pH值對糖基化有重要影響,，適當(dāng)提高pH值有利于目的蛋白質(zhì)的糖基化修飾,。當(dāng)發(fā)酵的條件為：用FBS培養(yǎng)基，在5升的發(fā)酵罐內(nèi),，控制溫度28℃,，溶氧50%，甲醇濃度1%,，pH值為7.0時,，ω干擾素表達(dá)量可達(dá)到90毫克/升，比搖瓶表達(dá)量提高約8倍,。