Small interfering RNA (siRNA)：是一種小RNA分子（~21-25核苷酸）,，由Dicer（RNAase Ⅲ家族中對(duì)雙鏈RNA具有特異性的酶）加工而成,。SiRNA是siRISC的主要成員，激發(fā)與之互補(bǔ)的目標(biāo)mRNA的沉默,。
siRNA原理
siRNA是RNAi途徑中的中間產(chǎn)物,，是RNAi發(fā)揮效應(yīng)所必需的因子。siRNA的形成主要由Dicer和Rde-1調(diào)控完成,。由于RNA 病毒入侵,、轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)錄、基因組中反向重復(fù)序列轉(zhuǎn)錄等原因,細(xì)胞中出現(xiàn)了dsRNA,，Rde-1(RNAi缺陷基因-1)編碼的蛋白質(zhì)識(shí)別外源dsRNA,，當(dāng)dsRNA達(dá)到一定量的時(shí)候，Rde-1引導(dǎo)dsRNA與Rde-1編碼的Dicer（Dicer是一種RNaseIII 活性核酸內(nèi)切酶,，具有四個(gè)結(jié)構(gòu)域：Argonaute家族的PAZ結(jié)構(gòu)域,，III型RNA酶活性區(qū)域，dsRNA結(jié)合區(qū)域以及DEAH/DEXHRNA解旋酶活性區(qū)）結(jié)合,，形成酶-dsRNA復(fù)合體,。在Dicer酶的作用下，細(xì)胞中的單鏈靶mRNA（與dsRNA具有同源序列）與dsRNA的正義鏈互換,，原來(lái)dsRNA中的正義鏈被mRNA代替而從酶-dsRNA復(fù)合物中釋放出來(lái),，然后，在ATP的參與下,，細(xì)胞中存在的一種RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體RNA-induced silencing complex （RISC,，由核酸內(nèi)切酶、核酸外切酶,、解旋酶等構(gòu)成,，作用是對(duì)靶mRNA進(jìn)行識(shí)別和切割）利用結(jié)合在其上的核酸內(nèi)切酶的活性來(lái)切割dsRNA上處于原來(lái)正義鏈位置的靶mRNA分子中與dsRNA反義鏈互補(bǔ)的區(qū)域,，形成21-23nt的dsRNA小片段，這些小片段即為siRNA,。RNAi干涉的關(guān)鍵步驟是組裝RISC和合成介導(dǎo)特異性反應(yīng)的siRNA蛋白,。siRNA并入RISC中，然后與靶標(biāo)基因編碼區(qū)或UTR區(qū)完全配對(duì),，降解靶標(biāo)基因,，因此說(shuō)siRNA只降解與其序列互補(bǔ)配對(duì)的mRNA。其調(diào)控的機(jī)制是通過(guò)互補(bǔ)配對(duì)而沉默相應(yīng)靶位基因的表達(dá),，所以是一種典型的負(fù)調(diào)控機(jī)制,。siRNA識(shí)別靶序列是有高度特異性的，因?yàn)榻到馐紫仍谙鄬?duì)于siRNA來(lái)說(shuō)的中央位置發(fā)生,，所以這些中央的堿基位點(diǎn)就顯得極為重要,，一旦發(fā)生錯(cuò)配就會(huì)嚴(yán)重抑制RNAi的效應(yīng)。
siRNA特點(diǎn)：
1. 長(zhǎng)度約在22nt左右,。
2. 依賴Dicer酶的加工,，是Dicer的產(chǎn)物，所以具有Dicer產(chǎn)物的特點(diǎn),。
3. 生成需要Argonaute家族蛋白存在,。
4. 是RISC組分。
5. siRNA合成是由雙鏈的RNA或RNA前體形成的,。
6. siRNA是人工體外合成的,，通過(guò)轉(zhuǎn)染進(jìn)入人體內(nèi)，是RNA干涉的中間產(chǎn)物,。
7. 結(jié)構(gòu)上,， siRNA是雙鏈RNA。
8. 在Dicer酶的加工過(guò)程中,， siRNA對(duì)稱(chēng)地來(lái)源于雙鏈RNA的前體的兩側(cè)臂,。
9. 在作用位置上， siRNA可作用于mRNA的任何部位,。
10. 在作用方式上,， siRNA只能導(dǎo)致靶標(biāo)基因的降解，即為轉(zhuǎn)錄水平后調(diào)控,。
11. siRNA不參與生物生長(zhǎng),，是RNAi的產(chǎn)物，原始作用是抑制轉(zhuǎn)座子活性和病毒感染,。
