治療老年性癡呆中藥的藥效學(xué)研究評(píng)價(jià)探討
http://www.cde.org.cn 發(fā)布時(shí)間：2003/12/17 03:35:27 PM
治療老年性癡呆中藥的藥效學(xué)研究評(píng)價(jià)探討
審評(píng)一部藥理毒理組 黃芳華
進(jìn)入二十一世紀(jì),，全世界正步入全球老齡化時(shí)代,。老年性癡呆已成為心腦血管疾病和腫瘤之后的第四位疾病，目前,，全世界65歲以上人群中老年性癡呆患病率約為5%,。而老年性癡呆因其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)理，近期在防治上不可能取得突破性進(jìn)展,，故西方有專家預(yù)言,，老年性癡呆將是21世紀(jì)人類第一殺手，目前全球的AD病人估計(jì)在2000-2500萬左右,。老年性癡呆對(duì)患者,、家庭和社會(huì)都帶來巨大的壓力，使得全世界對(duì)其給予眾多的關(guān)注,，抗老年性癡呆的研究成為老年醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一個(gè)重要課題,。
目前，老年性癡呆的中藥新藥申報(bào)品種出現(xiàn),，而且有日漸增多的趨勢,。在這種情況下，探討中藥新藥的藥效學(xué)研究評(píng)價(jià)成為必需,。與大部分其它疾病不同的是,，老年性癡呆的發(fā)病機(jī)理極其復(fù)雜，藥效學(xué)研究評(píng)價(jià)尚有一定的難度,，本文根據(jù)現(xiàn)有的研究水平,，對(duì)藥效學(xué)評(píng)價(jià)進(jìn)行初步的探索。以下僅是個(gè)人觀點(diǎn),，錯(cuò)誤及片面之處在所難免,，此文的撰寫目的是拋磚引玉，希望更多的相關(guān)專家對(duì)此問題進(jìn)行廣泛的討論,，以使評(píng)價(jià)更趨科學(xué),、合理,。
一、老年性癡呆的概況
阿爾采末病(Alzheimer’s disease,AD)是一種發(fā)生于老年期或老年前期的一種慢性進(jìn)行性的神經(jīng)變性疾病,，以進(jìn)行性的記憶認(rèn)知障礙,、人格改變?yōu)橹饕卣鳎珹D腦內(nèi)的主要病理改變?yōu)槔夏臧撸╯enile plaque,，SP）,、神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangle,NFT）及大量的神經(jīng)元丟失，主要發(fā)生在前腦基底,、海馬和大腦皮層,。一般稱之為老年性癡呆。
從1907年報(bào)道第一例老年性癡呆病始,，全世界的醫(yī)學(xué)家為這一病癥進(jìn)行了不懈的探索,，但直至21世紀(jì)的今日，因其病因復(fù)雜,，目前尚未明確,。關(guān)于其機(jī)理研究，現(xiàn)在主要有以下幾種學(xué)說,，如基因?qū)W說,、膽堿能學(xué)說、傳染學(xué)說,、鋁中毒學(xué)說,、自由基學(xué)說、炎癥學(xué)說,、鈣超載學(xué)說,、代謝紊亂學(xué)說，雖然各種假說有其合理性的一面,，但均存在其局限性,，不能全面解釋AD復(fù)雜、廣泛的神經(jīng)系統(tǒng)病理變化,。但能肯定的是：AD的發(fā)病與機(jī)體衰老密切相關(guān),。近年來，對(duì)AD與淀粉樣蛋白的關(guān)系成為研究的熱點(diǎn),。
發(fā)病機(jī)理不明也影響了AD藥物的開發(fā)。目前,，AD的治療尚無特效藥物,，其中乙酰膽堿酯酶抑制劑（Acetylcholinesterase inhibitor,AchEI）一直是開發(fā)活躍、成果突出的領(lǐng)域,。它的開發(fā)主要源于膽堿能學(xué)說,。從20世紀(jì)70年代一些科學(xué)家發(fā)現(xiàn)AD患者的膽堿能神經(jīng)元功能有不同比例的嚴(yán)重障礙,，膽堿能缺陷反應(yīng)合成Ach的膽堿乙酰化酶（ChAT）的減少,，伴AchE表達(dá)下降,。因而改善膽堿能神經(jīng)元突觸傳遞，激活突觸后神經(jīng)元功能膽堿酯酶抑制劑減少Ach分解,，促進(jìn)突觸傳遞強(qiáng)度,，改善突觸后神經(jīng)元功能，這類藥物是目前治療AD的主要藥物,，對(duì)輕,、中度AD具有一定效果。已被FDA認(rèn)可并在多國上市的他克林,、安理申,、加蘭他敏等均屬AchEI類。從中草藥千層塔中提取的石杉?jí)A甲是一種生物活性高,，對(duì)真性膽堿酯酶具有選擇性的可逆性膽堿酯酶抑制劑,。
二、老年性癡呆相關(guān)動(dòng)物模型
因AD病因復(fù)雜,，故相應(yīng)的也缺乏嚴(yán)格意義的AD體內(nèi)外模型,，現(xiàn)在國內(nèi)外大部分體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)只能反映AD某一部分的改變,，因而不應(yīng)稱為AD模型,。近年來許多學(xué)者正致力于尋找和研究AD動(dòng)物模型，對(duì)AD模型報(bào)道也較多,，雖然分類各有不同,，但大致可分為以下幾類[1、2]
（一）膽堿能損傷致癡呆模型
1．穹窿-海馬傘切斷致癡呆大鼠模型 該模型是建立在AD認(rèn)知障礙的膽堿能假說基礎(chǔ)上,，較好地模擬了AD前腦膽堿能系統(tǒng)的損害,，而且造成了神經(jīng)損傷，可用于觀察擬膽堿藥物的藥效學(xué)評(píng)價(jià),，還可觀察藥物對(duì)神經(jīng)功能損傷的修復(fù)作用,，是老年性癡呆臨床前藥效學(xué)研究的重要模型。該模型的不足之處是雖然具有學(xué)習(xí)記憶功能的損害,，但并不出現(xiàn)老年斑,、神經(jīng)元纖維纏結(jié)和淀粉樣蛋白沉積形成等最內(nèi)典型的組織病理學(xué)特征，也無AD病人全身多系統(tǒng)功能衰老的表現(xiàn),。
2．基底前腦注射鵝蒿蕈氨酸（ibotenic acid ,IBO）致癡呆模型大鼠 該模型屬興奮性毒素致基底核損害模型,。通過該模型可反映導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶功能下降的病理基礎(chǔ)-基底前腦膽堿能神經(jīng)元缺失，因而也是廣泛應(yīng)用的模型。該類模型的缺陷是不能反映AD發(fā)生的病因,，不能產(chǎn)生AD的病理學(xué)特征,，如老年斑、神經(jīng)原纖維纏結(jié)等,，這種興奮性毒素所產(chǎn)生的損害只能模型AD大腦皮層突觸膽堿能缺陷,，而這些動(dòng)物的海馬ChAT則不受影響。興奮性毒素還包括紅藻酸鈉,、N-甲基天門冬氨酸,、使君子酸等。紅藻氨酸也可誘導(dǎo)產(chǎn)大鼠基底核損害,，可使皮層ChAT損失40-50%,，并與Ach水平、HAChT和AchE活性的降低相平行,，而其他遞質(zhì)系統(tǒng)無明顯改變,，而且在避暗試驗(yàn)中出現(xiàn)記憶保持障礙，可作為潛在的動(dòng)物模型,，但紅藻酸鈉是一種強(qiáng)效的驚厥藥,，能產(chǎn)生損害，因此不如IBO應(yīng)用廣泛,。
3．東莨菪堿致膽堿能損傷擬癡呆小鼠 東莨菪堿為M膽堿能受體阻斷劑,，可阻斷乙酰膽堿對(duì)M受體的激動(dòng)作用，造成了學(xué)習(xí)記憶功能障礙,。但是該模型不直接引起膽堿能神經(jīng)缺失,，而且缺乏研究AD病理生理所必需的特征，如AD是一種進(jìn)行性不可逆變性,，而該模型為化學(xué)性模型,，恢復(fù)快是其局限性，可用于早期藥物的篩選,。
（二）老化致癡呆模型
1．自然衰老動(dòng)物 較常用的是自然衰老大鼠,，24月齡以上，另外也有采用老年狗或猴者,，該模型是較為接近AD實(shí)際病理改變的動(dòng)物模型,，在此基礎(chǔ)上觀察老年性癡呆治療藥物能較好地反映藥物的作用機(jī)理和效果。但是其不足之處有：（1）由于AD是一種不同于正常衰老的進(jìn)行性神經(jīng)功能衰退性疾病,，故老年動(dòng)物有其局限性,，它只是部分模擬了與人正常衰老相關(guān)的神經(jīng)生化改變，而不能全面模擬AD的變化,。（2）有實(shí)驗(yàn)材料較難得,、需長時(shí)間飼養(yǎng),、死亡率高，實(shí)驗(yàn)周期長等缺點(diǎn),，大大限制了該模型的應(yīng)用。（3）老年動(dòng)物的健康狀況的差異,，以及在藥物吸收,、代謝和分布上的變異性，有時(shí)會(huì)產(chǎn)生統(tǒng)計(jì)學(xué)意義不確定的結(jié)果,。
2．快速老化小鼠（SAM） 快速老化小鼠分為快速老化亞系（senescence accelerated mouse/prone,SAM-P）及抗快速老化亞系（senescence accelerated mouse/resistance,SAM-R）,，它是由日本京都大學(xué)首次培育成功，經(jīng)20多代交配近繁,，獲得了遺傳性與病理表型一致,，符合近交系標(biāo)準(zhǔn)的新系列。SAM-P品系中,，有兩個(gè)亞品系P8和P10除具有P品系的一般老化癥狀外,，還伴隨著快速老化出現(xiàn)的學(xué)習(xí)記憶力障礙和低恐怖低緊張狀態(tài)，為腦老化癡呆模型小鼠,。兩亞系的共同點(diǎn)是均具有認(rèn)知障礙,，且在渡過生長期后，伴快速老化自然發(fā)生,，與臨床癡呆的漸進(jìn)性發(fā)生極為相似,，它們還各具特點(diǎn)，如P8腦中出現(xiàn)明顯的A鈣沉積,、PAS染色陽性顆粒狀結(jié)構(gòu)和海綿樣變性,，P10則伴有廣泛性腦萎縮。大量研究表明,，P8和P10是比較理想的研究腦老化和癡呆的模型,，與其同源對(duì)照R1相比，其行為學(xué),、形態(tài)學(xué),、神經(jīng)生化、多種酶類以及組織蛋白和基因表達(dá)均出現(xiàn)異常[3],。SAM-P小鼠為探討衰老及衰老相關(guān)疾病的發(fā)生,，評(píng)價(jià)藥效及其作用機(jī)制提供了良好的動(dòng)物模型，其中SAM-P8較多用,。但是該模型來源比較困難,。
3．D-半乳糖皮下注射致腦老化小鼠模型 該模型在國內(nèi)廣泛應(yīng)用于抗衰老的研究。它可模擬AD的氧化損傷,，還發(fā)現(xiàn)小鼠學(xué)習(xí)記憶下降,、腦內(nèi)膽堿能系統(tǒng)功能衰退,、神經(jīng)遞質(zhì)代謝異常、皮層和海馬神經(jīng)元損傷,、超微結(jié)構(gòu)和突觸可塑性發(fā)生衰老性改變等與AD類似的改變等,。但是它對(duì)AD缺乏針對(duì)性，而且國外幾乎很少使用該模型,。
（三）A鈣致癡呆模型
1．APP轉(zhuǎn)基因小鼠 該模型是以根據(jù)分子遺傳學(xué)和胚胎學(xué)理論和技術(shù),，利用顯微注射的方法將APP基因或基因片段整合入小鼠的基因組中，使得小鼠腦部表達(dá)人APP基因,，通過APP蛋白在大腦中累積,，產(chǎn)生老年斑，從而造成小鼠老年性癡呆轉(zhuǎn)基因模型,。該模型為研究APP代謝,、AD的發(fā)生和發(fā)展及藥物干預(yù)對(duì)發(fā)病進(jìn)程的影響提供了模型，同時(shí)現(xiàn)在該模型已能夠復(fù)制出類似AD病人腦內(nèi)的部分病理變化,，同時(shí)有學(xué)習(xí)記憶功能的障礙,。該模型是國際承認(rèn)的主要AD動(dòng)物模型。但是該模型大部分只是移植了一到兩個(gè)APP基因,，與真正的一組基因控制的動(dòng)物模型還有一定的差距,，而且該模型動(dòng)物價(jià)格較昂貴。
2．A鈣注射致癡呆模型 該模型是利用A鈣是AD患者腦中老年斑的核心蛋白,，AD發(fā)病與腦內(nèi)炎癥改變而制作,。故將A鈣肽段注入動(dòng)物海馬區(qū)，可較好地反映AD的特征性改變A鈣在AD發(fā)病中的作用,，該模型可用于研究治療AD藥物在A鈣聚積或沉積,、神經(jīng)毒性作用和小膠質(zhì)細(xì)胞的炎性反應(yīng)等方面作用，是臨床前藥效學(xué)評(píng)價(jià)的重要模型,。目前一般推薦使用A鈣1-40肽段大鼠海馬內(nèi)注射模型,，也有用A鈣25-35海馬注射者。另外還有A鈣腦室注射致癡呆模型,，該模型利用了A鈣直接注入腦室,，經(jīng)側(cè)腦室彌漫至全腦，更接近于A鈣引起細(xì)胞毒作用的實(shí)際過程,。
（四）慢性腦缺血致癡呆模型
近年來血管因素在AD發(fā)病中的作用越來越引起人們的重視,。腦供血不足可導(dǎo)致腦損傷和一系列的臨床癥狀，,，因而腦缺血模型也逐漸用于老年性癡呆藥物的研究,。有研究發(fā)現(xiàn)大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎致腦缺血模型可引起行為缺失和腦組織病理生理改變，在許多方面與癡呆（包括AD）相類似,；也有用結(jié)扎16月齡大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈同時(shí)燒灼一側(cè)椎動(dòng)脈造成腦長期供血不足者,。有報(bào)道稱有腦血管病的患者AD發(fā)病率高于正常人,，而且臨床上有不少AD患者同時(shí)合并血管性癡呆和腦供血不足等情況。故腦缺血模型可作為AD模型的補(bǔ)充,，更適合于混合型癡呆的藥物作用觀察,。
（五）其它模型
1．鋁模型 鋁誘導(dǎo)癡呆模型是以AD的鋁中毒假說為基礎(chǔ)的。據(jù)報(bào)道,，AD患者腦組織內(nèi)鋁含量較正常人高,，其原因可能是病人血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白有缺陷，無法將血液中的鋁適當(dāng)清除,，多余的鋁進(jìn)入大腦后參與形成神經(jīng)纖維纏結(jié)和老年斑，損傷神經(jīng)元,。鋁劑注入動(dòng)物腦內(nèi)可出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶功能減退,，如家兔腦內(nèi)注射鋁、小鼠三氯化鋁注射等,，也有采用口服枸椽酸鋁使動(dòng)物發(fā)生學(xué)習(xí)記憶障礙和AD樣病理改變,，造成擬癡呆模型。但該模型所形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)沒有PHF或磷酸化的tau蛋白,，且中樞膽堿能活性正常,，因而用鋁是否能造成AD模型尚有需進(jìn)一步研究。
2．線粒體缺陷致癡呆模型 有報(bào)道AD與腦內(nèi)線粒體氧化磷酸化異常有關(guān),。疊氮鈉（NaN3）是線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV的特異性抑制劑,，有報(bào)道應(yīng)用微泵長期、緩慢,、恒速地給予疊氮鈉,，模擬老年性癡呆長時(shí)程、進(jìn)行性惡化的發(fā)病特點(diǎn),，可導(dǎo)致腦內(nèi)細(xì)胞色素C氧化酶（即線粒體呼吸鏈復(fù)合體IV）活性下降并引發(fā)學(xué)習(xí)記憶障礙,。
3．蛋白磷酸化酶抑制劑慢性損害致癡呆模型 神經(jīng)原纖維纏結(jié)是AD腦內(nèi)病理改變之一，過度磷酸化的tau蛋白是AD患者神經(jīng)元NFT的主要成分,，該模型利用蛋白磷酸酶的特異性抑制劑Okadic acid可引起培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞tau蛋白磷酸化水平增高,、細(xì)胞骨架損傷、細(xì)胞形態(tài)改變以及存活率下降,。該模型主要用于針對(duì)tau蛋白藥物的藥效觀察,。該模型造價(jià)昂貴。
4．自然免疫癡呆模型 該模型是基于AD的自身免疫學(xué)說,，因而許多實(shí)驗(yàn)室采用多種自然免疫動(dòng)物模型來研究AD的發(fā)病機(jī)制,，并開始用于AD藥物篩選。如Sakic等建立了MRL-1pr小鼠模型,，并將MRL,、NZB,、BXSB品系小鼠雜交，建議了一種系統(tǒng)紅斑狼瘡樣的自身免疫小鼠模型,，發(fā)現(xiàn)有學(xué)習(xí)記憶功能衰退,。目前，這類模型的研究正成為新的熱點(diǎn),。
5．靈長類動(dòng)物 值得注意的是,，現(xiàn)有亦有研究用靈長類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行AD研究的。恒河猴與AD相關(guān)的病變包括認(rèn)知功能障礙,、神經(jīng)元丟失和變性,、老年斑和血管淀粉樣蛋白沉積等，其中病理表現(xiàn)是確診AD的重要依據(jù),。除恒河猴外,，包括食蟹猴、狒狒,、松鼠猴,、黑猩猩和狐猴等也觀察到了腦實(shí)質(zhì)的淀粉樣蛋白沉積[4]。另外,，人工誘發(fā)恒河猴AD樣病理的方法包括化學(xué)物質(zhì)損傷,、金屬中毒、轉(zhuǎn)基因,、手術(shù)損傷和自身免疫方法損傷等,，如損傷膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)模型、鈣淀粉樣肽損傷模型,。因恒河猴模型較嚙齒類模型更好地模擬了AD的病理變化,，但目前模型制作尚不夠完善，有待于進(jìn)一步突破,。而且也應(yīng)注意到與人類的差別,，以及不同靈長類動(dòng)物之間的種屬差異，而從行為學(xué),、病理學(xué)和遺傳學(xué)的研究方面進(jìn)行深入研究,。
6．記憶障礙模型 目前在癡呆藥物中常用到各種記憶障礙模型，如M膽堿受體阻滯藥東莨菪堿（前文已有敘述）或樟柳堿造成的記憶學(xué)習(xí)障礙模型,、腦蛋白質(zhì)合成抑制劑環(huán)乙酰亞胺或致腦缺氧劑如亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙模型,、中樞抑制劑如乙醇如記憶再現(xiàn)障礙模型，以上模型均可用于對(duì)學(xué)習(xí)記憶作用的篩選,，但不應(yīng)稱之為AD模型,。
7．體外篩選模型 目前有利用體外模型進(jìn)行老年性癡呆藥物的初篩，如將M膽堿能受體應(yīng)用放射性免疫方法建立抗早老性癡呆藥的Ｍ1受體篩選模型[5],，該模型在人胚腎細(xì)胞上表達(dá)人源M1受體,通過檢測胞內(nèi)cAMP來監(jiān)測受體的激動(dòng)情況,。使用外源性的3HcAMP競爭胞內(nèi)的cAMP結(jié)合位點(diǎn),。使用氯化乙酰膽堿作為陽性藥來確證模型的可靠性，結(jié)果顯示該模型對(duì)M1受體激動(dòng)劑有陽性反應(yīng),可用于抗早老性癡呆藥物的篩選,。老年性癡呆的基因芯片正在研究中,，如采用SAM鼠篩選到的差異表達(dá)基因，根據(jù)其制成芯片,，可為研究AD發(fā)病機(jī)制,、臨床診斷、治療打下基礎(chǔ),，同時(shí)也為藥物篩選取提供手段[6],。但這些快速篩選方法仍有待于進(jìn)一步深入研究，而且經(jīng)過這些體外初篩的受試物尚需通過一系列的體內(nèi),、外試驗(yàn)來確證其藥效作用,。
目前在研究的還有多種模型，在此不一一列舉,。
三、藥效學(xué)研究中值得注意的幾個(gè)問題
1．模型及觀察指標(biāo)的選擇
上述這些模型,，從不同方面來模擬AD,，但都只是模擬AD的某些方面的特征，尚無一個(gè)理想的模型來模擬AD全面的變化,。作為藥效學(xué)評(píng)價(jià),，應(yīng)根據(jù)藥物特點(diǎn)選擇相應(yīng)的動(dòng)物模型。以上列舉的模型各有其優(yōu)缺點(diǎn)和針對(duì)性,，如膽堿能損傷模型可用于膽堿能藥物作用的評(píng)價(jià),，A鈣致癡呆模型可重點(diǎn)用于觀察藥物對(duì)A鈣的作用等。因膽堿能功能缺損在AD病因中是目前較為公認(rèn)的,，因而可在評(píng)價(jià)藥效時(shí)采用膽堿能損傷致癡呆模型,；A鈣沉積及毒性作用在AD發(fā)病中非常重要，因而評(píng)價(jià)時(shí)可考慮A鈣致癡呆模型,；而老化是AD最大的危險(xiǎn)因素,，故老化致癡呆模型在藥效學(xué)評(píng)價(jià)中亦很重要。
觀察指標(biāo)的選擇亦應(yīng)根據(jù)藥物各自的特點(diǎn),、模型的不同機(jī)理而進(jìn)行,。如可進(jìn)行行為學(xué)檢查、相關(guān)生化檢查,、病理檢查等,，其中生化檢測可包括以下膽堿能相關(guān)指標(biāo)（如ChAT、AchE,、腦膽堿能受體密度及親和力,、乙酰膽堿含量等）,、NGF、自由基相關(guān)指標(biāo),、相關(guān)蛋白,、相關(guān)基因、炎性因子等,，病理檢查可包括A鈣沉積,、老年斑、神經(jīng)纖維纏結(jié),、神經(jīng)元形態(tài),、數(shù)目、小膠質(zhì)細(xì)胞,、星形膠質(zhì)細(xì)胞,、營養(yǎng)因子等等?？偠灾?，無論是模型還是指標(biāo)的選擇，作為新藥開發(fā)應(yīng)充分發(fā)揮研究者的主動(dòng)性,，根據(jù)藥物各自的特點(diǎn)進(jìn)行研究,，尤其是對(duì)于老年性癡呆這一病因尚未清楚的病種。
值得一提的是,，目前有些研究中僅進(jìn)行了化學(xué)物質(zhì)造成記憶損害模型進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶功能的測定,，有些即便采用了較為簡單的AD相關(guān)模型但也只檢測了學(xué)習(xí)記憶功能和簡單幾個(gè)生化指標(biāo)（如自由基指標(biāo)），而未采用較為典型的AD相關(guān)模型,，未對(duì)AD的多方面指標(biāo)進(jìn)行綜合觀察,。在這種情況下，我們難以從單純的行為學(xué)試驗(yàn)來評(píng)價(jià)受試物對(duì)AD的有效性,，因此需要針對(duì)AD補(bǔ)充進(jìn)行一系列的研究,。
2．陽性藥的選擇
作為藥效學(xué)試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陽性藥對(duì)照組，陽性藥應(yīng)采用已批準(zhǔn)上市的藥物,，確有療效,，可選用中藥和化學(xué)藥。陽性藥應(yīng)根據(jù)相應(yīng)的模型和觀察的指標(biāo)來選擇,，并不要求所有的藥效學(xué)試驗(yàn)均采用同一個(gè)陽性對(duì)照藥,。有些申報(bào)資料中全部試驗(yàn)均選用一種陽性藥，結(jié)果在一部分試驗(yàn)上陽性藥未表現(xiàn)出明顯的作用,。由于設(shè)陽性藥的目的除可將受試藥與其進(jìn)行比較外,，最重要的目的是驗(yàn)證方法學(xué)的可靠性，因此合理選擇陽性藥十分關(guān)鍵。如某一品種共進(jìn)行了5個(gè)試驗(yàn),，其中3個(gè)試驗(yàn)中采用了一種中藥為陽性對(duì)照組,，而在這三個(gè)試驗(yàn)中均未表現(xiàn)出明顯的作用，而另1試驗(yàn)中采用了另一種藥物作陽性對(duì)照,，同樣亦未表現(xiàn)出作用,，在這種的試驗(yàn)情況下陽性對(duì)照組的設(shè)置就失去了意義。陽性藥應(yīng)根據(jù)藥物可能的機(jī)理來合理選擇,，如果初步研究提示某受試物可能通過增強(qiáng)膽堿能作用來達(dá)到治療AD的作用,，那么在膽堿能模型或測定膽堿功能時(shí)則可用膽堿酯酶抑制劑作為陽性對(duì)照。
3．對(duì)模型與觀察指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià)
試驗(yàn)結(jié)束后,，應(yīng)對(duì)所有的試驗(yàn)資料進(jìn)行綜合分析討論?，F(xiàn)在有些申報(bào)資料的主要藥效學(xué)部分僅將所有的試驗(yàn)列舉，而不對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,。作為審評(píng)人員,，由于受到專業(yè)的限制，及對(duì)試驗(yàn)過程的不了解,，較難從未經(jīng)分析的試驗(yàn)結(jié)果中推測出試驗(yàn)的真正意義,。因此，申報(bào)資料應(yīng)該全面闡述進(jìn)行該項(xiàng)試驗(yàn)的目的意義,，對(duì)試驗(yàn)方法和結(jié)果進(jìn)行分析討論,，并闡述本項(xiàng)試驗(yàn)對(duì)于說明受試藥物可用于AD的意義。以上雖指的是老年性癡呆藥效學(xué)研究中應(yīng)注意的幾個(gè)問題,，但在其它的藥效學(xué)評(píng)價(jià)中亦應(yīng)注意這些問題,。
四,、結(jié)語
以上介紹了一些可用于AD藥效評(píng)價(jià)的模型,，研制單位可根據(jù)所研究藥物的性質(zhì)和研究目的加以選擇。如老年性癡呆的藥物中的膽堿酯酶抑制劑,，其主要重點(diǎn)在抗膽堿酯酶,，而非其它點(diǎn)，當(dāng)然不一定非得進(jìn)行其他方面如炎癥模型等方面的試驗(yàn)（當(dāng)然其前提條件是在已通過前期研究發(fā)現(xiàn)其重點(diǎn)在于抗膽堿酶）,。若能在所有的模型上對(duì)各種指標(biāo)均能作出陽性結(jié)果,，倒有結(jié)果不可靠之嫌疑。應(yīng)該指出,，新藥開發(fā)是一種研究行為,，研究者應(yīng)跟蹤最新研究進(jìn)展，創(chuàng)造性地進(jìn)行研究工作,。不應(yīng)期望有一個(gè)完善的指導(dǎo)原則,，根據(jù)要求“做作業(yè)”。隨著對(duì)疾病認(rèn)識(shí)日益深入,，試驗(yàn)手段也有不斷
http://www.cde.org.cn 發(fā)布時(shí)間：2003/12/17 03:35:27 PM
治療老年性癡呆中藥的藥效學(xué)研究評(píng)價(jià)探討
審評(píng)一部藥理毒理組 黃芳華
進(jìn)入二十一世紀(jì),，全世界正步入全球老齡化時(shí)代,。老年性癡呆已成為心腦血管疾病和腫瘤之后的第四位疾病，目前,，全世界65歲以上人群中老年性癡呆患病率約為5%,。而老年性癡呆因其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)理，近期在防治上不可能取得突破性進(jìn)展,，故西方有專家預(yù)言,，老年性癡呆將是21世紀(jì)人類第一殺手，目前全球的AD病人估計(jì)在2000-2500萬左右,。老年性癡呆對(duì)患者,、家庭和社會(huì)都帶來巨大的壓力，使得全世界對(duì)其給予眾多的關(guān)注,，抗老年性癡呆的研究成為老年醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一個(gè)重要課題,。
目前，老年性癡呆的中藥新藥申報(bào)品種出現(xiàn),，而且有日漸增多的趨勢,。在這種情況下，探討中藥新藥的藥效學(xué)研究評(píng)價(jià)成為必需,。與大部分其它疾病不同的是,，老年性癡呆的發(fā)病機(jī)理極其復(fù)雜，藥效學(xué)研究評(píng)價(jià)尚有一定的難度,，本文根據(jù)現(xiàn)有的研究水平,，對(duì)藥效學(xué)評(píng)價(jià)進(jìn)行初步的探索。以下僅是個(gè)人觀點(diǎn),，錯(cuò)誤及片面之處在所難免,，此文的撰寫目的是拋磚引玉，希望更多的相關(guān)專家對(duì)此問題進(jìn)行廣泛的討論,，以使評(píng)價(jià)更趨科學(xué),、合理,。
一、老年性癡呆的概況
阿爾采末病(Alzheimer’s disease,AD)是一種發(fā)生于老年期或老年前期的一種慢性進(jìn)行性的神經(jīng)變性疾病,，以進(jìn)行性的記憶認(rèn)知障礙,、人格改變?yōu)橹饕卣鳎珹D腦內(nèi)的主要病理改變?yōu)槔夏臧撸╯enile plaque,，SP）,、神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangle,NFT）及大量的神經(jīng)元丟失，主要發(fā)生在前腦基底,、海馬和大腦皮層,。一般稱之為老年性癡呆。
從1907年報(bào)道第一例老年性癡呆病始,，全世界的醫(yī)學(xué)家為這一病癥進(jìn)行了不懈的探索,，但直至21世紀(jì)的今日，因其病因復(fù)雜,，目前尚未明確,。關(guān)于其機(jī)理研究，現(xiàn)在主要有以下幾種學(xué)說,，如基因?qū)W說,、膽堿能學(xué)說、傳染學(xué)說,、鋁中毒學(xué)說,、自由基學(xué)說、炎癥學(xué)說,、鈣超載學(xué)說,、代謝紊亂學(xué)說，雖然各種假說有其合理性的一面,，但均存在其局限性,，不能全面解釋AD復(fù)雜、廣泛的神經(jīng)系統(tǒng)病理變化,。但能肯定的是：AD的發(fā)病與機(jī)體衰老密切相關(guān),。近年來，對(duì)AD與淀粉樣蛋白的關(guān)系成為研究的熱點(diǎn),。
發(fā)病機(jī)理不明也影響了AD藥物的開發(fā)。目前,，AD的治療尚無特效藥物,，其中乙酰膽堿酯酶抑制劑（Acetylcholinesterase inhibitor,AchEI）一直是開發(fā)活躍、成果突出的領(lǐng)域,。它的開發(fā)主要源于膽堿能學(xué)說,。從20世紀(jì)70年代一些科學(xué)家發(fā)現(xiàn)AD患者的膽堿能神經(jīng)元功能有不同比例的嚴(yán)重障礙,，膽堿能缺陷反應(yīng)合成Ach的膽堿乙酰化酶（ChAT）的減少,，伴AchE表達(dá)下降,。因而改善膽堿能神經(jīng)元突觸傳遞，激活突觸后神經(jīng)元功能膽堿酯酶抑制劑減少Ach分解,，促進(jìn)突觸傳遞強(qiáng)度,，改善突觸后神經(jīng)元功能，這類藥物是目前治療AD的主要藥物,，對(duì)輕,、中度AD具有一定效果。已被FDA認(rèn)可并在多國上市的他克林,、安理申,、加蘭他敏等均屬AchEI類。從中草藥千層塔中提取的石杉?jí)A甲是一種生物活性高,，對(duì)真性膽堿酯酶具有選擇性的可逆性膽堿酯酶抑制劑,。
二、老年性癡呆相關(guān)動(dòng)物模型
因AD病因復(fù)雜,，故相應(yīng)的也缺乏嚴(yán)格意義的AD體內(nèi)外模型,，現(xiàn)在國內(nèi)外大部分體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)只能反映AD某一部分的改變,，因而不應(yīng)稱為AD模型,。近年來許多學(xué)者正致力于尋找和研究AD動(dòng)物模型，對(duì)AD模型報(bào)道也較多,，雖然分類各有不同,，但大致可分為以下幾類[1、2]
（一）膽堿能損傷致癡呆模型
1．穹窿-海馬傘切斷致癡呆大鼠模型 該模型是建立在AD認(rèn)知障礙的膽堿能假說基礎(chǔ)上,，較好地模擬了AD前腦膽堿能系統(tǒng)的損害,，而且造成了神經(jīng)損傷，可用于觀察擬膽堿藥物的藥效學(xué)評(píng)價(jià),，還可觀察藥物對(duì)神經(jīng)功能損傷的修復(fù)作用,，是老年性癡呆臨床前藥效學(xué)研究的重要模型。該模型的不足之處是雖然具有學(xué)習(xí)記憶功能的損害,，但并不出現(xiàn)老年斑,、神經(jīng)元纖維纏結(jié)和淀粉樣蛋白沉積形成等最內(nèi)典型的組織病理學(xué)特征，也無AD病人全身多系統(tǒng)功能衰老的表現(xiàn),。
2．基底前腦注射鵝蒿蕈氨酸（ibotenic acid ,IBO）致癡呆模型大鼠 該模型屬興奮性毒素致基底核損害模型,。通過該模型可反映導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶功能下降的病理基礎(chǔ)-基底前腦膽堿能神經(jīng)元缺失，因而也是廣泛應(yīng)用的模型。該類模型的缺陷是不能反映AD發(fā)生的病因,，不能產(chǎn)生AD的病理學(xué)特征,，如老年斑、神經(jīng)原纖維纏結(jié)等,，這種興奮性毒素所產(chǎn)生的損害只能模型AD大腦皮層突觸膽堿能缺陷,，而這些動(dòng)物的海馬ChAT則不受影響。興奮性毒素還包括紅藻酸鈉,、N-甲基天門冬氨酸,、使君子酸等。紅藻氨酸也可誘導(dǎo)產(chǎn)大鼠基底核損害,，可使皮層ChAT損失40-50%,，并與Ach水平、HAChT和AchE活性的降低相平行,，而其他遞質(zhì)系統(tǒng)無明顯改變,，而且在避暗試驗(yàn)中出現(xiàn)記憶保持障礙，可作為潛在的動(dòng)物模型,，但紅藻酸鈉是一種強(qiáng)效的驚厥藥,，能產(chǎn)生損害，因此不如IBO應(yīng)用廣泛,。
3．東莨菪堿致膽堿能損傷擬癡呆小鼠 東莨菪堿為M膽堿能受體阻斷劑,，可阻斷乙酰膽堿對(duì)M受體的激動(dòng)作用，造成了學(xué)習(xí)記憶功能障礙,。但是該模型不直接引起膽堿能神經(jīng)缺失,，而且缺乏研究AD病理生理所必需的特征，如AD是一種進(jìn)行性不可逆變性,，而該模型為化學(xué)性模型,，恢復(fù)快是其局限性，可用于早期藥物的篩選,。
（二）老化致癡呆模型
1．自然衰老動(dòng)物 較常用的是自然衰老大鼠,，24月齡以上，另外也有采用老年狗或猴者,，該模型是較為接近AD實(shí)際病理改變的動(dòng)物模型,，在此基礎(chǔ)上觀察老年性癡呆治療藥物能較好地反映藥物的作用機(jī)理和效果。但是其不足之處有：（1）由于AD是一種不同于正常衰老的進(jìn)行性神經(jīng)功能衰退性疾病,，故老年動(dòng)物有其局限性,，它只是部分模擬了與人正常衰老相關(guān)的神經(jīng)生化改變，而不能全面模擬AD的變化,。（2）有實(shí)驗(yàn)材料較難得,、需長時(shí)間飼養(yǎng),、死亡率高，實(shí)驗(yàn)周期長等缺點(diǎn),，大大限制了該模型的應(yīng)用。（3）老年動(dòng)物的健康狀況的差異,，以及在藥物吸收,、代謝和分布上的變異性，有時(shí)會(huì)產(chǎn)生統(tǒng)計(jì)學(xué)意義不確定的結(jié)果,。
2．快速老化小鼠（SAM） 快速老化小鼠分為快速老化亞系（senescence accelerated mouse/prone,SAM-P）及抗快速老化亞系（senescence accelerated mouse/resistance,SAM-R）,，它是由日本京都大學(xué)首次培育成功，經(jīng)20多代交配近繁,，獲得了遺傳性與病理表型一致,，符合近交系標(biāo)準(zhǔn)的新系列。SAM-P品系中,，有兩個(gè)亞品系P8和P10除具有P品系的一般老化癥狀外,，還伴隨著快速老化出現(xiàn)的學(xué)習(xí)記憶力障礙和低恐怖低緊張狀態(tài)，為腦老化癡呆模型小鼠,。兩亞系的共同點(diǎn)是均具有認(rèn)知障礙,，且在渡過生長期后，伴快速老化自然發(fā)生,，與臨床癡呆的漸進(jìn)性發(fā)生極為相似,，它們還各具特點(diǎn)，如P8腦中出現(xiàn)明顯的A鈣沉積,、PAS染色陽性顆粒狀結(jié)構(gòu)和海綿樣變性,，P10則伴有廣泛性腦萎縮。大量研究表明,，P8和P10是比較理想的研究腦老化和癡呆的模型,，與其同源對(duì)照R1相比，其行為學(xué),、形態(tài)學(xué),、神經(jīng)生化、多種酶類以及組織蛋白和基因表達(dá)均出現(xiàn)異常[3],。SAM-P小鼠為探討衰老及衰老相關(guān)疾病的發(fā)生,，評(píng)價(jià)藥效及其作用機(jī)制提供了良好的動(dòng)物模型，其中SAM-P8較多用,。但是該模型來源比較困難,。
3．D-半乳糖皮下注射致腦老化小鼠模型 該模型在國內(nèi)廣泛應(yīng)用于抗衰老的研究。它可模擬AD的氧化損傷,，還發(fā)現(xiàn)小鼠學(xué)習(xí)記憶下降,、腦內(nèi)膽堿能系統(tǒng)功能衰退,、神經(jīng)遞質(zhì)代謝異常、皮層和海馬神經(jīng)元損傷,、超微結(jié)構(gòu)和突觸可塑性發(fā)生衰老性改變等與AD類似的改變等,。但是它對(duì)AD缺乏針對(duì)性，而且國外幾乎很少使用該模型,。
（三）A鈣致癡呆模型
1．APP轉(zhuǎn)基因小鼠 該模型是以根據(jù)分子遺傳學(xué)和胚胎學(xué)理論和技術(shù),，利用顯微注射的方法將APP基因或基因片段整合入小鼠的基因組中，使得小鼠腦部表達(dá)人APP基因,，通過APP蛋白在大腦中累積,，產(chǎn)生老年斑，從而造成小鼠老年性癡呆轉(zhuǎn)基因模型,。該模型為研究APP代謝,、AD的發(fā)生和發(fā)展及藥物干預(yù)對(duì)發(fā)病進(jìn)程的影響提供了模型，同時(shí)現(xiàn)在該模型已能夠復(fù)制出類似AD病人腦內(nèi)的部分病理變化,，同時(shí)有學(xué)習(xí)記憶功能的障礙,。該模型是國際承認(rèn)的主要AD動(dòng)物模型。但是該模型大部分只是移植了一到兩個(gè)APP基因,，與真正的一組基因控制的動(dòng)物模型還有一定的差距,，而且該模型動(dòng)物價(jià)格較昂貴。
2．A鈣注射致癡呆模型 該模型是利用A鈣是AD患者腦中老年斑的核心蛋白,，AD發(fā)病與腦內(nèi)炎癥改變而制作,。故將A鈣肽段注入動(dòng)物海馬區(qū)，可較好地反映AD的特征性改變A鈣在AD發(fā)病中的作用,，該模型可用于研究治療AD藥物在A鈣聚積或沉積,、神經(jīng)毒性作用和小膠質(zhì)細(xì)胞的炎性反應(yīng)等方面作用，是臨床前藥效學(xué)評(píng)價(jià)的重要模型,。目前一般推薦使用A鈣1-40肽段大鼠海馬內(nèi)注射模型,，也有用A鈣25-35海馬注射者。另外還有A鈣腦室注射致癡呆模型,，該模型利用了A鈣直接注入腦室,，經(jīng)側(cè)腦室彌漫至全腦，更接近于A鈣引起細(xì)胞毒作用的實(shí)際過程,。
（四）慢性腦缺血致癡呆模型
近年來血管因素在AD發(fā)病中的作用越來越引起人們的重視,。腦供血不足可導(dǎo)致腦損傷和一系列的臨床癥狀，,，因而腦缺血模型也逐漸用于老年性癡呆藥物的研究,。有研究發(fā)現(xiàn)大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎致腦缺血模型可引起行為缺失和腦組織病理生理改變，在許多方面與癡呆（包括AD）相類似,；也有用結(jié)扎16月齡大鼠雙側(cè)頸總動(dòng)脈同時(shí)燒灼一側(cè)椎動(dòng)脈造成腦長期供血不足者,。有報(bào)道稱有腦血管病的患者AD發(fā)病率高于正常人,，而且臨床上有不少AD患者同時(shí)合并血管性癡呆和腦供血不足等情況。故腦缺血模型可作為AD模型的補(bǔ)充,，更適合于混合型癡呆的藥物作用觀察,。
（五）其它模型
1．鋁模型 鋁誘導(dǎo)癡呆模型是以AD的鋁中毒假說為基礎(chǔ)的。據(jù)報(bào)道,，AD患者腦組織內(nèi)鋁含量較正常人高,，其原因可能是病人血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白有缺陷，無法將血液中的鋁適當(dāng)清除,，多余的鋁進(jìn)入大腦后參與形成神經(jīng)纖維纏結(jié)和老年斑，損傷神經(jīng)元,。鋁劑注入動(dòng)物腦內(nèi)可出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶功能減退,，如家兔腦內(nèi)注射鋁、小鼠三氯化鋁注射等,，也有采用口服枸椽酸鋁使動(dòng)物發(fā)生學(xué)習(xí)記憶障礙和AD樣病理改變,，造成擬癡呆模型。但該模型所形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)沒有PHF或磷酸化的tau蛋白,，且中樞膽堿能活性正常,，因而用鋁是否能造成AD模型尚有需進(jìn)一步研究。
2．線粒體缺陷致癡呆模型 有報(bào)道AD與腦內(nèi)線粒體氧化磷酸化異常有關(guān),。疊氮鈉（NaN3）是線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV的特異性抑制劑,，有報(bào)道應(yīng)用微泵長期、緩慢,、恒速地給予疊氮鈉,，模擬老年性癡呆長時(shí)程、進(jìn)行性惡化的發(fā)病特點(diǎn),，可導(dǎo)致腦內(nèi)細(xì)胞色素C氧化酶（即線粒體呼吸鏈復(fù)合體IV）活性下降并引發(fā)學(xué)習(xí)記憶障礙,。
3．蛋白磷酸化酶抑制劑慢性損害致癡呆模型 神經(jīng)原纖維纏結(jié)是AD腦內(nèi)病理改變之一，過度磷酸化的tau蛋白是AD患者神經(jīng)元NFT的主要成分,，該模型利用蛋白磷酸酶的特異性抑制劑Okadic acid可引起培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞tau蛋白磷酸化水平增高,、細(xì)胞骨架損傷、細(xì)胞形態(tài)改變以及存活率下降,。該模型主要用于針對(duì)tau蛋白藥物的藥效觀察,。該模型造價(jià)昂貴。
4．自然免疫癡呆模型 該模型是基于AD的自身免疫學(xué)說,，因而許多實(shí)驗(yàn)室采用多種自然免疫動(dòng)物模型來研究AD的發(fā)病機(jī)制,，并開始用于AD藥物篩選。如Sakic等建立了MRL-1pr小鼠模型,，并將MRL,、NZB,、BXSB品系小鼠雜交，建議了一種系統(tǒng)紅斑狼瘡樣的自身免疫小鼠模型,，發(fā)現(xiàn)有學(xué)習(xí)記憶功能衰退,。目前，這類模型的研究正成為新的熱點(diǎn),。
5．靈長類動(dòng)物 值得注意的是,，現(xiàn)有亦有研究用靈長類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行AD研究的。恒河猴與AD相關(guān)的病變包括認(rèn)知功能障礙,、神經(jīng)元丟失和變性,、老年斑和血管淀粉樣蛋白沉積等，其中病理表現(xiàn)是確診AD的重要依據(jù),。除恒河猴外,，包括食蟹猴、狒狒,、松鼠猴,、黑猩猩和狐猴等也觀察到了腦實(shí)質(zhì)的淀粉樣蛋白沉積[4]。另外,，人工誘發(fā)恒河猴AD樣病理的方法包括化學(xué)物質(zhì)損傷,、金屬中毒、轉(zhuǎn)基因,、手術(shù)損傷和自身免疫方法損傷等,，如損傷膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)模型、鈣淀粉樣肽損傷模型,。因恒河猴模型較嚙齒類模型更好地模擬了AD的病理變化,，但目前模型制作尚不夠完善，有待于進(jìn)一步突破,。而且也應(yīng)注意到與人類的差別,，以及不同靈長類動(dòng)物之間的種屬差異，而從行為學(xué),、病理學(xué)和遺傳學(xué)的研究方面進(jìn)行深入研究,。
6．記憶障礙模型 目前在癡呆藥物中常用到各種記憶障礙模型，如M膽堿受體阻滯藥東莨菪堿（前文已有敘述）或樟柳堿造成的記憶學(xué)習(xí)障礙模型,、腦蛋白質(zhì)合成抑制劑環(huán)乙酰亞胺或致腦缺氧劑如亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙模型,、中樞抑制劑如乙醇如記憶再現(xiàn)障礙模型，以上模型均可用于對(duì)學(xué)習(xí)記憶作用的篩選,，但不應(yīng)稱之為AD模型,。
7．體外篩選模型 目前有利用體外模型進(jìn)行老年性癡呆藥物的初篩，如將M膽堿能受體應(yīng)用放射性免疫方法建立抗早老性癡呆藥的Ｍ1受體篩選模型[5],，該模型在人胚腎細(xì)胞上表達(dá)人源M1受體,通過檢測胞內(nèi)cAMP來監(jiān)測受體的激動(dòng)情況,。使用外源性的3HcAMP競爭胞內(nèi)的cAMP結(jié)合位點(diǎn),。使用氯化乙酰膽堿作為陽性藥來確證模型的可靠性，結(jié)果顯示該模型對(duì)M1受體激動(dòng)劑有陽性反應(yīng),可用于抗早老性癡呆藥物的篩選,。老年性癡呆的基因芯片正在研究中,，如采用SAM鼠篩選到的差異表達(dá)基因，根據(jù)其制成芯片,，可為研究AD發(fā)病機(jī)制,、臨床診斷、治療打下基礎(chǔ),，同時(shí)也為藥物篩選取提供手段[6],。但這些快速篩選方法仍有待于進(jìn)一步深入研究，而且經(jīng)過這些體外初篩的受試物尚需通過一系列的體內(nèi),、外試驗(yàn)來確證其藥效作用,。
目前在研究的還有多種模型，在此不一一列舉,。
三、藥效學(xué)研究中值得注意的幾個(gè)問題
1．模型及觀察指標(biāo)的選擇
上述這些模型,，從不同方面來模擬AD,，但都只是模擬AD的某些方面的特征，尚無一個(gè)理想的模型來模擬AD全面的變化,。作為藥效學(xué)評(píng)價(jià),，應(yīng)根據(jù)藥物特點(diǎn)選擇相應(yīng)的動(dòng)物模型。以上列舉的模型各有其優(yōu)缺點(diǎn)和針對(duì)性,，如膽堿能損傷模型可用于膽堿能藥物作用的評(píng)價(jià),，A鈣致癡呆模型可重點(diǎn)用于觀察藥物對(duì)A鈣的作用等。因膽堿能功能缺損在AD病因中是目前較為公認(rèn)的,，因而可在評(píng)價(jià)藥效時(shí)采用膽堿能損傷致癡呆模型,；A鈣沉積及毒性作用在AD發(fā)病中非常重要，因而評(píng)價(jià)時(shí)可考慮A鈣致癡呆模型,；而老化是AD最大的危險(xiǎn)因素,，故老化致癡呆模型在藥效學(xué)評(píng)價(jià)中亦很重要。
觀察指標(biāo)的選擇亦應(yīng)根據(jù)藥物各自的特點(diǎn),、模型的不同機(jī)理而進(jìn)行,。如可進(jìn)行行為學(xué)檢查、相關(guān)生化檢查,、病理檢查等,，其中生化檢測可包括以下膽堿能相關(guān)指標(biāo)（如ChAT、AchE,、腦膽堿能受體密度及親和力,、乙酰膽堿含量等）,、NGF、自由基相關(guān)指標(biāo),、相關(guān)蛋白,、相關(guān)基因、炎性因子等,，病理檢查可包括A鈣沉積,、老年斑、神經(jīng)纖維纏結(jié),、神經(jīng)元形態(tài),、數(shù)目、小膠質(zhì)細(xì)胞,、星形膠質(zhì)細(xì)胞,、營養(yǎng)因子等等?？偠灾?，無論是模型還是指標(biāo)的選擇，作為新藥開發(fā)應(yīng)充分發(fā)揮研究者的主動(dòng)性,，根據(jù)藥物各自的特點(diǎn)進(jìn)行研究,，尤其是對(duì)于老年性癡呆這一病因尚未清楚的病種。
值得一提的是,，目前有些研究中僅進(jìn)行了化學(xué)物質(zhì)造成記憶損害模型進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶功能的測定,，有些即便采用了較為簡單的AD相關(guān)模型但也只檢測了學(xué)習(xí)記憶功能和簡單幾個(gè)生化指標(biāo)（如自由基指標(biāo)），而未采用較為典型的AD相關(guān)模型,，未對(duì)AD的多方面指標(biāo)進(jìn)行綜合觀察,。在這種情況下，我們難以從單純的行為學(xué)試驗(yàn)來評(píng)價(jià)受試物對(duì)AD的有效性,，因此需要針對(duì)AD補(bǔ)充進(jìn)行一系列的研究,。
2．陽性藥的選擇
作為藥效學(xué)試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陽性藥對(duì)照組，陽性藥應(yīng)采用已批準(zhǔn)上市的藥物,，確有療效,，可選用中藥和化學(xué)藥。陽性藥應(yīng)根據(jù)相應(yīng)的模型和觀察的指標(biāo)來選擇,，并不要求所有的藥效學(xué)試驗(yàn)均采用同一個(gè)陽性對(duì)照藥,。有些申報(bào)資料中全部試驗(yàn)均選用一種陽性藥，結(jié)果在一部分試驗(yàn)上陽性藥未表現(xiàn)出明顯的作用,。由于設(shè)陽性藥的目的除可將受試藥與其進(jìn)行比較外,，最重要的目的是驗(yàn)證方法學(xué)的可靠性，因此合理選擇陽性藥十分關(guān)鍵。如某一品種共進(jìn)行了5個(gè)試驗(yàn),，其中3個(gè)試驗(yàn)中采用了一種中藥為陽性對(duì)照組,，而在這三個(gè)試驗(yàn)中均未表現(xiàn)出明顯的作用，而另1試驗(yàn)中采用了另一種藥物作陽性對(duì)照,，同樣亦未表現(xiàn)出作用,，在這種的試驗(yàn)情況下陽性對(duì)照組的設(shè)置就失去了意義。陽性藥應(yīng)根據(jù)藥物可能的機(jī)理來合理選擇,，如果初步研究提示某受試物可能通過增強(qiáng)膽堿能作用來達(dá)到治療AD的作用,，那么在膽堿能模型或測定膽堿功能時(shí)則可用膽堿酯酶抑制劑作為陽性對(duì)照。
3．對(duì)模型與觀察指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià)
試驗(yàn)結(jié)束后,，應(yīng)對(duì)所有的試驗(yàn)資料進(jìn)行綜合分析討論?，F(xiàn)在有些申報(bào)資料的主要藥效學(xué)部分僅將所有的試驗(yàn)列舉，而不對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,。作為審評(píng)人員,，由于受到專業(yè)的限制，及對(duì)試驗(yàn)過程的不了解,，較難從未經(jīng)分析的試驗(yàn)結(jié)果中推測出試驗(yàn)的真正意義,。因此，申報(bào)資料應(yīng)該全面闡述進(jìn)行該項(xiàng)試驗(yàn)的目的意義,，對(duì)試驗(yàn)方法和結(jié)果進(jìn)行分析討論,，并闡述本項(xiàng)試驗(yàn)對(duì)于說明受試藥物可用于AD的意義。以上雖指的是老年性癡呆藥效學(xué)研究中應(yīng)注意的幾個(gè)問題,，但在其它的藥效學(xué)評(píng)價(jià)中亦應(yīng)注意這些問題,。
四,、結(jié)語
以上介紹了一些可用于AD藥效評(píng)價(jià)的模型,，研制單位可根據(jù)所研究藥物的性質(zhì)和研究目的加以選擇。如老年性癡呆的藥物中的膽堿酯酶抑制劑,，其主要重點(diǎn)在抗膽堿酯酶,，而非其它點(diǎn)，當(dāng)然不一定非得進(jìn)行其他方面如炎癥模型等方面的試驗(yàn)（當(dāng)然其前提條件是在已通過前期研究發(fā)現(xiàn)其重點(diǎn)在于抗膽堿酶）,。若能在所有的模型上對(duì)各種指標(biāo)均能作出陽性結(jié)果,，倒有結(jié)果不可靠之嫌疑。應(yīng)該指出,，新藥開發(fā)是一種研究行為,，研究者應(yīng)跟蹤最新研究進(jìn)展，創(chuàng)造性地進(jìn)行研究工作,。不應(yīng)期望有一個(gè)完善的指導(dǎo)原則,，根據(jù)要求“做作業(yè)”。隨著對(duì)疾病認(rèn)識(shí)日益深入,，試驗(yàn)手段也有不斷
