對(duì)《SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求》的理解和體會(huì)
 
  http://www.cde.org.cn 發(fā)布時(shí)間：2003/07/30 04:59:39 PM
 
對(duì)《SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求》的理解和體會(huì)
——關(guān)于“PCR試劑盒”臨床研究的要求
生物制品與體外診斷試劑組 高恩明
國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局于2003年7月7日發(fā)布了《SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求》（下簡(jiǎn)技術(shù)要求）,。本人認(rèn)為該“技術(shù)要求”所闡述的內(nèi)容是研制、開(kāi)發(fā)SARS診斷試劑必須具備的基本條件和應(yīng)達(dá)到的基本技術(shù)要求,，其對(duì)研制生產(chǎn)者,、評(píng)價(jià)者均具有重要的指導(dǎo)意義。本人僅對(duì)其臨床研究部分內(nèi)容,，淺述個(gè)人的理解和體會(huì),。
一、臨床研究的規(guī)范化要求
臨床研究的客觀性和規(guī)范性直接影響對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià),。一份試驗(yàn)設(shè)計(jì)不嚴(yán)謹(jǐn),，試驗(yàn)操作不規(guī)范，病人的資料及試驗(yàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)不完整的臨床研究報(bào)告,，很難讓評(píng)價(jià)者作出準(zhǔn)確的評(píng)價(jià),，甚至對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的可靠性和真實(shí)性產(chǎn)生疑問(wèn)。“技術(shù)要求”對(duì)試驗(yàn)的規(guī)范性,、客觀性進(jìn)行了明確要求,。
1.臨床研究單位的資格和責(zé)任：臨床研究報(bào)告應(yīng)是真實(shí)的、可靠的,，臨床研究單位的法人,、試驗(yàn)負(fù)責(zé)人、試驗(yàn)人,、復(fù)核人對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性負(fù)有相應(yīng)的法律責(zé)任,。一般要求在省市級(jí)SARS病專(zhuān)科醫(yī)院或疾病控制中心進(jìn)行臨床研究。臨床研究單位具備特定的儀器設(shè)備和專(zhuān)業(yè)檢驗(yàn)人員,，詳細(xì)記錄每份標(biāo)本的檢測(cè)數(shù)據(jù),，并將原始測(cè)定數(shù)據(jù)（例如熒光PCR的圖譜等）保留在原始記錄中，試驗(yàn)人,、復(fù)核人,、試驗(yàn)負(fù)責(zé)人在試驗(yàn)記錄上簽字。臨床研究單位根據(jù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,，形成臨床研究報(bào)告并加蓋公章,，試驗(yàn)人,、復(fù)核人,、試驗(yàn)負(fù)責(zé)人在報(bào)告上簽字。
2.臨床研究用樣品：臨床研究用樣品的資料應(yīng)完整,、詳實(shí),，包括有詳細(xì)的記錄，如病人的病歷號(hào)、住院號(hào),、姓名,、性別、年齡,、發(fā)病日期,、住院日期、采樣日期,、采集樣品的種類(lèi),、樣品保存地點(diǎn)、樣本保存條件,、樣本檢測(cè)日期,、樣本的預(yù)處理、樣本的檢測(cè)結(jié)果等基本信息,，便于了解,、復(fù)核病人樣本的有關(guān)基礎(chǔ)情況。因?yàn)槟壳吧袩o(wú)SARS診斷的金標(biāo)準(zhǔn),，僅根據(jù)臨床癥狀,、血象改變、流行病學(xué)接觸史及影像學(xué)資料作出的臨床診斷并非完全準(zhǔn)確,，不能排除存在一定數(shù)量誤診的可能性,。為了更加客觀評(píng)價(jià)試劑盒的敏感性和特異性，最好對(duì)同一病人的不同病程進(jìn)行連續(xù)追蹤采樣,，用于評(píng)價(jià)不同病程階段檢測(cè)結(jié)果的一致性和可靠性,，并可積累對(duì)SRAS發(fā)病、臨床過(guò)程,、病程特點(diǎn),、樣本類(lèi)型及診斷價(jià)值等方面的認(rèn)識(shí)。
3.試驗(yàn)設(shè)計(jì)：最好采用雙盲或單盲方法,。因?yàn)槟壳澳苁占臉?biāo)本數(shù)量有限,，采用有限的標(biāo)本評(píng)價(jià)試劑盒，有必要設(shè)計(jì)雙盲或單盲試驗(yàn)以最大限度地減少干擾誤差,，獲得科學(xué)準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)：如PCR試劑盒可能存在實(shí)驗(yàn)室污染問(wèn)題,，盲法是考察實(shí)驗(yàn)室污染的最有效的辦法；盲法還可避免試驗(yàn)者對(duì)檢測(cè)結(jié)果的主觀意愿所造成的試驗(yàn)偏差,。
陰性標(biāo)本和陽(yáng)性標(biāo)本應(yīng)在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),，并由非檢測(cè)人員設(shè)計(jì)雙盲表（陰陽(yáng)性標(biāo)本混在一起）并實(shí)施雙盲編號(hào)，盲底鎖定在計(jì)算機(jī)中,。完成檢測(cè)后,，試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)試驗(yàn)人確認(rèn)無(wú)誤,，復(fù)核人復(fù)核，試驗(yàn)負(fù)責(zé)人進(jìn)一步復(fù)核無(wú)誤后鎖定在計(jì)算機(jī)中,。所有工作都在盲態(tài)下進(jìn)行,，最終由特定的人員進(jìn)行解盲，完成臨床研究報(bào)告,。如在試驗(yàn)過(guò)程中漏盲,，該試驗(yàn)不成立。
二,、臨床研究例數(shù)
SARS為突發(fā)性嚴(yán)重的急性傳染病,。由于發(fā)病急、傳染性強(qiáng),，樣本的采集,、保存、運(yùn)輸及保管等有一定的風(fēng)險(xiǎn)和特殊的要求,。由于臨床情況的復(fù)雜性,，臨床樣本的獲取與其它疾病有所區(qū)別；同時(shí)由于樣本附加資料的完整性及可溯源性等方面往往存在難以確認(rèn)因素的影響,，因此真正可用于評(píng)價(jià)診斷試劑性能的樣本來(lái)源和數(shù)量十分有限,，樣本獲取途徑也存在一定的客觀實(shí)際難度。所以“技術(shù)要求”中沒(méi)有按照常規(guī)診斷試劑盒臨床研究要求樣本數(shù)量,。而規(guī)定了不少于200例,，但對(duì)每例樣本的類(lèi)型、采樣時(shí)間等提出了具體要求,。
1. 同一病人不同病程的連續(xù)采樣,，這些標(biāo)本對(duì)于評(píng)價(jià)試劑盒的臨床價(jià)值及對(duì)SARS的認(rèn)識(shí)具有重要意義。特別是早期連續(xù)采樣的病例數(shù),，如果此類(lèi)標(biāo)本能夠達(dá)到一定數(shù)量,，則可用于初步評(píng)價(jià)PCR診斷試劑盒，采集此類(lèi)樣本可能存在一定難度,，但至少應(yīng)采集20例以上的樣本,。對(duì)于上述連續(xù)追蹤采集樣本的病例，系同一病人采集不同病程的標(biāo)本,，只能作為1個(gè)病例數(shù)統(tǒng)計(jì),。
2.為了客觀評(píng)價(jià)試劑盒，采集病人樣本的時(shí)間應(yīng)呈均勻分布,，即采集陽(yáng)性樣本的時(shí)間不能過(guò)于集中,，為此，以10天劃分為1個(gè)病程,。我們期望檢測(cè)核酸的試劑盒能夠早期或較早期檢測(cè)病人體內(nèi)是否存在SARS病毒核酸,，以結(jié)合臨床指征對(duì)疑似病人進(jìn)行早期診斷，因?yàn)樵缙谠\斷對(duì)SARS的治療及控制傳染源具有非常重要的意義,；所以在200例的陽(yáng)性樣本中,，發(fā)病1—10天的病例數(shù)應(yīng)不少于1/3，其余病例數(shù)應(yīng)在發(fā)病30天之內(nèi),。
以上為個(gè)人學(xué)習(xí)的一些體會(huì),，愿與各研究單位共同探討。