對《SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求》的理解和體會
http://www.cde.org.cn 發(fā)布時間：2003/07/30 04:59:39 PM
對《SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求》的理解和體會
——關(guān)于“PCR試劑盒”臨床研究的要求
生物制品與體外診斷試劑組 高恩明
國家食品藥品監(jiān)督管理局于2003年7月7日發(fā)布了《SARS診斷試劑生產(chǎn)研制技術(shù)要求》（下簡技術(shù)要求）,。本人認為該“技術(shù)要求”所闡述的內(nèi)容是研制,、開發(fā)SARS診斷試劑必須具備的基本條件和應(yīng)達到的基本技術(shù)要求，其對研制生產(chǎn)者,、評價者均具有重要的指導(dǎo)意義,。本人僅對其臨床研究部分內(nèi)容,，淺述個人的理解和體會。
一,、臨床研究的規(guī)范化要求
臨床研究的客觀性和規(guī)范性直接影響對實驗結(jié)果的評價,。一份試驗設(shè)計不嚴謹，試驗操作不規(guī)范,，病人的資料及試驗檢測數(shù)據(jù)不完整的臨床研究報告,，很難讓評價者作出準確的評價，甚至對試驗結(jié)果的可靠性和真實性產(chǎn)生疑問,。“技術(shù)要求”對試驗的規(guī)范性,、客觀性進行了明確要求。
1.臨床研究單位的資格和責(zé)任：臨床研究報告應(yīng)是真實的,、可靠的,，臨床研究單位的法人、試驗負責(zé)人,、試驗人,、復(fù)核人對試驗數(shù)據(jù)的真實性負有相應(yīng)的法律責(zé)任。一般要求在省市級SARS病專科醫(yī)院或疾病控制中心進行臨床研究,。臨床研究單位具備特定的儀器設(shè)備和專業(yè)檢驗人員,，詳細記錄每份標(biāo)本的檢測數(shù)據(jù)，并將原始測定數(shù)據(jù)（例如熒光PCR的圖譜等）保留在原始記錄中,，試驗人,、復(fù)核人、試驗負責(zé)人在試驗記錄上簽字,。臨床研究單位根據(jù)試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,，形成臨床研究報告并加蓋公章，試驗人,、復(fù)核人,、試驗負責(zé)人在報告上簽字。
2.臨床研究用樣品：臨床研究用樣品的資料應(yīng)完整,、詳實,，包括有詳細的記錄，如病人的病歷號,、住院號,、姓名、性別,、年齡,、發(fā)病日期、住院日期,、采樣日期,、采集樣品的種類、樣品保存地點,、樣本保存條件,、樣本檢測日期、樣本的預(yù)處理,、樣本的檢測結(jié)果等基本信息,，便于了解、復(fù)核病人樣本的有關(guān)基礎(chǔ)情況,。因為目前尚無SARS診斷的金標(biāo)準,，僅根據(jù)臨床癥狀、血象改變,、流行病學(xué)接觸史及影像學(xué)資料作出的臨床診斷并非完全準確,，不能排除存在一定數(shù)量誤診的可能性。為了更加客觀評價試劑盒的敏感性和特異性,，最好對同一病人的不同病程進行連續(xù)追蹤采樣,，用于評價不同病程階段檢測結(jié)果的一致性和可靠性,，并可積累對SRAS發(fā)病、臨床過程,、病程特點,、樣本類型及診斷價值等方面的認識。
3.試驗設(shè)計：最好采用雙盲或單盲方法,。因為目前能收集的標(biāo)本數(shù)量有限,，采用有限的標(biāo)本評價試劑盒，有必要設(shè)計雙盲或單盲試驗以最大限度地減少干擾誤差,，獲得科學(xué)準確的數(shù)據(jù)：如PCR試劑盒可能存在實驗室污染問題,，盲法是考察實驗室污染的最有效的辦法；盲法還可避免試驗者對檢測結(jié)果的主觀意愿所造成的試驗偏差,。
陰性標(biāo)本和陽性標(biāo)本應(yīng)在同一個實驗室檢測,，并由非檢測人員設(shè)計雙盲表（陰陽性標(biāo)本混在一起）并實施雙盲編號，盲底鎖定在計算機中,。完成檢測后,，試驗數(shù)據(jù)經(jīng)試驗人確認無誤，復(fù)核人復(fù)核,，試驗負責(zé)人進一步復(fù)核無誤后鎖定在計算機中,。所有工作都在盲態(tài)下進行,，最終由特定的人員進行解盲,，完成臨床研究報告。如在試驗過程中漏盲,，該試驗不成立,。
二、臨床研究例數(shù)
SARS為突發(fā)性嚴重的急性傳染病,。由于發(fā)病急,、傳染性強，樣本的采集,、保存,、運輸及保管等有一定的風(fēng)險和特殊的要求。由于臨床情況的復(fù)雜性,，臨床樣本的獲取與其它疾病有所區(qū)別,；同時由于樣本附加資料的完整性及可溯源性等方面往往存在難以確認因素的影響，因此真正可用于評價診斷試劑性能的樣本來源和數(shù)量十分有限,，樣本獲取途徑也存在一定的客觀實際難度,。所以“技術(shù)要求”中沒有按照常規(guī)診斷試劑盒臨床研究要求樣本數(shù)量。而規(guī)定了不少于200例,，但對每例樣本的類型,、采樣時間等提出了具體要求。
1. 同一病人不同病程的連續(xù)采樣，這些標(biāo)本對于評價試劑盒的臨床價值及對SARS的認識具有重要意義,。特別是早期連續(xù)采樣的病例數(shù),，如果此類標(biāo)本能夠達到一定數(shù)量，則可用于初步評價PCR診斷試劑盒,，采集此類樣本可能存在一定難度,，但至少應(yīng)采集20例以上的樣本。對于上述連續(xù)追蹤采集樣本的病例,，系同一病人采集不同病程的標(biāo)本,，只能作為1個病例數(shù)統(tǒng)計。
2.為了客觀評價試劑盒,，采集病人樣本的時間應(yīng)呈均勻分布,，即采集陽性樣本的時間不能過于集中，為此,，以10天劃分為1個病程,。我們期望檢測核酸的試劑盒能夠早期或較早期檢測病人體內(nèi)是否存在SARS病毒核酸，以結(jié)合臨床指征對疑似病人進行早期診斷,，因為早期診斷對SARS的治療及控制傳染源具有非常重要的意義,；所以在200例的陽性樣本中，發(fā)病1—10天的病例數(shù)應(yīng)不少于1/3,，其余病例數(shù)應(yīng)在發(fā)病30天之內(nèi),。
以上為個人學(xué)習(xí)的一些體會，愿與各研究單位共同探討,。
