在我國,，胃癌仍為最常見的惡性腫瘤之一,，約2/3患者就診時已為中晚期’目前研究已i}l.實,，進展期胃癌新輔助化療可使腫瘤縮小,、臨床分期降低，從而提高胃癌的根治性切除率,、減少術(shù)后復發(fā)轉(zhuǎn)移,。由于患者對不同化療方案的敏感性不同，尋找可靠的化療敏感性預測指標;旱期篩選出對化療應答不敏感的患者.減少不必要的術(shù)前化療,，成為臨床重要課題之一.針對于此,，我們對進展期胃癌進行多基因免疫組化檢測，從中篩選出可能對mFOLFOX7方案新輔助化療敏感的預測因子,，為胃癌的個體化治療提供重要的依據(jù).
資料與方法
一,、臨床資料
人組標準:(1)胃鏡下活檢確診為胃癌;(2)術(shù)前分期且期以上的患者;(3)年齡大于18歲且小于70歲，并且katnofsky評分大于或等于70;(4)無化療和手術(shù)禁忌;(5)無其他的惡性疾病,，既往無胃部手術(shù)史;(6)化療患者均簽署知情同意書按上述標準選取2009年8月至2011年8月濰坊市人民醫(yī)院腫瘤外科收治的53例術(shù)前病理學確診的進展期胃癌患者,，所有病例之前均未接受過任何治療。其中男40例,，女13例)年齡3369中位年齡59)歲二病變部位:胃竇部20例,，胃體部16例，胃食管結(jié)合部17例,。病理類型:中,、低分化腺癌38例，印戒細胞癌9例,，粼液腺癌及其他6例,、初步臨床分期:Il期19例，l期34例術(shù)前評價包括胸片,，全腹平掃加強化雙源螺旋CT檢查,，必要時掃描盆腔及胸腔，腹部超聲,，心電圖,，生化全項，全血細胞計數(shù),，腫瘤標志物等部分患者行超聲胃鏡(資料不全).
二,、治療方法
對所有人選患者行mFOLF'OX7雙周方案化療:奧沙利鉑(L-OHP)100mg/m'-靜脈滴注2h，第1天;亞葉酸鈣(CF)400m}/m`靜脈滴注2h.第1天;氟尿嚓咤(5-FU)2400mg/m=持續(xù)靜脈泵人46h 2周后重復,，共4周期化療結(jié)束后4周行標準胃癌根治手術(shù).
三,、療效評價標準
化療前后以螺旋CT,胃鏡及術(shù)后病理切片相結(jié)合的方法作為療效判斷的證據(jù)。新輔助化療后原發(fā)病灶的療效判定根據(jù)RECISTI.1標準評估,，分為完全緩解(CR),、部分緩解(PR)、疾病穩(wěn)定(SD)及疾病進展(PD);有效:PR加CR,，無效:SD加PD病理完全緩解(pCR):手術(shù)標本中無癌細胞殘留病理部分緩解(pPR):有單個或小癌灶殘留;療效小:殘留癌灶伴纖維增生;療效差:療效微小或無療效,，廣泛殘余癌細胞,。
四、各基因檢測方法及結(jié)果判定
采用免疫組織化學(免疫組化)SP法和熒光原位雜交法(FISH),，所用試劑購自北京中杉金橋生物有限公司和ROCHE診斷產(chǎn)品有限公司,。新輔助化療前胃鏡活檢獲取腫瘤組織，手術(shù)后切除標本分別予以檢測,，檢測方法按試劑盒說明書進行,。
C-met蛋白定位于胞質(zhì)和胞膜，TOPO-II蛋白定位于胞核,，陽性細胞均染成黃色或棕黃色顆粒,，以陽性細胞所占百分率來表不。陽性細胞數(shù)小于25%r為陰性,，陽性細胞大于或等于25%為陽性,。
EGFR,HER-2蛋白定位于細胞膜，呈棕褐色,，細胞膜未著色或陽性細胞數(shù)小于10%為(一),，大于或等于lOclc巨細胞膜不完整染色為(十)，兩者均定為陰性,。大于或等于10%且細胞膜完整輕至中度染色為(+十),，大于或等于10%且細胞膜完整的強染色為(+++)EGFR表達(++一十++)定為陽性,。HER2表達(+++)為陽性,，見圖1;(++)為不明確，再進行FISH檢測,，若FISH為(+)則定為陽性,，見圖2。對于活檢標本HER2以成簇的腫瘤細胞膜染色來評估,，不管著色細胞百分比若染色為(++)同樣進行FISH檢測,。P53和I}i67陽性染色呈棕黃色顆粒，均定位于細胞核,。P53和hi67均以腫瘤細胞不著色或小于10%的腫瘤細胞著色為陰性,，大于或等于10%的腫瘤細胞著色為陽性，見圖3oMMP-7染色陽性反應為細胞漿中出 現(xiàn)淡黃色至棕褐色顆粒,。
根據(jù)染色的強度及陽性細胞的面積判斷結(jié)果,。每張切片陽性細胞的染色強度按無著色、淡黃色,、棕黃色和棕褐色分別計分為,。,1,2,3分;按陽性細胞面積分別計分為0,1(1%}25%),2(26%}50%),3(51%}75%)和4(76%一100%)，據(jù)2項打分之積判斷結(jié)果:0分為陰性,，大于或等于1分為陽性,。
五,、統(tǒng)計學方法
采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件，用才檢驗,、趨勢才檢驗及Lo辦stic多因素回歸分析處理相關(guān)數(shù)據(jù),。
結(jié)果
一、新輔助化療治療情況及療效
本組53例患者全部完成mFOLFOY7方案新輔助化療,，無中途退組者,。總有效率為52.8%(28/53其中PR為52.8%(28/53),SD為45.3%(24/53),PD為1.9%(1/53),。不良反應均能耐受化療結(jié)束4周后行胃癌DZ根治術(shù),，R。切除者45例,，姑自,、切除者8例。均無并發(fā)癥出現(xiàn),。隨訪至今均生存.
二,、各基因的表達與新輔助化療療效的關(guān)系
新輔助化療前后，各因子的表達差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),，見表1,。新輔助化療前，HER2陽性表達者化療有效率為83.3%(10/12),，陰性表達者有效率為43.9%(18/41),，前者明顯高于后者(P<0.05);P53陽性表達者化療有效率為35.7%(10/28)，明顯低于陰性表達者的72.0%(18/2s)(P<o.os);C-met,EGFR,Ki-67,MMP7及ToPO}的表達與化療敏感性無關(guān)(P>0.05),。見表2oLogistic多因素回歸分析顯示,，HER2和P53是化療敏感性獨立影響因素(P<0.05)，表3}
三,、HER2和P53與新輔助化療療效的關(guān)系將HER2與P53的表達情況分為亞組,，各亞組新輔助化療療效見表4。其中,，6例患者HER2陽性,，同時P53陰性表達，其新輔助化療療效均為有效,，明顯優(yōu)于其他亞組患者,，差異有統(tǒng)計學意義}X'=11.17，P=0.001),。
