解凍去甘油紅細胞常用于Rh陰性的稀有血型血液,為滿足臨床Rh陰性患者的病情需求,本站于⒛07年開展了Rh陰性紅細胞的機器制各冰凍保存和解凍技術(shù),自從⒛10~⒛12年共計418例機制去甘油解凍紅細胞,在機制去甘油解凍紅細胞的過程中,出現(xiàn)了3例游離血紅蛋白(1g/L,、2例游離血紅蛋白>1g/L(機器診斷值應(yīng)在<0.5g/L),1例游離血紅蛋白)1.5g/L,對其進一步對照鑒定,、分析,結(jié)果如下,。
材料與方法
1 血液來源自⒛10年1月~⒛12年3月418例解凍紅細胞中,抽取126例比較,其中120例終末游離血紅蛋白值<0.5g/I',5例游離血紅蛋白(1g/I',1例游離血紅蛋白>1.5g/L。
2試劑和耗材 40%的紅細胞低溫甘油保護劑320ml(北京博德桑特生產(chǎn)),9%的濃氯化鈉溶液160ml(北京博德桑特公司生產(chǎn)),羥乙基淀粉40氯化鈉注射液400ml(四川科倫藥業(yè)公司生產(chǎn)),0.9%氯化鈉溶液1600ml(四川南格爾生物醫(yī)學(xué)股份有限公司生產(chǎn)),235型解凍紅細胞耗材(美國血液技術(shù)公司生產(chǎn)),。
3 儀器和設(shè)備 冰凍用的-85C冰柜(日本三洋生產(chǎn)),37C恒溫水浴血漿解凍箱(蘇州醫(yī)用儀器廠生產(chǎn)),日立離心機(日本生產(chǎn)),215型全自動紅細胞處理儀(美國血液技術(shù)公司生產(chǎn)),。
4 紅細胞的保存 將冷藏保存1~6d的去白紅細胞懸液2單位,以6C,、10min、3000r/min條件進行制備離心,徹底去除紅細胞添加液和少量血漿,以無菌對接到專用耗材上,安裝到215型全自動紅細胞處理儀中,選擇冰凍程序,10min內(nèi)加人低溫甘油保護劑320ml,再靜置于冷臺上30min后配平,6C,、⒛00r/min、6min離心,去除多余甘油約80ml,用無菌接口機對接到專用的冰凍紅細胞保存袋內(nèi)進行冰凍保存,。
5 紅細胞的解凍 將冰凍狀態(tài)的陰性紅細胞立即放入37C的恒溫水浴箱中化14min(2單位),融化好后稱重,對接到ACP215解凍紅細胞處理儀的專用器材上,選擇解凍程序,嚴(yán)格按照程序操作機器,依次加人9%濃氯化鈉溶液160ml,、羥乙基淀粉40氯化鈉注射液400ml、o,9%等滲氯化鈉1600ml,最終游離血紅蛋白(Hb<0.5g/L)目測上清液清晰者即投人臨床使用,。
6 干預(yù)方法 為避免誤判產(chǎn)品結(jié)果,需要機測值結(jié)合手工質(zhì)控進一步干預(yù)比對;機測值游離血紅蛋白Hb(0.5g/I',、目測清晰者可以直接發(fā)往臨床;機測值游離血紅蛋白Hb(1g/L、質(zhì)控值游離血紅蛋白Hb(1g/L,、目測清晰者,可以發(fā)往臨床;機測值游離血紅蛋白Hb)1g/L,、質(zhì)控值游離血紅蛋白Hb(1g/I'、應(yīng)結(jié)合離心法加一次洗滌,目測清晰者可以直接發(fā)往臨床;機測值游離血紅蛋白Hb>1.5g/I',、質(zhì)控值游離血紅蛋白Hb>1g/I',、該Rh陰性血液不可以向臨床發(fā)放。7 國標(biāo)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 終末游離血紅蛋白(Hb<1g/I')可以發(fā)往臨床使用[1],。
結(jié)果
1 在抽取的126例陰性解凍紅細胞中,有125例游離血紅蛋白值(Hb(1g/I),符合國標(biāo)要求,結(jié)果合格發(fā)往臨床,有1例游離血紅蛋白值(Hb>1.5釅L),結(jié)果不合格報廢,。120例機測正常值Hb<0.5g/L,與其他3組機測異常值(Hb<1g/L、Hb)1g/I,、Hb>1.5g/L)比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);機測值與質(zhì)控值合格率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P)0.05),。
2 126例陰性解凍紅細胞的結(jié)果見表
討論
ACP215血細胞自動處理儀制備Rh陰性紅細胞終末游離血紅蛋白機器測定值應(yīng)該Hb(0.5g/I',。根據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析有顯著意義,實際操作存在有上述四種情況,根據(jù)筆者在血站制各情況最終結(jié)果,機制Rh解凍紅細胞最終結(jié)果:C機測正常組游離血紅蛋白(Hb(0.5g/I')結(jié)合目測上清液清晰即可投人臨床使用;②機測異常I組出現(xiàn)機制解凍紅細胞最終結(jié)果游離血紅蛋白(Hb<1g/I')結(jié)合目測上清液清澈者,為預(yù)防機器誤診情況,應(yīng)結(jié)合留取血樣離心法對照上清液顏色和結(jié)合質(zhì)控值對比,結(jié)果游離血紅蛋白(質(zhì)控測定Hb(1g/I')離心血樣目測上清液清晰者,可用于臨床使用;③機測異常Ⅱ組出現(xiàn)機制解凍紅細胞最終結(jié)果游離血紅蛋白(Hb>1g/I')結(jié)合目測上清液發(fā)紅者,為預(yù)防機器誤診情況,應(yīng)結(jié)合留取血樣離心法,進行手工洗滌一次,對照上清液顏色和結(jié)合質(zhì)控值對比,結(jié)果游離血紅蛋白(質(zhì)控測定Hb(1g/I')離心血樣目測上清液清晰者,可用于臨床使用;①機測異常Ⅲ組游離血紅蛋白(Hb)1.5g/I'、手工質(zhì)控測定Hb>1g/I')上清液發(fā)紅,、離心目測不清晰者就需要報廢該機制解凍紅細胞制品,。總之制各機制Rh陰性解凍紅細胞的每個環(huán)節(jié)均要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進行,謹慎分析,仔細把關(guān),既要確保臨床患者輸注的安全性,不可盲目發(fā)往臨床,叉要減少不必要的血液資源浪費,。RhD(—)陰性血在我國漢族人群中僅占0.3~0.4%[2],冰凍解凍紅細胞對臨床上稀有血型的輸血,、自身貯血、減少輸血的不良反應(yīng)等具有重要意義「s」,。自Smith首先發(fā)現(xiàn)低溫保存紅細胞方法,并用甘油作為保護劑冷凍保存紅細胞試驗成功以來,該方法經(jīng)過多年的研究,得到不斷的改進,現(xiàn)已成為現(xiàn)代輸血中唯一能長期保存紅細胞的方法,保存期可達幾年,。更重要的是為稀有血型患者的輸血提供了方便,將平時采集的Rh陰性血液凍存貯各,一旦需要可立即解凍洗滌,有效解決稀有血型患者的臨床用血問題,應(yīng)采用先進的設(shè)備和技術(shù),以最快速度將Rh陰性血液發(fā)往臨床,爭取搶救時間[lj,取得了良好的治療效果。