新鄉(xiāng)醫(yī)學院 鄧保國 譯

　　為對抗病毒和細菌入侵而進行的預防接種,，能促進免疫系統(tǒng)的發(fā)育和活化，使它能夠持續(xù)產(chǎn)生抗原特異性效應淋巴細胞,。這一過程中免疫系統(tǒng)的作用還不清楚,，但最近的研究發(fā)現(xiàn)了一種B細胞亞群，一種原始的中樞B細胞,，其表達轉(zhuǎn)錄抑制子BCL6且具有自我更新的能力,，BCL6可以阻止細胞終末分化。如果一種相似的阻止細胞分化的機制存在于能長時間生長并被抗原選擇過的淋巴細胞的話,，那么,，具有自我更新能力的干細胞可能就是效應淋巴細胞不斷產(chǎn)生的來源。這種效應細胞來自記憶細胞池中,。對于淋巴細胞終末分化調(diào)控機制的了解將會改進對慢性感染性疾病和癌癥的治療方法,。預防接種就是通過模擬感染的某些方面來引起免疫應答，以達到保護個體免受感染的目的,。預防接種通常被用于預防,，但它也可以用于治療,。比如，對于慢性感染和癌癥病人的治療中,。疫苗發(fā)展的經(jīng)驗時期在過去對于我們預防疾病起到了很大的幫助,。但這種"輕松選擇疫苗"的時代已經(jīng)過去，為迎接當前的挑戰(zhàn)需要我們對免疫系統(tǒng)有更深入的了解,。這一觀察的起始點就是對免疫應答目的的闡述,，這也是預防接種的目標。

為保護機體免受感染,，免疫系統(tǒng)需要完成三個過程,。第一個過程是產(chǎn)生效應淋巴細胞，如分泌抗體的漿細胞,，能分泌細胞因子刺激其他細胞表達CD40L的輔助性T細胞,，以及可以殺滅各種被感染細胞的細胞毒性T淋巴細胞；第二個 目標是當機體再次遭遇抗原時,，機體可以迅速產(chǎn)生效應淋巴細胞,，這是記憶性淋巴細胞的功能；第三個過程還不清楚,，但很明顯是存在的,，這一過程主要存在于被確定的慢性感染的人。比如,，那些被乙型肝炎病毒,，人類免疫缺陷病毒，結(jié)核分枝桿菌感染的人,。這些人需要長期不斷的產(chǎn)生效應細胞的能力,。或許對于有些宿主需要一生產(chǎn)生效應細胞,。這里,，我們主要討論最近的一些有關(guān)宿主免疫系統(tǒng)是如何終生產(chǎn)生效應細胞以及被稱為免疫記憶狀態(tài)的細胞與這一過程的可能聯(lián)系。

一 淋巴細胞細胞發(fā)育的抗原依賴階段和效應細胞的不斷產(chǎn)生

適應性免疫系統(tǒng)在發(fā)育過程中具有抗原非依賴和抗原依賴兩個 階段 ,。在抗原非依賴的第一階段,，免疫系統(tǒng)識別各種天然宿主抗原的功能已經(jīng)產(chǎn)生了。這種能力來自大量的不同的B細胞和T細胞克隆,。每種細胞克隆具有獨特的抗原受體,。對于大多數(shù)細胞來說，這些抗原受體出現(xiàn)后,，沒有被抗菌的獨特型所識別,；相反他們?yōu)樗拗魈峁┝艘粋€巨大的克隆分化和結(jié)合特異性抗原的潛能。很顯然,，所有引起感染的微生物在它們的生命周期中都可以表達抗原,。這樣就可以被至少幾個這樣的細胞克隆所識別,，在人類，B細胞發(fā)育的這一階段相對來說不會減退直到成年期,。而新的T細胞的產(chǎn)生由于胸腺的復雜性在不斷地減少,。因此,，有人可能懷疑維持初始T細胞的機制的存在,，而且懷疑和這一機制有特異性關(guān)聯(lián)的一些報道。這一機制就是在細胞發(fā)育的抗原依賴階段,，被細菌抗原選擇過的淋巴細胞克隆是如何被保留下來的,，這一點可能是重要的，因為這樣的細胞有可能是不可替代的,。

　 在分化的第二個階段,，淋巴細胞通過免疫系統(tǒng)固有的受體識別抗原。這些受體能促進對細菌來源的抗原的應答并且啟動復雜的細胞內(nèi)的過程,，導致細胞增殖和分化,。增殖階段是一個非常不易成功的過程。因為在宿主的天然克隆系統(tǒng)中,。只有非常少的能被抗原激活的細胞克隆,。但是用來控制感染的終末分化效應淋巴細胞數(shù)量卻是很大的，需要上百萬（甚至十多億,，主要取決于宿主的細胞數(shù)）,。如果進入慢性感染，需要的細胞數(shù)量會更大,。對于T細胞來說更嚴格,。因為T細胞的許多功能的執(zhí)行是依靠細胞與細胞間的結(jié)合為基礎(chǔ)的。在一些不能重復的組織器官中,。終末分化細胞在不斷被替換（如皮膚,，腸胃的粘膜和血液）一些相對分化較少的干細胞具有高的應答能力。干細胞的存在補充和維持了分化細胞的數(shù)量,。與此相似,，抗原依賴淋巴細胞的發(fā)育可能也包括這樣的一個階段。在這一階段,，不能進行終末分化并且在這一階段可以產(chǎn)生一些非特異性效應細胞,。這一過程賦予記憶細胞一些功能，使機體對以后的感染具有保護作用,。記憶細胞進行免疫應答的額外周期的能力和效應細胞的產(chǎn)生提示也是在這一過程中經(jīng)抗原選擇過的淋巴細胞克隆應答潛能被保留下來的,。如果是這樣的話，那么記憶細胞的功能就不僅僅是對將來感染具有保護作用,。而且對于慢性持續(xù)性感染來說,。還可以使機體長期不斷的產(chǎn)生效應細胞,，這里，我們猜想記憶淋巴細胞自我更新能力,，就象其他組織干細胞一樣,，對于這些細胞來說，它們這一功能是通過終末分化的激活抑制為基礎(chǔ)的,。 　　

二 賦予記憶細胞淋巴細胞干細胞樣自我更新能力

在分化的造血系統(tǒng)中,，人們找到了一種細胞模型。這種細胞模型來自相關(guān)的極少數(shù)的初始細胞,。并且具有長期不斷產(chǎn)生效應細胞的功能,。非常少量的多能造血干細胞再組成大部分的造血系統(tǒng)，但不是全部,這一過程是通過增加定向祖細胞來實現(xiàn)的,。這些定向祖細胞將定向的進一步分化為一個或幾個血細胞類型,。這些定向祖細胞在分化成為效應細胞之前，需快速進行有限的自我復制,，他們所查聲的效應細胞壽命是有限的,。因為終末分化是和復制功能的喪失分不開的。所以效應細胞數(shù)量的維持僅僅因為來自正在復制的干系報的一個子細胞,，它仍處于未分化的,，自我更新階段。有證據(jù)表明記憶性淋巴細胞與干系報在自我復制能力方面是相似的。 　推測記憶性淋巴細胞具有干系報樣功能 證據(jù)萊西兩個表面上看起來無關(guān)的研究：一個研究分析了抗原依賴性B細胞的分化；另一個描述了細胞表面標志,，以及抗原激活的T細胞的組織歸巢行為,。在B細胞系中，記憶細胞來源于原始細胞的生發(fā)中心。在這里，B細胞迅速增殖，抗原刺激的B細胞克隆在這里經(jīng)歷了一個反復增殖的過程,，這一過程匯總伴隨著細胞突變和免疫球蛋白基因的重排。離開細胞循環(huán)并且被抗原選擇而成為具有較高親和力抗體的變異型,。最終大量反復增殖,，產(chǎn)生足夠數(shù)量的細胞引起突變并且能產(chǎn)生 高親和力抗體后，才能終末分化成漿細胞,。我們可以想象因為B細胞不能事先預定要突變多少次才能產(chǎn)生針對每種抗原具有高親和力的細胞,，所以在終末分化前，不可能預計細胞分裂的數(shù)目,。然而,，細胞在產(chǎn)生親和力抗體變異型之后，分化才被終止的機制是存在的,，這一點是肯定的,。

轉(zhuǎn)錄抑制子BCL在原始生發(fā)中心B細胞可以表達,，但是在成熟B細胞和漿細胞不表達。這種轉(zhuǎn)錄因子表達對于B細胞在原始生發(fā)中心的反應是必要的,。他可以通過阻止Blimp1的表達而抑制B細胞的終末分化,。Blimp1可以促進漿細胞生長發(fā)育的轉(zhuǎn)錄因子。因此,，由于BCL6的表達,，使原始生發(fā)中心的B細胞具有了淋巴樣干細胞的 自我更新能力。隨著對BCL6功能的研究,，人們發(fā)現(xiàn)了一件有趣的事,。BCL6的結(jié)構(gòu)與Tram track很相似,，而Tram track是果蠅的一種阻止神經(jīng)元分化的轉(zhuǎn)化抑制子,。在B細胞的發(fā)育中，BCL6可能還有另外一些功能,，那就是與維持B細胞的復制的淺能有關(guān),。由于原始生長中心B細胞已經(jīng)被抗原選擇過了。所以他們也是和宿主防御能力有關(guān)的所有免疫系統(tǒng)的一個組成部分,。在感染被消除后,，少量的處于前終末分化階段的這些細胞被保留下來，處于靜止期,，這就是記憶細胞,。當再次遇到抗原使，記憶細胞重新建立生長中心并且能夠激活并建立20個額外的復制循環(huán),。因此,，記憶B細胞表達BCL6，具有干細胞樣功能或許就不足為奇了,。解釋T細胞的抗原依賴階段的發(fā)育困難比較大,。這是因為終末分化T細胞不象漿細胞那樣具有形態(tài)學的特性。和漿細胞相比,，它能夠回復變異到早期階段?，F(xiàn)在已有一些研究開始解決這一問題。他們的研究細胞表面的受體分子CD27和CD28分子的喪失和CD8+T細胞終末分化的關(guān)系而進行的,。另外一些研究通過T細胞對CCR7（一種細胞因子受體）和CD45RA異構(gòu)型的不同而確定了T細胞的發(fā)育場所,。對于抗原激活的CD4+T細胞來說。初始細胞表達CD45RA+CCR7+,；中心記憶細胞表達CD45RO+CCR7+,，效應記憶細胞表達CD45RO+CCR7-。中心記憶細胞表面CCR7的表達預示細胞將來歸巢于二級淋巴器官,。反之,，CCR7缺乏的效應細胞預示將歸巢于外周感染的炎癥部位,。這種預見性已被證實。CD8+T細胞的表現(xiàn)型和另外的一種CD45RA+CCR7-亞群相似,。這一細胞亞群被認為是一群終末分化的效應細胞群,。主要由CD27缺陷型構(gòu)成與CD4+細胞相似，CCR7+和CCR7-的分子在抗原激活的CD8+細胞上也被證實具有指導細胞定植中樞和外周的功能,?？傊@些研究與T細胞發(fā)育的路線最相似,。從初始T細胞到中心記憶T細胞（都表達CCR7）再到效應記憶T細胞,，不表達CCR7。在CD8+T細胞的例子中,，效應細胞還有CD45RA異構(gòu)型和CCR7缺失的回復變異,。然而從這些研究中，還沒有明顯的證據(jù)顯示為什么需要2個記憶T細胞亞群,。

通過對T細胞發(fā)育的抗原 以來途徑的分析我們建議用CCR7+中心記憶T細胞代表具有自我更新能力的干細胞樣T細胞,，而用CCR7-效應記憶T細胞代表經(jīng)過有限的細胞循環(huán)而終末分化的定型的祖細胞。由此產(chǎn)生了五個預見,，有些在研究中已經(jīng)碰到,，有些還沒有。第一個就是 ,，CD45RO+CCR7+T細胞是比CD45RO+CCR7-T細胞分化較少的細胞,；事實上，是CD4+和CD8+效應T細胞產(chǎn)生效應細胞因子,，分泌穿孔素產(chǎn)生溶細胞效應,。而不是中心記憶性T細胞。第二,，發(fā)育的特征是以CCR7的表達為基礎(chǔ)的,，這就要求一定的信號以保持自身復制的狀態(tài)，這些信號是由二級淋巴組織微循環(huán)所提供的,，在那里淋巴細胞可以通過DC細胞而接觸到抗原,。這一點是否正確還不清楚，但只有已經(jīng)可以進行終末分化的CCR7-T細胞才能到表面表達抗原成分的靶細胞形成的炎癥周圍,。第三 ,，由于炎癥的調(diào)節(jié)作用，大部分效應細胞將被消除（已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并充分證實了這一點）而自身更新的細胞群應該被保留下來,。晚期細胞的命運還沒有被分析,，除非這些細胞被記憶性CTLs的突變地標記亞群所代替。這些在小鼠身上CTLs是在急性感染消退后被保留下來的細胞。第四,，將具有干細胞樣功能的細胞歸入CD45RO+CCR7+細胞與這些細胞所代表的整個抗原特異性T細胞池中相對少的一部分是一致的,。第五，CD45RO+CCR7+T細胞應該表達轉(zhuǎn)錄抑制子,，這個抑制子的功能就如同B中的BCL6,。盡管有不止一個證據(jù)，但這一點還不清楚,?？偟膩碚f，CD4+和CD8+T細胞分化的抗原依賴階段可能有類似BCL6+的記憶B細胞發(fā)育的干細胞樣階段,，并且這一階段有可能使宿主終生產(chǎn)生特異性效應T細胞,。

三 記憶淋巴細胞轉(zhuǎn)化成干細胞的臨床意義

記憶淋巴細胞通過表達可以阻止終末分化的轉(zhuǎn)錄因子而具有復制的潛能。這一點與預防治療慢性病的疫苗的發(fā)展有一定的聯(lián)系,。第一,，正如那些詳盡描述了由于嚴重病毒感染而導致的抗原特異性CTLs現(xiàn)象的研究者所期待的那樣，這一現(xiàn)象可能是由于抗原刺激的完全干細胞樣T細胞克隆向效應細胞的分化所引起的,。正如我們所知為阻止記憶B細胞和中樞記憶性T細胞的分化,，需要誘導和保持這些細胞處于靜止狀態(tài),。這一過程需要一些信號,。如果我們能用疫苗模擬這些信號，那么他們就可以選擇性擴增這一細胞群,?？梢蕴峁┐罅啃馨图毎麃碓鰪娒庖吖δ芑?qū)Ω陡腥尽,；蛟S正是這一相似的過程,，是疫苗在人體發(fā)揮作用的基礎(chǔ)。相反地,，擴增的喪失效應功能的抗原特異性T細胞群在一些病毒感染或癌癥病人也被描述了,。隨著BCL6可以阻止B細胞終末分化這一現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)，人們可能會問是否有其他的轉(zhuǎn)錄因子存在于T細胞,，可以抑制T細胞效應功能,，在這些病理狀態(tài)下，他們的表達是否還受調(diào)節(jié),。

　最后,，最近的發(fā)現(xiàn)進一步證明免疫系統(tǒng)毫無疑問對腫瘤的發(fā)展有影響，并且相反到腫瘤通過激發(fā)潛在無應答能力的保護性淋巴細胞克?。o反應性地或耐受地）而影響免疫系統(tǒng),。只有抗原依賴淋巴細胞的分化完全徹底被搞清楚，并且能夠在活體上進行記憶和效應淋巴細胞治療性操作才能進行過繼免疫這種最好的方法來檢驗這些操作的潛在作用。例如,，將病人的T細胞冷藏于玻璃管中,，這些T細胞通過輸入媒介動物使它處于自我更新階段。這些媒介動物可逆性的表達轉(zhuǎn)錄因子,?？梢砸种平K末分化。通過這種方法可以使抗原特異性CTLs高效到擴增,。這種方法允許在試管中進行一些額外的操作,。這些操作在活體可能是很危險的。例如,，為得到高親和力,，腫瘤抗原特異性無反應地抑制性T細胞克隆而清除所有CD25+調(diào)控T細胞。因此,，隨著針對其他發(fā)育系統(tǒng)中自身更新細胞的研究,，關(guān)于由淋巴細胞分化的抗原依賴階段產(chǎn)生的干細胞樣記憶淋巴細胞的研究為人們對治療方法的改進提供了新的機會。我們將會對這些細胞有更進一步的理解,。