新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院 鄧保國(guó) 譯

　　為對(duì)抗病毒和細(xì)菌入侵而進(jìn)行的預(yù)防接種,，能促進(jìn)免疫系統(tǒng)的發(fā)育和活化,，使它能夠持續(xù)產(chǎn)生抗原特異性效應(yīng)淋巴細(xì)胞,。這一過程中免疫系統(tǒng)的作用還不清楚，但最近的研究發(fā)現(xiàn)了一種B細(xì)胞亞群,，一種原始的中樞B細(xì)胞,，其表達(dá)轉(zhuǎn)錄抑制子BCL6且具有自我更新的能力，BCL6可以阻止細(xì)胞終末分化,。如果一種相似的阻止細(xì)胞分化的機(jī)制存在于能長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)并被抗原選擇過的淋巴細(xì)胞的話,，那么，具有自我更新能力的干細(xì)胞可能就是效應(yīng)淋巴細(xì)胞不斷產(chǎn)生的來源,。這種效應(yīng)細(xì)胞來自記憶細(xì)胞池中,。對(duì)于淋巴細(xì)胞終末分化調(diào)控機(jī)制的了解將會(huì)改進(jìn)對(duì)慢性感染性疾病和癌癥的治療方法。預(yù)防接種就是通過模擬感染的某些方面來引起免疫應(yīng)答,，以達(dá)到保護(hù)個(gè)體免受感染的目的,。預(yù)防接種通常被用于預(yù)防，但它也可以用于治療,。比如,，對(duì)于慢性感染和癌癥病人的治療中。疫苗發(fā)展的經(jīng)驗(yàn)時(shí)期在過去對(duì)于我們預(yù)防疾病起到了很大的幫助,。但這種"輕松選擇疫苗"的時(shí)代已經(jīng)過去,，為迎接當(dāng)前的挑戰(zhàn)需要我們對(duì)免疫系統(tǒng)有更深入的了解。這一觀察的起始點(diǎn)就是對(duì)免疫應(yīng)答目的的闡述,，這也是預(yù)防接種的目標(biāo),。

為保護(hù)機(jī)體免受感染，免疫系統(tǒng)需要完成三個(gè)過程,。第一個(gè)過程是產(chǎn)生效應(yīng)淋巴細(xì)胞,，如分泌抗體的漿細(xì)胞，能分泌細(xì)胞因子刺激其他細(xì)胞表達(dá)CD40L的輔助性T細(xì)胞,，以及可以殺滅各種被感染細(xì)胞的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,；第二個(gè) 目標(biāo)是當(dāng)機(jī)體再次遭遇抗原時(shí)，機(jī)體可以迅速產(chǎn)生效應(yīng)淋巴細(xì)胞,，這是記憶性淋巴細(xì)胞的功能,；第三個(gè)過程還不清楚，但很明顯是存在的,，這一過程主要存在于被確定的慢性感染的人,。比如，那些被乙型肝炎病毒,，人類免疫缺陷病毒,，結(jié)核分枝桿菌感染的人。這些人需要長(zhǎng)期不斷的產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞的能力,?；蛟S對(duì)于有些宿主需要一生產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞,。這里，我們主要討論最近的一些有關(guān)宿主免疫系統(tǒng)是如何終生產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞以及被稱為免疫記憶狀態(tài)的細(xì)胞與這一過程的可能聯(lián)系,。

一 淋巴細(xì)胞細(xì)胞發(fā)育的抗原依賴階段和效應(yīng)細(xì)胞的不斷產(chǎn)生

適應(yīng)性免疫系統(tǒng)在發(fā)育過程中具有抗原非依賴和抗原依賴兩個(gè) 階段 ,。在抗原非依賴的第一階段，免疫系統(tǒng)識(shí)別各種天然宿主抗原的功能已經(jīng)產(chǎn)生了,。這種能力來自大量的不同的B細(xì)胞和T細(xì)胞克隆,。每種細(xì)胞克隆具有獨(dú)特的抗原受體。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞來說,，這些抗原受體出現(xiàn)后,，沒有被抗菌的獨(dú)特型所識(shí)別；相反他們?yōu)樗拗魈峁┝艘粋€(gè)巨大的克隆分化和結(jié)合特異性抗原的潛能,。很顯然,，所有引起感染的微生物在它們的生命周期中都可以表達(dá)抗原。這樣就可以被至少幾個(gè)這樣的細(xì)胞克隆所識(shí)別,，在人類,，B細(xì)胞發(fā)育的這一階段相對(duì)來說不會(huì)減退直到成年期。而新的T細(xì)胞的產(chǎn)生由于胸腺的復(fù)雜性在不斷地減少,。因此,，有人可能懷疑維持初始T細(xì)胞的機(jī)制的存在，而且懷疑和這一機(jī)制有特異性關(guān)聯(lián)的一些報(bào)道,。這一機(jī)制就是在細(xì)胞發(fā)育的抗原依賴階段,，被細(xì)菌抗原選擇過的淋巴細(xì)胞克隆是如何被保留下來的，這一點(diǎn)可能是重要的,，因?yàn)檫@樣的細(xì)胞有可能是不可替代的,。

　 在分化的第二個(gè)階段，淋巴細(xì)胞通過免疫系統(tǒng)固有的受體識(shí)別抗原,。這些受體能促進(jìn)對(duì)細(xì)菌來源的抗原的應(yīng)答并且啟動(dòng)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)的過程,，導(dǎo)致細(xì)胞增殖和分化,。增殖階段是一個(gè)非常不易成功的過程,。因?yàn)樵谒拗鞯奶烊豢寺∠到y(tǒng)中。只有非常少的能被抗原激活的細(xì)胞克隆,。但是用來控制感染的終末分化效應(yīng)淋巴細(xì)胞數(shù)量卻是很大的,，需要上百萬（甚至十多億，主要取決于宿主的細(xì)胞數(shù)）,。如果進(jìn)入慢性感染,，需要的細(xì)胞數(shù)量會(huì)更大。對(duì)于T細(xì)胞來說更嚴(yán)格,。因?yàn)門細(xì)胞的許多功能的執(zhí)行是依靠細(xì)胞與細(xì)胞間的結(jié)合為基礎(chǔ)的,。在一些不能重復(fù)的組織器官中,。終末分化細(xì)胞在不斷被替換（如皮膚，腸胃的粘膜和血液）一些相對(duì)分化較少的干細(xì)胞具有高的應(yīng)答能力,。干細(xì)胞的存在補(bǔ)充和維持了分化細(xì)胞的數(shù)量,。與此相似，抗原依賴淋巴細(xì)胞的發(fā)育可能也包括這樣的一個(gè)階段,。在這一階段,，不能進(jìn)行終末分化并且在這一階段可以產(chǎn)生一些非特異性效應(yīng)細(xì)胞。這一過程賦予記憶細(xì)胞一些功能,，使機(jī)體對(duì)以后的感染具有保護(hù)作用,。記憶細(xì)胞進(jìn)行免疫應(yīng)答的額外周期的能力和效應(yīng)細(xì)胞的產(chǎn)生提示也是在這一過程中經(jīng)抗原選擇過的淋巴細(xì)胞克隆應(yīng)答潛能被保留下來的。如果是這樣的話,，那么記憶細(xì)胞的功能就不僅僅是對(duì)將來感染具有保護(hù)作用,。而且對(duì)于慢性持續(xù)性感染來說。還可以使機(jī)體長(zhǎng)期不斷的產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞,，這里,，我們猜想記憶淋巴細(xì)胞自我更新能力，就象其他組織干細(xì)胞一樣,，對(duì)于這些細(xì)胞來說,，它們這一功能是通過終末分化的激活抑制為基礎(chǔ)的。 　　

二 賦予記憶細(xì)胞淋巴細(xì)胞干細(xì)胞樣自我更新能力

在分化的造血系統(tǒng)中,，人們找到了一種細(xì)胞模型,。這種細(xì)胞模型來自相關(guān)的極少數(shù)的初始細(xì)胞。并且具有長(zhǎng)期不斷產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞的功能,。非常少量的多能造血干細(xì)胞再組成大部分的造血系統(tǒng),，但不是全部,這一過程是通過增加定向祖細(xì)胞來實(shí)現(xiàn)的。這些定向祖細(xì)胞將定向的進(jìn)一步分化為一個(gè)或幾個(gè)血細(xì)胞類型,。這些定向祖細(xì)胞在分化成為效應(yīng)細(xì)胞之前,，需快速進(jìn)行有限的自我復(fù)制，他們所查聲的效應(yīng)細(xì)胞壽命是有限的,。因?yàn)榻K末分化是和復(fù)制功能的喪失分不開的,。所以效應(yīng)細(xì)胞數(shù)量的維持僅僅因?yàn)閬碜哉趶?fù)制的干系報(bào)的一個(gè)子細(xì)胞，它仍處于未分化的,，自我更新階段,。有證據(jù)表明記憶性淋巴細(xì)胞與干系報(bào)在自我復(fù)制能力方面是相似的。 　推測(cè)記憶性淋巴細(xì)胞具有干系報(bào)樣功能 證據(jù)萊西兩個(gè)表面上看起來無關(guān)的研究：一個(gè)研究分析了抗原依賴性B細(xì)胞的分化,；另一個(gè)描述了細(xì)胞表面標(biāo)志,，以及抗原激活的T細(xì)胞的組織歸巢行為。在B細(xì)胞系中，記憶細(xì)胞來源于原始細(xì)胞的生發(fā)中心,。在這里,，B細(xì)胞迅速增殖，抗原刺激的B細(xì)胞克隆在這里經(jīng)歷了一個(gè)反復(fù)增殖的過程,，這一過程匯總伴隨著細(xì)胞突變和免疫球蛋白基因的重排,。離開細(xì)胞循環(huán)并且被抗原選擇而成為具有較高親和力抗體的變異型。最終大量反復(fù)增殖,，產(chǎn)生足夠數(shù)量的細(xì)胞引起突變并且能產(chǎn)生 高親和力抗體后,，才能終末分化成漿細(xì)胞。我們可以想象因?yàn)锽細(xì)胞不能事先預(yù)定要突變多少次才能產(chǎn)生針對(duì)每種抗原具有高親和力的細(xì)胞,，所以在終末分化前,，不可能預(yù)計(jì)細(xì)胞分裂的數(shù)目。然而,，細(xì)胞在產(chǎn)生親和力抗體變異型之后,，分化才被終止的機(jī)制是存在的，這一點(diǎn)是肯定的,。

轉(zhuǎn)錄抑制子BCL在原始生發(fā)中心B細(xì)胞可以表達(dá),，但是在成熟B細(xì)胞和漿細(xì)胞不表達(dá)。這種轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)對(duì)于B細(xì)胞在原始生發(fā)中心的反應(yīng)是必要的,。他可以通過阻止Blimp1的表達(dá)而抑制B細(xì)胞的終末分化,。Blimp1可以促進(jìn)漿細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的轉(zhuǎn)錄因子。因此,，由于BCL6的表達(dá),，使原始生發(fā)中心的B細(xì)胞具有了淋巴樣干細(xì)胞的 自我更新能力。隨著對(duì)BCL6功能的研究,，人們發(fā)現(xiàn)了一件有趣的事,。BCL6的結(jié)構(gòu)與Tram track很相似，而Tram track是果蠅的一種阻止神經(jīng)元分化的轉(zhuǎn)化抑制子,。在B細(xì)胞的發(fā)育中,，BCL6可能還有另外一些功能，那就是與維持B細(xì)胞的復(fù)制的淺能有關(guān),。由于原始生長(zhǎng)中心B細(xì)胞已經(jīng)被抗原選擇過了,。所以他們也是和宿主防御能力有關(guān)的所有免疫系統(tǒng)的一個(gè)組成部分。在感染被消除后,，少量的處于前終末分化階段的這些細(xì)胞被保留下來,，處于靜止期，這就是記憶細(xì)胞,。當(dāng)再次遇到抗原使，記憶細(xì)胞重新建立生長(zhǎng)中心并且能夠激活并建立20個(gè)額外的復(fù)制循環(huán)。因此,，記憶B細(xì)胞表達(dá)BCL6,，具有干細(xì)胞樣功能或許就不足為奇了。解釋T細(xì)胞的抗原依賴階段的發(fā)育困難比較大,。這是因?yàn)榻K末分化T細(xì)胞不象漿細(xì)胞那樣具有形態(tài)學(xué)的特性,。和漿細(xì)胞相比，它能夠回復(fù)變異到早期階段?，F(xiàn)在已有一些研究開始解決這一問題,。他們的研究細(xì)胞表面的受體分子CD27和CD28分子的喪失和CD8+T細(xì)胞終末分化的關(guān)系而進(jìn)行的。另外一些研究通過T細(xì)胞對(duì)CCR7（一種細(xì)胞因子受體）和CD45RA異構(gòu)型的不同而確定了T細(xì)胞的發(fā)育場(chǎng)所,。對(duì)于抗原激活的CD4+T細(xì)胞來說,。初始細(xì)胞表達(dá)CD45RA+CCR7+；中心記憶細(xì)胞表達(dá)CD45RO+CCR7+,，效應(yīng)記憶細(xì)胞表達(dá)CD45RO+CCR7-,。中心記憶細(xì)胞表面CCR7的表達(dá)預(yù)示細(xì)胞將來歸巢于二級(jí)淋巴器官。反之,，CCR7缺乏的效應(yīng)細(xì)胞預(yù)示將歸巢于外周感染的炎癥部位,。這種預(yù)見性已被證實(shí)。CD8+T細(xì)胞的表現(xiàn)型和另外的一種CD45RA+CCR7-亞群相似,。這一細(xì)胞亞群被認(rèn)為是一群終末分化的效應(yīng)細(xì)胞群,。主要由CD27缺陷型構(gòu)成與CD4+細(xì)胞相似，CCR7+和CCR7-的分子在抗原激活的CD8+細(xì)胞上也被證實(shí)具有指導(dǎo)細(xì)胞定植中樞和外周的功能,?？傊@些研究與T細(xì)胞發(fā)育的路線最相似,。從初始T細(xì)胞到中心記憶T細(xì)胞（都表達(dá)CCR7）再到效應(yīng)記憶T細(xì)胞,，不表達(dá)CCR7。在CD8+T細(xì)胞的例子中,，效應(yīng)細(xì)胞還有CD45RA異構(gòu)型和CCR7缺失的回復(fù)變異,。然而從這些研究中，還沒有明顯的證據(jù)顯示為什么需要2個(gè)記憶T細(xì)胞亞群,。

通過對(duì)T細(xì)胞發(fā)育的抗原 以來途徑的分析我們建議用CCR7+中心記憶T細(xì)胞代表具有自我更新能力的干細(xì)胞樣T細(xì)胞,，而用CCR7-效應(yīng)記憶T細(xì)胞代表經(jīng)過有限的細(xì)胞循環(huán)而終末分化的定型的祖細(xì)胞。由此產(chǎn)生了五個(gè)預(yù)見,，有些在研究中已經(jīng)碰到,，有些還沒有。第一個(gè)就是 ,，CD45RO+CCR7+T細(xì)胞是比CD45RO+CCR7-T細(xì)胞分化較少的細(xì)胞,；事實(shí)上，是CD4+和CD8+效應(yīng)T細(xì)胞產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞因子，分泌穿孔素產(chǎn)生溶細(xì)胞效應(yīng),。而不是中心記憶性T細(xì)胞,。第二，發(fā)育的特征是以CCR7的表達(dá)為基礎(chǔ)的,，這就要求一定的信號(hào)以保持自身復(fù)制的狀態(tài),，這些信號(hào)是由二級(jí)淋巴組織微循環(huán)所提供的，在那里淋巴細(xì)胞可以通過DC細(xì)胞而接觸到抗原,。這一點(diǎn)是否正確還不清楚,，但只有已經(jīng)可以進(jìn)行終末分化的CCR7-T細(xì)胞才能到表面表達(dá)抗原成分的靶細(xì)胞形成的炎癥周圍。第三 ,，由于炎癥的調(diào)節(jié)作用,，大部分效應(yīng)細(xì)胞將被消除（已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并充分證實(shí)了這一點(diǎn)）而自身更新的細(xì)胞群應(yīng)該被保留下來。晚期細(xì)胞的命運(yùn)還沒有被分析,，除非這些細(xì)胞被記憶性CTLs的突變地標(biāo)記亞群所代替,。這些在小鼠身上CTLs是在急性感染消退后被保留下來的細(xì)胞。第四,，將具有干細(xì)胞樣功能的細(xì)胞歸入CD45RO+CCR7+細(xì)胞與這些細(xì)胞所代表的整個(gè)抗原特異性T細(xì)胞池中相對(duì)少的一部分是一致的,。第五，CD45RO+CCR7+T細(xì)胞應(yīng)該表達(dá)轉(zhuǎn)錄抑制子,，這個(gè)抑制子的功能就如同B中的BCL6,。盡管有不止一個(gè)證據(jù)，但這一點(diǎn)還不清楚,?？偟膩碚f，CD4+和CD8+T細(xì)胞分化的抗原依賴階段可能有類似BCL6+的記憶B細(xì)胞發(fā)育的干細(xì)胞樣階段,，并且這一階段有可能使宿主終生產(chǎn)生特異性效應(yīng)T細(xì)胞,。

三 記憶淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化成干細(xì)胞的臨床意義

記憶淋巴細(xì)胞通過表達(dá)可以阻止終末分化的轉(zhuǎn)錄因子而具有復(fù)制的潛能。這一點(diǎn)與預(yù)防治療慢性病的疫苗的發(fā)展有一定的聯(lián)系,。第一,，正如那些詳盡描述了由于嚴(yán)重病毒感染而導(dǎo)致的抗原特異性CTLs現(xiàn)象的研究者所期待的那樣，這一現(xiàn)象可能是由于抗原刺激的完全干細(xì)胞樣T細(xì)胞克隆向效應(yīng)細(xì)胞的分化所引起的,。正如我們所知為阻止記憶B細(xì)胞和中樞記憶性T細(xì)胞的分化,，需要誘導(dǎo)和保持這些細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài)。這一過程需要一些信號(hào),。如果我們能用疫苗模擬這些信號(hào),，那么他們就可以選擇性擴(kuò)增這一細(xì)胞群?？梢蕴峁┐罅啃?yīng)淋巴細(xì)胞來增強(qiáng)免疫功能或?qū)Ω陡腥??；蛟S正是這一相似的過程，是疫苗在人體發(fā)揮作用的基礎(chǔ),。相反地,，擴(kuò)增的喪失效應(yīng)功能的抗原特異性T細(xì)胞群在一些病毒感染或癌癥病人也被描述了,。隨著BCL6可以阻止B細(xì)胞終末分化這一現(xiàn)象發(fā)現(xiàn),，人們可能會(huì)問是否有其他的轉(zhuǎn)錄因子存在于T細(xì)胞，可以抑制T細(xì)胞效應(yīng)功能,，在這些病理狀態(tài)下,，他們的表達(dá)是否還受調(diào)節(jié)。

　最后,，最近的發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步證明免疫系統(tǒng)毫無疑問對(duì)腫瘤的發(fā)展有影響,，并且相反到腫瘤通過激發(fā)潛在無應(yīng)答能力的保護(hù)性淋巴細(xì)胞克隆（無反應(yīng)性地或耐受地）而影響免疫系統(tǒng),。只有抗原依賴淋巴細(xì)胞的分化完全徹底被搞清楚,，并且能夠在活體上進(jìn)行記憶和效應(yīng)淋巴細(xì)胞治療性操作才能進(jìn)行過繼免疫這種最好的方法來檢驗(yàn)這些操作的潛在作用。例如,，將病人的T細(xì)胞冷藏于玻璃管中,，這些T細(xì)胞通過輸入媒介動(dòng)物使它處于自我更新階段。這些媒介動(dòng)物可逆性的表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子,?？梢砸种平K末分化。通過這種方法可以使抗原特異性CTLs高效到擴(kuò)增,。這種方法允許在試管中進(jìn)行一些額外的操作,。這些操作在活體可能是很危險(xiǎn)的。例如,，為得到高親和力,，腫瘤抗原特異性無反應(yīng)地抑制性T細(xì)胞克隆而清除所有CD25+調(diào)控T細(xì)胞。因此,，隨著針對(duì)其他發(fā)育系統(tǒng)中自身更新細(xì)胞的研究,，關(guān)于由淋巴細(xì)胞分化的抗原依賴階段產(chǎn)生的干細(xì)胞樣記憶淋巴細(xì)胞的研究為人們對(duì)治療方法的改進(jìn)提供了新的機(jī)會(huì)。我們將會(huì)對(duì)這些細(xì)胞有更進(jìn)一步的理解,。