北京生命科學(xué)院李夏璐實(shí)驗(yàn)室在FEBS Letters雜志在線發(fā)表題為RBM5 promotes exon 4 skipping of AID pre-mRNA by competing with the binding of U2AF65 to the polypyrimidine tract的文章,。文中報(bào)道了腫瘤抑制因子RBM5 （RNA binding motif 5）可通過競爭性抑制剪接因子U2AF65對于3’剪接位點(diǎn)的結(jié)合，促進(jìn)AID基因外顯子4的跳躍,。
AID（Activation-induced cytidinedeaminase）是抗體形成過程中,免疫球蛋白基因發(fā)生CSR(class switch recombination)和SHM(somatic hypermutation)不可或缺的關(guān)鍵因子,。無論是重組還是突變,AID蛋白改變基因組結(jié)構(gòu)的特性決定了這一基因的表達(dá)必需置于極為嚴(yán)格的時(shí)空調(diào)節(jié)之下。已有的研究結(jié)果也顯示AID表達(dá)的失調(diào)與淋巴癌的發(fā)生有著密切的聯(lián)系,。
AID基因前體mRNA的選擇性剪接產(chǎn)物可以編碼具有不同生物學(xué)活性的蛋白,。有研究表明,，AID的選擇性剪接具有“排他性”,，每一個(gè)成熟B細(xì)胞中只存在一種形式的選擇性剪接產(chǎn)物,。這些結(jié)果提示，前體mRNA的選擇性剪接很可能是AID基因表達(dá)調(diào)控的一個(gè)重要環(huán)節(jié),。然而,，目前對于調(diào)控AID選擇性剪接的分子機(jī)理尚不了解。
本文首先發(fā)現(xiàn)腫瘤抑制因子RBM5過表達(dá)能在HeLa細(xì)胞中有效促進(jìn)AID mini-gene外顯子4的跳躍,。進(jìn)一步的工作表明一現(xiàn)象是由于RBM5抑制AID內(nèi)含子3的剪接造成的,，并且RBM5的抑制作用依賴于AID基因該內(nèi)含子3’剪接位點(diǎn)的強(qiáng)度。剪接位點(diǎn)序列的突變以及凝膠遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果繼而揭示,，RBM5能競爭性抑制剪接因子U2AF65與該內(nèi)含子3’剪接位點(diǎn)上游多嘧啶區(qū)的結(jié)合,，從而在剪接體裝配的早期抑制內(nèi)含子3的剪接。這一工作不僅為了解AID選擇性剪接的分子機(jī)理提供了新的線索,，也為進(jìn)一步解析腫瘤抑制因子RBM5在mRNA剪接中的作用提供了新的信息,。
我所與北京師范大學(xué)聯(lián)合培養(yǎng)的博士研究生金文星，以及與中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合培養(yǎng)的博士研究生牛召陽為該文章共同第一作者,，論文的其他作者還有吉林大學(xué)本科畢設(shè)實(shí)習(xí)學(xué)生徐丹,，李夏璐博士為本文的通訊作者。該項(xiàng)研究由科技部和北京市政府資助,，在北京生命科學(xué)研究所完成,。（生物谷Bioon.com）
doi: 10.1016/j.febslet.2012.09.006
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RBM5 promotes exon 4 skipping of AID pre-mRNA by competing with the binding of U2AF65 to the polypyrimidine tract
Wenxing Jin, Zhaoyang Niu, Dan Xuc, Xialu Li
Alternative splicing is involved in functional regulation of the mutagenic enzyme activation-induced cytidine deaminase (AID). However, the molecular basis for AID splicing regulation remains undefined. Using a mini-gene-based screen in HeLa cells, we found that overexpression of RNA binding motif protein 5 (RBM5, or LUCA-15/H37) significantly promoted AID exon 4 skipping by suppressing the splicing of intron 3. The inhibitive effect of RBM5 on intron 3 splicing required a weak 3'-splice site (ss). Indicative of the underlying mechanism, RBM5 interfered with the binding of U2AF65 to the polypyrimidine tract at the 3'-ss in vitro. Our findings thus not only shed lights on the regulatory mechanism of AID exon 4 skipping, but also provide new insights into how RBM5 functions in splicing regulation.
