2012年10月15日 訊 /生物谷BIOON/ --在此之前，醫(yī)學(xué)研究人員很少能夠通過實驗操縱初始T細(xì)胞(naïve T cell)來研究它們在免疫功能上所發(fā)揮的至關(guān)重要的作用,，這是因為它們是很難穿透的,。
如今，聚合物專家Gregory Tew和包括免疫學(xué)家Lisa Minter在內(nèi)的同事們開發(fā)出一種新的方法：利用一種新的人工合成蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域(protein transduction domain, PTD)不僅能夠進(jìn)入初始T細(xì)胞內(nèi)部,，而且還能夠運送生物活性分子如蛋白和人工合成分子穿過它們的被長期封鎖的細(xì)胞膜,。
Tew和同事們將他們合成的新的大分子稱為“PTD模擬物(PTD mimics, PTDMs)”。這些大分子能夠溜進(jìn)初始T細(xì)胞膜和運送治療性小干擾RNA(small interfering RNA, siRNA),。相關(guān)研究于近期刊登在Molecular Therapy期刊上,。
早期的運送方法需要電穿孔或者使用病毒，無論是哪種方法后會降低細(xì)胞活性或?qū)Σ∪藥聿豢山邮艿娘L(fēng)險,。
Tew,、Minter和同事們發(fā)現(xiàn)人們對用于能夠高效地運送siRNA到通常很難進(jìn)入的細(xì)胞(如人T細(xì)胞)中的容易制備的非病毒性試劑的需求越來越大。成功地運送siRNA到初始T細(xì)胞中將會證實細(xì)胞內(nèi)發(fā)生有效的基因敲除,，同時不會產(chǎn)生毒性,，而且還提供一種強大的新的免疫工具。
在這項研究中,，研究人員利用生物模擬設(shè)計原理來制造毒性更少和更加有效地運送藥物跨過初始T細(xì)胞,。
他們首先鑒定出PTDs的關(guān)鍵性特征，然后讓新的大分子合成聚合物模擬物獲得了這些PTDs 的一些化學(xué)屬性,。特別地,，他們設(shè)計和研究了兩種不同的PTDMs來運送siRNA到兩種很難感染的細(xì)胞類型：來自永生化的人T細(xì)胞的一種細(xì)胞系和來自三名不同供者的外周血細(xì)胞。
為了驗證這些測試的有效性,，他們對NOTCH1進(jìn)行定向敲降,，其中NOTCH1是一種控制基因的跨膜受體，也在T細(xì)胞發(fā)育,、增殖和分化中發(fā)揮著作用,。論文作者們報道，在接受一次處理后,，在這兩種細(xì)胞中NOTCH1蛋白表達(dá)水平下降了50%,。利用這種技術(shù)，研究人員希望在未來能夠微調(diào)T細(xì)胞的激活,。在癌癥監(jiān)視中,，人們可能想要表達(dá)NOTCH1來促進(jìn)免疫反應(yīng)，但是在自身免疫疾病中,，降低它的表達(dá)將是有益處的,。(生物谷Bioon.com)
doi: 10.1038/mt.2012.196
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Research scores advance in manipulating T-cells
Gregory Tew, Lisa Minter et al.
Until recently, medical researchers had little hope of experimentally manipulating naïve T cells to study their crucial roles in immune function, because they were largely impenetrable, says polymer scientist Gregory Tew: "So far off limits we could not readily get inside to investigate their workings."
