食源性疾病是當(dāng)代全球食品安全面臨的巨大威脅,。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì),全球每年有數(shù)十億人感染上食源性疾病,。美國“9·11”事件后,,世界各地對生物恐怖事件給予了極大的關(guān)注,由此建立對食源性致病菌的鑒定和檢測方法勢在必行,。質(zhì)譜技術(shù)是近年來應(yīng)用于蛋白質(zhì)和多肽分析的一種重要方法,,國外已有應(yīng)用該項(xiàng)技術(shù)對沙門氏菌,、大腸桿菌和李斯特氏菌等常見食源性病菌進(jìn)行檢測和鑒定的研究。現(xiàn)將相關(guān)文獻(xiàn)概述如下:
1.標(biāo)題: Investigating the effects of protein patterns on microorganism identification by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry and protein database searches
來源: JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A 976 (1-2): 103-111 NOV 8 2002
作者: Ho YP, Hsu PH
利用高效液相色譜-電噴霧電離質(zhì)譜(HPLC-ESI-MS)對大腸桿菌樣品的蛋白質(zhì)生物標(biāo)記進(jìn)行分離和檢測,,考察了樣品的制備方法對LC-MS檢測細(xì)菌蛋白質(zhì)的影響,,并試驗(yàn)了LC-MS分析的蛋白質(zhì)模型在通過蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫搜索進(jìn)行微生物鑒別中的作用。
2.標(biāo)題: Detection of Escherichia coli using immunomagnetic separation and bacteriophage amplification coupled with matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry
來源: RAPID COMMUNICATIONS IN MASS SPECTROMETRY 17 (3): 257-263 2003
作者: Madonna AJ, Van Cuyk S, Voorhees KJ
基質(zhì)輔助激光解析/電離質(zhì)譜全細(xì)胞分析已經(jīng)作為快速鑒別/檢測細(xì)菌的一項(xiàng)有價值的手段而出現(xiàn),,其具有樣品制備量少和易于操作的優(yōu)點(diǎn),,但通常對細(xì)菌純化樣品的濃度要求較高。該研究提供了一種優(yōu)于MALDI-MS分析的細(xì)菌檢測方法,,具體包括三個主要步驟:(1)利用免疫磁球法分離目標(biāo)細(xì)菌,;(2)免疫捕獲的細(xì)菌對細(xì)胞溶解酶抗菌素的感染;以及(3)用MALDI-MS 對感染體進(jìn)行化驗(yàn),。利用該技術(shù)對肉湯中較低濃度的大腸桿菌進(jìn)行了快速檢測,。
3. 標(biāo)題: Two-dimensional liquid chromatography protein expression mapping for differential proteomic analysis of normal and O157 : H7 Escherichia coli
來源: BIOTECHNIQUES 35 (6): 1202-+ DEC 2003
作者: Zheng SP, Schneider KA, Barder TJ, Lubman DM
應(yīng)用多維色譜技術(shù)對大腸桿菌不同株種的蛋白質(zhì)進(jìn)行了微分析,得到大腸桿菌0157:H7蛋白質(zhì)含量的兩維表達(dá)圖,。分別用電噴霧電離-飛行時間質(zhì)譜(ESI-TOF-MS)和基質(zhì)輔助激光解析/電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)肽質(zhì)量指紋進(jìn)行蛋白質(zhì)分子量的表征和蛋白質(zhì)鑒定,。實(shí)驗(yàn)鑒別了幾種蛋白質(zhì)在大腸桿菌0157:H7和無毒大腸桿菌的表達(dá),有望將其作為檢測和治療大腸桿菌0157:H7的標(biāo)識,。
4. 標(biāo)題: Two-dimensional electrophoresis database of Listeria monocytogenes EGDe proteome and proteomic analysis of mid-log and stationary growth phase cells
來源: PROTEOMICS 4 (10): 3187-3201 OCT 2004
作者: Folio P, Chavant P, Chafsey I, Belkorchia A, Chambon C, Hebraud M
該研究的目的是建立單核細(xì)胞增生李斯特氏菌EGDe 株蛋白質(zhì)組的兩維數(shù)據(jù)庫,,其中微生物的可溶性蛋白質(zhì)片段用兩維電泳進(jìn)行分析,對應(yīng)于126種不同蛋白質(zhì)的201個蛋白質(zhì)點(diǎn)以基質(zhì)輔助激光解析/電離-飛行時間質(zhì)譜鑒別,。該兩維圖譜為進(jìn)一步研究單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的蛋白質(zhì)表達(dá)提供了最初的依據(jù),。
5. 標(biāo)題: Detection of bacteria from biological mixtures using immunomagnetic separation combined with matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry
來源: RAPID COMMUNICATIONS IN MASS SPECTROMETRY 15 (13): 1068-1074 2001
作者: Madonna AJ, Basile F, Furlong E, Voorhees KJ
一種以免疫磁分離和基質(zhì)輔助激光解析/電離-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用,從復(fù)雜生物混合物中快速鑒別特定細(xì)菌的方法,,其中應(yīng)用MALDI-MS進(jìn)行全細(xì)胞分析,,可以得到主要包含目標(biāo)微生物特征的蛋白質(zhì)生物標(biāo)記的指紋質(zhì)量圖譜。利用該方法,,從標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌混合物及河水,、人體尿液和雞血中分離和檢測出豬霍亂沙門氏菌。
綜上所述,,質(zhì)譜技術(shù),,尤其是基質(zhì)輔助激光解析/電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)技術(shù),已被國外研究者視為一項(xiàng)具有潛在應(yīng)用價值的檢測手段,,在食源性致病菌的檢測和鑒別方面將發(fā)揮出重要作用,。最近,國內(nèi)一些科研和檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)如軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院和上海出入境檢驗(yàn)檢疫局等也相繼開展該類研究,,以期為我國檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)建立可靠的科學(xué)的檢測方法,,為我國食品安全的控制和預(yù)警機(jī)制提供基本保證。