微生物學(xué)報Acta Microbiologica Sinica
48(3)：299~303; 4 March 2008
基金項目: 國家..973 項目”(2006 CB504404); 國家自然科學(xué)基金(30425031)
*通訊作者,。Tel: +86-514-87971136; Fax: +86-514-87311374; E-mail: [email protected]
作者簡介: 殷月蘭(1971. ), 女, 山東青島人, 副教授, 博士, 研究方向為畜禽重要疫病發(fā)病機理和免疫機理。
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收稿日期: 2007-09-20; 修回日期: 2007-11-23
ISSN 0001-6209; CN11-1995/Q
殷月蘭, 朱國強, 耿士忠, 胡茂志, 焦新安*
(揚州大學(xué), 江蘇省人獸共患病學(xué)重點實驗室, 揚州 225009)
摘要：產(chǎn)單核細胞李斯特菌的毒力因子與該菌在細胞間擴散,、傳播有著直接的關(guān)系, 其中肌動蛋白聚集因子ActA 是細菌由細胞漿擴散至相鄰細胞所必須的因子, 而廣譜磷脂酶C則參與具有雙層膜吞噬體的裂解過程,。[方法]本研究中利用同源重組技術(shù)成功構(gòu)建了毒力因子ActA 和 PC-PLC 雙缺失的突變株, [目的]并對突變株的毒力和免疫應(yīng)答潛能進行評價。[結(jié)果]Western blot 和磷脂酶活性測定實驗, 分別從蛋白質(zhì)水平上證實actA 和plcB 基因的缺失,。突變株的毒力顯著降低, 對小鼠半數(shù)致死劑量比野生型菌株提高約103 倍, 但仍然保持較好地誘導(dǎo)T 細胞應(yīng)答的能力, 并且能完全保護野生型細菌致死劑量的攻擊。實驗結(jié)果不僅表明ActA 和 PC-PLC 是產(chǎn)單核細胞李斯特菌的重要毒力因子,而且證實安全性提高的突變株依然保持有較強地誘導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答的能力,。[結(jié)論]因此, 該突變株的獲得不僅對李斯特菌病的預(yù)防具有重要作用, 而且為構(gòu)建預(yù)防人類和動物疫病的疫苗載體奠定了基礎(chǔ), 此外對于闡明LM 毒力因子的致病機理與免疫保護作用提供了條件,。
中圖分類號：Q936 文獻標識碼：A 文章編號：0001-6209 (2008) 03-0299-05
產(chǎn)單核細胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一種胞內(nèi)寄生菌, 人獸共患李斯特菌病的病原,感染后發(fā)病死亡率約為25%[1~2]。歐美國家曾多次暴發(fā)流行, LM 對食品的污染與危害, 已引起世界各國的普遍關(guān)注和高度重視, 其中研制預(yù)防李斯特菌病的減毒活疫苗是重要的課題之一[3],。另外, LM 所具有的獨特免疫應(yīng)答機制使它成為一種非常具有吸引力的運送異源抗原的疫苗載體[4~6],。目前研究表明, 通過毒力基因缺失的方法可使LM 毒力降低, 但毒力降低不顯著, 安全性得不到有效的保障。actA 和plcB 基因的編碼產(chǎn)物ActA 和PC-PLC 是與LM 致病性相關(guān)的主要毒力因子, actA 編碼的表面蛋白ActA 在LM 胞內(nèi)運動中起著重要作用, 能產(chǎn)生一種使肌動蛋白聚合的因子, 誘導(dǎo)LM 一極的肌動蛋白的聚合,以促進LM 在宿主細胞內(nèi)的極向運動[7]?；騪lcB 編碼廣譜磷脂酶C(PlcB), 在吞噬泡雙層膜溶解中起作用[8],。本研究通過同源重組的方法從基因組中缺失這兩個基因,并對突變株的生物學(xué)特性進行了初步研究。
全文下載：產(chǎn)單核細胞李斯特菌actA/plcB 缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性
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