微生物學(xué)報(bào)Acta Microbiologica Sinica
48(9)：1192~1197;4 September 2008
新型抑菌蛋白APn5抑制胡蘿卜軟腐歐文氏菌
韓冬梅,，班慧芳,，余子全，喻子牛,，孫明*
(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,，農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430070)
摘要：【目的】魔芋軟腐病是一種由胡蘿卜軟腐歐文氏菌引起的病害,，嚴(yán)重影響了魔芋產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,。枯草芽胞桿菌BSn5所產(chǎn)生的蛋白APn5對(duì)胡蘿卜歐文氏菌具有良好的抑菌效果,，本文將對(duì)該蛋白進(jìn)行鑒定和性質(zhì)分析,。【方法】用飽和度為30%的硫酸銨沉淀和超濾離心的方法從枯草芽胞桿菌BSn5的發(fā)酵上清液中分離純化APn5蛋白,。以濾紙片法檢測APn5蛋白的抑菌譜,。用不同的溫度、pH條件和蛋白酶處理APn5蛋白,，并檢測其抑菌活性變化,。測定菌株BSn5的生長周期，同步檢測其發(fā)酵上清液的抑菌活性,。利用基質(zhì)協(xié)助激光解吸附離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)和電噴霧四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(Q-TOF)分析APn5蛋白,。【結(jié)果】APn5蛋白對(duì)于魔芋軟腐病菌具有較好的抑菌活性,，抑菌譜較窄,，主要對(duì)細(xì)菌性植物病原菌具有較強(qiáng)的抑制作用,；對(duì)高溫敏感，對(duì)蛋白酶E敏感,，對(duì)蛋白酶K和胰蛋白酶部分敏感,；在酸性環(huán)境下其抑菌活性穩(wěn)定，堿性環(huán)境下活性不穩(wěn)定,。在菌株BSn5的生長周期中,，該蛋白的抑菌活性不能穩(wěn)定存在，其發(fā)酵上清液在對(duì)數(shù)生長期抑菌活性逐漸升高,，進(jìn)入穩(wěn)定期后抑菌活性開始下降,，直至完全消失。質(zhì)譜分析未發(fā)現(xiàn)其與已知蛋白具有高度相關(guān)性,?！窘Y(jié)論】APn5蛋白具有不同于已報(bào)道的枯草芽胞桿菌所產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)的性質(zhì)，推測為一種新型的抑菌蛋白,。
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