2012年10月15日 訊 /生物谷BIOON/ --在一項新的研究中,，來自英國謝菲爾德大學(xué)的研究人員開發(fā)出一種新的方法來培養(yǎng)在神經(jīng)修復(fù)中發(fā)揮著至關(guān)重要的施旺細胞(Schwann cell)，這是為治療遭受嚴(yán)重性神經(jīng)損傷(包括脊髓損傷)的病人而取得的非常重要的一步,。
已知施旺細胞能夠促進和增加模式動物中的神經(jīng)生長,，但是培養(yǎng)它們比較困難,、耗時和代價高昂，因此它們的臨床使用一直受到限制,。
培養(yǎng)來自成體組織的施旺細胞的現(xiàn)存方法促進一種被稱作成纖維細胞的細胞快速生長以致于將施旺細胞淹沒掉,，從而降低施旺細胞的生長速度和數(shù)量。這就意味著在一開始時需要大量的組織來培養(yǎng)出數(shù)量充足的施旺細胞來用于治療目的,。它也需要額外的純化步驟,，這就需要花費大量時間，并且代價高昂：需要花費3個月的時間才能全部完成,。
在當(dāng)前的研究中,，在John Haycock教授的領(lǐng)導(dǎo)下,，研究人員在大鼠成體組織中開發(fā)出一種新的技術(shù)來戰(zhàn)勝所有這些問題，并且只需一半不到的時間和極低的成本就可培養(yǎng)施旺細胞,。他們的方法非常簡單：給施旺細胞喂食,，同時讓成纖維細胞饑餓。他們使用一種只有施旺細胞能夠降解和取食的氨基酸,，這樣只需19天的時間就能夠利用少量成體組織培養(yǎng)出純度為97%的施旺細胞群體,。
Haycock教授堅信這項技術(shù)能夠應(yīng)用于人。他的研究團隊正在人神經(jīng)組織中使用這種這方法來進行臨床試驗,。試驗結(jié)果有望將在開展后6個月內(nèi)公布出來,。
doi: 10.1038/nprot.2012.118
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Integrated culture and purification of rat Schwann cells from freshly isolated adult tissue
Rossukon Kaewkhaw, Andy M Scutt & John W Haycock
We describe a simple, rapid and highly selective protocol for the primary culture of Schwann cells in vitro from freshly dissociated adult rat nerve. The protocol is based on a selective culture medium comprising both mitogens (forskolin and optionally N2 supplement plus bovine pituitary extract), to stimulate growth of Schwann cells, plus an inhibitory substrate to simultaneously restrict fibroblast overgrowth (D-valine), contained in DMEM. This protocol differs from other available methods in that it uses the preferential capacity of Schwann cells to metabolize D-valine because of the difference in expression of a D-amino acid oxidase (DAAO) enzyme between Schwann cells and fibroblasts plus the presence of a selective mitogen to stimulate growth of Schwann cells. This permits derivation of highly pure Schwann cells directly from fresh adult nerve. Average Schwann cell purities of 97% can be achieved after 19 d without pre-degeneration, purification or antimitotic steps.
