2012年10月15日 訊 /生物谷BIOON/ --在一項(xiàng)新的研究中，來(lái)自英國(guó)謝菲爾德大學(xué)的研究人員開(kāi)發(fā)出一種新的方法來(lái)培養(yǎng)在神經(jīng)修復(fù)中發(fā)揮著至關(guān)重要的施旺細(xì)胞(Schwann cell),，這是為治療遭受嚴(yán)重性神經(jīng)損傷(包括脊髓損傷)的病人而取得的非常重要的一步,。
已知施旺細(xì)胞能夠促進(jìn)和增加模式動(dòng)物中的神經(jīng)生長(zhǎng),，但是培養(yǎng)它們比較困難,、耗時(shí)和代價(jià)高昂,，因此它們的臨床使用一直受到限制,。
培養(yǎng)來(lái)自成體組織的施旺細(xì)胞的現(xiàn)存方法促進(jìn)一種被稱作成纖維細(xì)胞的細(xì)胞快速生長(zhǎng)以致于將施旺細(xì)胞淹沒(méi)掉,，從而降低施旺細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和數(shù)量,。這就意味著在一開(kāi)始時(shí)需要大量的組織來(lái)培養(yǎng)出數(shù)量充足的施旺細(xì)胞來(lái)用于治療目的。它也需要額外的純化步驟,，這就需要花費(fèi)大量時(shí)間,，并且代價(jià)高昂：需要花費(fèi)3個(gè)月的時(shí)間才能全部完成。
在當(dāng)前的研究中,，在John Haycock教授的領(lǐng)導(dǎo)下,，研究人員在大鼠成體組織中開(kāi)發(fā)出一種新的技術(shù)來(lái)戰(zhàn)勝所有這些問(wèn)題，并且只需一半不到的時(shí)間和極低的成本就可培養(yǎng)施旺細(xì)胞,。他們的方法非常簡(jiǎn)單：給施旺細(xì)胞喂食,，同時(shí)讓成纖維細(xì)胞饑餓。他們使用一種只有施旺細(xì)胞能夠降解和取食的氨基酸,，這樣只需19天的時(shí)間就能夠利用少量成體組織培養(yǎng)出純度為97%的施旺細(xì)胞群體,。
Haycock教授堅(jiān)信這項(xiàng)技術(shù)能夠應(yīng)用于人。他的研究團(tuán)隊(duì)正在人神經(jīng)組織中使用這種這方法來(lái)進(jìn)行臨床試驗(yàn),。試驗(yàn)結(jié)果有望將在開(kāi)展后6個(gè)月內(nèi)公布出來(lái),。
doi: 10.1038/nprot.2012.118
PMC:
PMID:
Integrated culture and purification of rat Schwann cells from freshly isolated adult tissue
Rossukon Kaewkhaw, Andy M Scutt & John W Haycock
We describe a simple, rapid and highly selective protocol for the primary culture of Schwann cells in vitro from freshly dissociated adult rat nerve. The protocol is based on a selective culture medium comprising both mitogens (forskolin and optionally N2 supplement plus bovine pituitary extract), to stimulate growth of Schwann cells, plus an inhibitory substrate to simultaneously restrict fibroblast overgrowth (D-valine), contained in DMEM. This protocol differs from other available methods in that it uses the preferential capacity of Schwann cells to metabolize D-valine because of the difference in expression of a D-amino acid oxidase (DAAO) enzyme between Schwann cells and fibroblasts plus the presence of a selective mitogen to stimulate growth of Schwann cells. This permits derivation of highly pure Schwann cells directly from fresh adult nerve. Average Schwann cell purities of 97% can be achieved after 19 d without pre-degeneration, purification or antimitotic steps.
