中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)鞏志忠教授撰寫的文章發(fā)表于2006年1月的美國(guó)著名雜志《The Plant Cell》上,。
《The Plant Cell》(ISSN 1040-4651)是由美國(guó)植物生理學(xué)會(huì)（ASPB）出版發(fā)行的著名學(xué)術(shù)期刊,，創(chuàng)刊于1989年。在創(chuàng)刊后的三年內(nèi),，該雜志即成為植物學(xué)領(lǐng)域基礎(chǔ)方面最有影響的頂級(jí)學(xué)術(shù)刊物,。刊發(fā)文章主要是有關(guān)植物有機(jī)體, 包括高等植物和低等植物,、植物型原生生物,、植物病毒和真菌等的基本細(xì)胞過(guò)程, 側(cè)重基因表達(dá)調(diào)節(jié)、植物發(fā)育的分子和遺傳基礎(chǔ),、植物與微生物相互作用,、植物細(xì)胞機(jī)體形成與機(jī)能的分子問(wèn)題研究方面的文章。
鞏志忠教授這篇文章題為“ROR1/RPA2A, a Putative Replication Protein A2, Functions in Epigenetic Gene Silencing and in Regulation of Meristem Development in Arabidopsis W”,。全文共18頁(yè),，文章摘要如下：
擬南芥中編碼DNA糖基化酶的ROS1基因突變后使轉(zhuǎn)基因ProRD29A: LUC的啟動(dòng)子區(qū)發(fā)生超甲基化，表現(xiàn)出轉(zhuǎn)錄水平的基因沉默現(xiàn)象,，而與其相鄰的轉(zhuǎn)基因 Pro35S: NPTII啟動(dòng)子區(qū)的甲基化沒(méi)有變化卻同樣發(fā)生了轉(zhuǎn)錄水平的基因沉默,。我們利用沉默的Pro35S: NPTII轉(zhuǎn)基因作為篩選標(biāo)記，從ros1突變體背景的誘變后代中篩選出了ros1突變的抑制因子ror1（suppressor of ros1）的兩個(gè)等位突變體ror1-1ros1和ror1-2ros1,。ROR1基因的突變能夠使ros1突變背景中沉默狀態(tài)的Pro35S: NPTII基因恢復(fù)表達(dá),，但是對(duì)ProRD29A: LUC基因的沉默狀態(tài)卻沒(méi)有影響。ror1ros1突變體中內(nèi)源TSI基因的表達(dá)量比ros1突變體和C24野生型（ros1突變體的背景）都高,。除了RD29A啟動(dòng)子區(qū)外,，rDNA區(qū)和著絲粒區(qū)的DNA甲基化都不受ror1突變的影響。然而,，染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)果顯示,，相對(duì)于ros1突變體，ror1ros1突變體中35S啟動(dòng)子區(qū)的組蛋白H3-K9的二甲基化程度降低了,，而組蛋白H3的乙?；潭葎t升高了。這說(shuō)明ror1突變引起的Pro35S: NPTII區(qū)域基因沉默的釋放與DNA甲基化變化無(wú)關(guān)而與組蛋白的修飾狀態(tài)的變化相關(guān),。ror1ros1突變體表現(xiàn)出明顯的發(fā)育上的異常表型,，如植株矮小、早花等,，一些突變體在發(fā)育晚期還出現(xiàn)末端花結(jié)構(gòu)異常的表型,。圖位克隆基因定位的結(jié)果顯示ROR1基因編碼一個(gè)擬南芥中DNA復(fù)制蛋白A2（RPA2A，At2g24490）,?！?nbsp;
ROR1/RPA2A基因在根尖及莖尖的分生組織表達(dá)量都很高,。ROR1/RPA2A基因突變會(huì)影響分生組織中細(xì)胞的分裂，而對(duì)細(xì)胞最終的大小沒(méi)有影響,。細(xì)胞亞定位分析說(shuō)明ROR1蛋白定位于細(xì)胞核內(nèi),，酵母雙雜交體外實(shí)驗(yàn)證明ROR1蛋白與ROS1蛋白互作。我們的研究揭示了擬南芥的DNA復(fù)制蛋白A2在表觀基因沉默以及發(fā)育調(diào)節(jié)過(guò)程中的重要作用,。
