小RNA,,無論的RNAi還是microRNA,,相關(guān)研究都是目前生命科學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的寵兒,,在近期出版的《Science》(12月7日在線版)上有篇小RNA研究內(nèi)容頗為引人注目,提出次級siRNAs(secondary siRNAs,,又稱傳遞RNAi)是一種特殊的小RNAs群體,。
來自荷蘭皇家科學(xué)院(Hubrecht Laboratory,NIOB-KNAW)的研究人員從可以表達一個單22核苷酸的初級siRNA(primary siRNA)的轉(zhuǎn)基因線蟲細胞系中克隆了二級siRNAs——在RNA干擾過程中,,Dicer酶將dsRNA切成短的初級siRNAs,,之后這些短RNAs可作為靶標mRNA的引物,由病毒性RNA指導(dǎo)的RNA聚合酶(RNA-directed RNA polymerases,,RdRps)產(chǎn)生次級siRNAs(靶序列直接擴增),,并且這樣啟動一個RNA誘導(dǎo)的RNA聚合反應(yīng),這種放大效果使得最初少量dsRNA引起大量靶標RNA沉默,。
研究人員發(fā)現(xiàn)幾個次級siRNAs序列開始于一些初級siRNA下游核苷,,這說明非RISC(RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體,,RNA-induced silencing complex)剪切mRNAs是次級siRNA的底物。在表達錯配單核苷酸初級siRNAs的細胞系中,,次級siRNAs并不復(fù)制這種錯配,但是包含mRNA互補核苷,,研究人員認為RdRPs完成了未完成的RNA合成,,而次級siRNAs是唯一攜帶5'雙磷酸鹽和三磷酸鹽,具有反應(yīng)鏈極性(antisense polarity)的siRNAs,,也是唯一與RDE-1(RNAi特異性argonaute蛋白)相關(guān)聯(lián)的siRNAs,。因此研究人員推斷次級siRNAs是一種不同類型的小RNAs,其產(chǎn)生依賴于RdRPs,,而且每一個次級siRNA是一個單獨RdRP的產(chǎn)物,。