小RNA,,無論的RNAi還是microRNA,相關研究都是目前生命科學領域關注的寵兒,,在近期出版的《Science》(12月7日在線版)上有篇小RNA研究內容頗為引人注目,,提出次級siRNAs(secondary siRNAs,又稱傳遞RNAi)是一種特殊的小RNAs群體,。
來自荷蘭皇家科學院(Hubrecht Laboratory,,NIOB-KNAW)的研究人員從可以表達一個單22核苷酸的初級siRNA(primary siRNA)的轉基因線蟲細胞系中克隆了二級siRNAs——在RNA干擾過程中,Dicer酶將dsRNA切成短的初級siRNAs,,之后這些短RNAs可作為靶標mRNA的引物,,由病毒性RNA指導的RNA聚合酶(RNA-directed RNA polymerases,RdRps)產生次級siRNAs(靶序列直接擴增),,并且這樣啟動一個RNA誘導的RNA聚合反應,,這種放大效果使得最初少量dsRNA引起大量靶標RNA沉默。
研究人員發(fā)現(xiàn)幾個次級siRNAs序列開始于一些初級siRNA下游核苷,,這說明非RISC(RNA誘導的沉默復合體,,RNA-induced silencing complex)剪切mRNAs是次級siRNA的底物。在表達錯配單核苷酸初級siRNAs的細胞系中,,次級siRNAs并不復制這種錯配,,但是包含mRNA互補核苷,研究人員認為RdRPs完成了未完成的RNA合成,,而次級siRNAs是唯一攜帶5'雙磷酸鹽和三磷酸鹽,,具有反應鏈極性(antisense polarity)的siRNAs,也是唯一與RDE-1(RNAi特異性argonaute蛋白)相關聯(lián)的siRNAs,。因此研究人員推斷次級siRNAs是一種不同類型的小RNAs,,其產生依賴于RdRPs,而且每一個次級siRNA是一個單獨RdRP的產物,。