Bioon.com訊:2011年6月4日-5日,,由華東干細胞庫,、中國細胞生物學(xué)學(xué)會干細胞生物學(xué)分會,、北方干細胞庫、南方干細胞庫,、中科院干細胞庫聯(lián)合主辦,,生物谷BioonGroup、再生泉共同承辦的2011干細胞技術(shù)臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用講座與培訓(xùn)在同濟大學(xué)逸夫樓順利召開,。生物谷BioonGroup編輯為您提供此次會議獨家新聞及會后跟蹤報道,。
干細胞是21世紀(jì)生命科學(xué)最受矚目的研究領(lǐng)域之一。干細胞是一類具有自我更新,、高度增殖和多向分化潛能的細胞群體,,它們可以通過細胞分裂維持自身細胞群的數(shù)量,同時又可以進一步分化成為各種不同的組織細胞,,從而構(gòu)成機體各種復(fù)雜的組織和器官,。人胚胎干細胞系的分離和體外成功培養(yǎng)具有極其重要的研究和臨床應(yīng)用價值。
會上,,上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院分子發(fā)育生物學(xué)研究室主任/ 中科院干細胞生物學(xué)重點實驗室主任/ 上海交通大學(xué)上海干細胞研究所所長金穎教授向參會者介紹了人胚胎干細胞建系技術(shù),。
人胚胎干細胞可用于體外研究人類胚胎發(fā)生發(fā)育過程,有助于理解分化發(fā)育機理,、認識生命和疾病現(xiàn)象,;通過對其體外分化和定向分化的研究,識別某些靶基因,,為人類新基因的發(fā)現(xiàn)及其功能的研究提供新的方法;人胚胎干細胞最為深遠的潛在用途是通過定向分化誘導(dǎo)產(chǎn)生各種特化的細胞和組織,,用于修復(fù)或替換喪失功能的組織和器官,為人類疾病的基因治療開辟廣泛的應(yīng)用前景,。而建立理想的人胚胎干細胞培養(yǎng)系統(tǒng)是開展上述研究的首要條件,。
干細胞可以分為三種類型,①全能干細胞,,它具有形成完整個體的分化潛能,;②多能干細胞,它具有分化出多種細胞組織的潛能,,但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力,;③專能干細胞,只能向一種類型活密切相關(guān)的兩種類型的細胞分化,。胚胎干細胞就屬于全能干細胞,,它具有與最早期胚胎細胞相似的形態(tài)特征和分化能力。
金穎教授告訴我們,,人胚胎干細胞(human embryonic stem cell,,HES)起源于體外受精發(fā)育到囊胚期的內(nèi)細胞團(inner cell mass,ICM),。由于受到倫理學(xué)上的限制,,HES的研究不能獲取足夠新鮮的受精卵。臨床上一般選擇形態(tài)和質(zhì)量上級別最高的胚胎進行人體,,以獲得高的妊娠率,,每次取卵受精后,除了植入母體的胚胎外,,多余的胚胎被凍存,,研究人員在獲得醫(yī)療機構(gòu)及捐獻者同意后,利用這些不良或者多余的胚胎建立HES系,。
在獲得胚胎,,經(jīng)冷凍復(fù)蘇,分離內(nèi)細胞團,,常規(guī)脫帶去滋養(yǎng)層后,,將ICM接種于飼養(yǎng)層上,7~10d待克隆增殖后,,初步分離ICM,,在此接種于新鮮的飼養(yǎng)層后,繼續(xù)傳代,。在HES的傳代培養(yǎng)過程中,,由于部分HES細胞自發(fā)分化,因此常利用機械發(fā)跳去部分化的HES細胞集落,將其劃成小塊傳代,。這種傳代方法效率低,,耗時長,人力耗費大,,易污染,,只適合小規(guī)模的HES培養(yǎng)。也可以選擇用中性蛋白酶或膠原酶傳代,,可節(jié)省大量的時間和人力,。
在體外細胞培養(yǎng)過程中,飼養(yǎng)層模擬體內(nèi)環(huán)境,,為HES提供各種因子,,維持HES自我更新狀態(tài)。小鼠胚胎成纖維細胞(mouse embryonic fibroblasts,,MEF)飼養(yǎng)層是最常用的HES飼養(yǎng)層細胞,。MEF能分泌LIF等多種細胞因子。HES一旦建系后,,可能對所用的MEF品系具有一定的依賴性,,因此要保證MEF的穩(wěn)定性在HES配過程中非常重要。但是研究人員認為,,飼養(yǎng)層細胞的應(yīng)用使得培養(yǎng)條件復(fù)雜化,,不利于明確各種因子和信號通路在維持HES自我更新中的作用。因此金穎教授指出,,為消除動物源性污染,,可以使用化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基(chemical difined medium,CDM)作為培養(yǎng)基,并且刺激無動物源性污染的飼養(yǎng)層細胞在CDM上產(chǎn)生足量的因子,,來彌補CDM的細胞因子不足,,構(gòu)建一個完全無動物源性,且安全有效的HES培養(yǎng)體系,。
金穎教授的實驗小組建立的7株HES系中2株HES細胞系參加了國際百株HES細胞系系統(tǒng)的研究項目,,在此次干細胞技術(shù)臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用講座與培訓(xùn)會議上,金穎教授與大家一起分享了這一喜人成果,。
ESC作為體外研究胚胎早期發(fā)育的優(yōu)勢模型,,進行藥物篩選的良好平臺,以及參與未來細胞治療領(lǐng)域的無限資源,,開始帶動世界范圍內(nèi)的干細胞研究熱潮,,已成為21世紀(jì)生物醫(yī)學(xué)的熱點,由生物谷BioonGroup承辦干細胞技術(shù)臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用講座與培訓(xùn)積極的推動國內(nèi)干細胞研究,。(生物谷Bioon.com)
資料中心:
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