Bioon.com訊:2011年6月4日-5日,,由華東干細(xì)胞庫(kù)、中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)干細(xì)胞生物學(xué)分會(huì),、北方干細(xì)胞庫(kù),、南方干細(xì)胞庫(kù)、中科院干細(xì)胞庫(kù)聯(lián)合主辦,,生物谷BioonGroup,、再生泉共同承辦的2011干細(xì)胞技術(shù)臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用講座與培訓(xùn)在同濟(jì)大學(xué)逸夫樓順利召開。生物谷BioonGroup編輯為您提供此次會(huì)議獨(dú)家新聞及會(huì)后跟蹤報(bào)道,。
干細(xì)胞是21世紀(jì)生命科學(xué)最受矚目的研究領(lǐng)域之一,。干細(xì)胞是一類具有自我更新、高度增殖和多向分化潛能的細(xì)胞群體,,它們可以通過(guò)細(xì)胞分裂維持自身細(xì)胞群的數(shù)量,,同時(shí)又可以進(jìn)一步分化成為各種不同的組織細(xì)胞,從而構(gòu)成機(jī)體各種復(fù)雜的組織和器官,。人胚胎干細(xì)胞系的分離和體外成功培養(yǎng)具有極其重要的研究和臨床應(yīng)用價(jià)值,。
會(huì)上,上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院分子發(fā)育生物學(xué)研究室主任/ 中科院干細(xì)胞生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任/ 上海交通大學(xué)上海干細(xì)胞研究所所長(zhǎng)金穎教授向參會(huì)者介紹了人胚胎干細(xì)胞建系技術(shù),。
人胚胎干細(xì)胞可用于體外研究人類胚胎發(fā)生發(fā)育過(guò)程,,有助于理解分化發(fā)育機(jī)理、認(rèn)識(shí)生命和疾病現(xiàn)象,;通過(guò)對(duì)其體外分化和定向分化的研究,,識(shí)別某些靶基因,為人類新基因的發(fā)現(xiàn)及其功能的研究提供新的方法;人胚胎干細(xì)胞最為深遠(yuǎn)的潛在用途是通過(guò)定向分化誘導(dǎo)產(chǎn)生各種特化的細(xì)胞和組織,,用于修復(fù)或替換喪失功能的組織和器官,,為人類疾病的基因治療開辟?gòu)V泛的應(yīng)用前景。而建立理想的人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)是開展上述研究的首要條件,。
干細(xì)胞可以分為三種類型,,①全能干細(xì)胞,它具有形成完整個(gè)體的分化潛能,;②多能干細(xì)胞,,它具有分化出多種細(xì)胞組織的潛能,但卻失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力,;③專能干細(xì)胞,,只能向一種類型活密切相關(guān)的兩種類型的細(xì)胞分化。胚胎干細(xì)胞就屬于全能干細(xì)胞,,它具有與最早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)特征和分化能力,。
金穎教授告訴我們,人胚胎干細(xì)胞(human embryonic stem cell,,HES)起源于體外受精發(fā)育到囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(inner cell mass,,ICM)。由于受到倫理學(xué)上的限制,,HES的研究不能獲取足夠新鮮的受精卵,。臨床上一般選擇形態(tài)和質(zhì)量上級(jí)別最高的胚胎進(jìn)行人體,以獲得高的妊娠率,,每次取卵受精后,,除了植入母體的胚胎外,多余的胚胎被凍存,,研究人員在獲得醫(yī)療機(jī)構(gòu)及捐獻(xiàn)者同意后,,利用這些不良或者多余的胚胎建立HES系。
在獲得胚胎,,經(jīng)冷凍復(fù)蘇,,分離內(nèi)細(xì)胞團(tuán),常規(guī)脫帶去滋養(yǎng)層后,,將ICM接種于飼養(yǎng)層上,,7~10d待克隆增殖后,初步分離ICM,,在此接種于新鮮的飼養(yǎng)層后,,繼續(xù)傳代。在HES的傳代培養(yǎng)過(guò)程中,,由于部分HES細(xì)胞自發(fā)分化,,因此常利用機(jī)械發(fā)跳去部分化的HES細(xì)胞集落,將其劃成小塊傳代,。這種傳代方法效率低,,耗時(shí)長(zhǎng),人力耗費(fèi)大,,易污染,,只適合小規(guī)模的HES培養(yǎng)。也可以選擇用中性蛋白酶或膠原酶?jìng)鞔?,可?jié)省大量的時(shí)間和人力,。
在體外細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,,飼養(yǎng)層模擬體內(nèi)環(huán)境,為HES提供各種因子,,維持HES自我更新狀態(tài),。小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)飼養(yǎng)層是最常用的HES飼養(yǎng)層細(xì)胞,。MEF能分泌LIF等多種細(xì)胞因子,。HES一旦建系后,可能對(duì)所用的MEF品系具有一定的依賴性,,因此要保證MEF的穩(wěn)定性在HES配過(guò)程中非常重要,。但是研究人員認(rèn)為,飼養(yǎng)層細(xì)胞的應(yīng)用使得培養(yǎng)條件復(fù)雜化,,不利于明確各種因子和信號(hào)通路在維持HES自我更新中的作用,。因此金穎教授指出,為消除動(dòng)物源性污染,,可以使用化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基(chemical difined medium,CDM)作為培養(yǎng)基,,并且刺激無(wú)動(dòng)物源性污染的飼養(yǎng)層細(xì)胞在CDM上產(chǎn)生足量的因子,來(lái)彌補(bǔ)CDM的細(xì)胞因子不足,,構(gòu)建一個(gè)完全無(wú)動(dòng)物源性,,且安全有效的HES培養(yǎng)體系。
金穎教授的實(shí)驗(yàn)小組建立的7株HES系中2株HES細(xì)胞系參加了國(guó)際百株HES細(xì)胞系系統(tǒng)的研究項(xiàng)目,,在此次干細(xì)胞技術(shù)臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用講座與培訓(xùn)會(huì)議上,,金穎教授與大家一起分享了這一喜人成果。
ESC作為體外研究胚胎早期發(fā)育的優(yōu)勢(shì)模型,,進(jìn)行藥物篩選的良好平臺(tái),,以及參與未來(lái)細(xì)胞治療領(lǐng)域的無(wú)限資源,開始帶動(dòng)世界范圍內(nèi)的干細(xì)胞研究熱潮,,已成為21世紀(jì)生物醫(yī)學(xué)的熱點(diǎn),,由生物谷BioonGroup承辦干細(xì)胞技術(shù)臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用講座與培訓(xùn)積極的推動(dòng)國(guó)內(nèi)干細(xì)胞研究。(生物谷Bioon.com)
資料中心:
干細(xì)胞移植用于肝再生治療的相關(guān)研究進(jìn)展
腫瘤干細(xì)胞起源及其生物學(xué)特性
干細(xì)胞科研領(lǐng)域的牛人們
誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)的重編程機(jī)制