血清標本,。受訪者供圖
隨訪者病歷整齊地收納在診室,。
中國是肝癌大國,，新增病例和死亡人數(shù)均居世界首位。今年三四月,，足球名宿趙達裕,、著名詩人汪國真陸續(xù)因患肝癌離世，肝癌防治再次引發(fā)社會關(guān)注,。
臨床研究表明,，肝癌發(fā)病隱匿，侵襲性高,，生長迅速,，大多數(shù)患者就診時已是中晚期，治療效果較差,，肝癌因此被稱為“癌癥之王”,。若能在早期發(fā)現(xiàn)肝癌，臨床治愈率將得到有效提高,。
8月9日,，中山大學附屬第三醫(yī)院崇雨田教授、中山大學生命科學院莊詩美教授團隊聯(lián)合公布一項最新肝癌預警指標——miRNA分類器,，可比現(xiàn)有診斷手段提早一年預警肝癌,。該成果已在國際著名腫瘤學期刊《柳葉刀腫瘤學》（The Lancet Oncology）發(fā)表，并得到高度評價,。
當有心人為填補中國內(nèi)地研究空白,，中山三院感染科啟動乙肝隨訪計劃，崇雨田團隊多年隨訪儲備大量血清標本,，為后續(xù)研究提供重要原材料,。
“中國是肝癌大國，新增肝癌病例和死亡病例均高居世界之首,?！睆尼t(yī)29年,，崇雨田密切關(guān)注慢性乙肝、乙肝肝硬化和肝癌的研究進展,，“‘慢性乙肝——肝硬化——肝癌’是醫(yī)學界公認的肝癌發(fā)生三部曲,。”
2005年12月,，中華醫(yī)學會肝病分會,、中華醫(yī)學會感染分會聯(lián)合發(fā)布《中國慢性乙肝防治指南》（下稱《指南》），進一步規(guī)范慢性乙肝的防治工作,。
“《指南》中提出要對患者進行專業(yè)的管理,，但其中引用的許多數(shù)據(jù)來自香港和臺灣地區(qū)，相比之下,，內(nèi)地方面的數(shù)據(jù)基本空白,。”崇雨田意識到,，應該填補這一空白,，才可能給患者提供更為貼心、規(guī)范的治療,。
他決定當個有心人,。2008年，崇雨田在科主任高志良教授的支持下,，帶領(lǐng)他的研究團隊與中山三院感染科其他教授一起建立慢性乙肝患者的長期隨訪隊列,，而且該研究項目也得到了國家“十一五”、“十二五”重大傳染病防治專項基金和中山大學的“5010”基金的資助,。
參照《指南》建議,，崇雨田團隊著手對病人進行門診隨訪，把患者“管起來”,“以往有些病人,，本來兩三個月就應該過來復診,，卻兩三年不過來，我們希望改變這種松散的狀態(tài),?！?/p>
開展隨訪以來，崇雨田要求患者每隔3個月進行一次抽血,，檢查患者的乙肝病毒DNA定量和肝功能,，每隔半年進行一次B超檢查。同時,，他還實時記錄患者病情進展,，并定期與患者聯(lián)系，以了解病情變化、治療效果等,，并篩查早期肝癌,。
如今，從周一到周五,，除卻必要的會議和學術(shù)研究,，崇雨田每周的出診時間表都排得滿滿當當，這樣做既是為了滿足患者需求,，也是為了緊緊捆綁著患者,。
即便如此，隨訪團隊仍覺得困難重重,?！白畲蟮膯栴}是部分患者的依從性不高?！背缬晏锓治?，一方面是患者自我保健意識較弱；更重要的是,，除了定期進行肝功能檢測,，患者還要進行影像學檢查,、乙肝病毒DNA檢測,，這都是一筆不小的開銷。再者,，患者遍布全省,，有的甚至來自廣西、湖南,、江西等地,，來一趟不容易。
克服了諸多困難,，崇雨田及其隨訪團隊共搜集了3000多例慢性乙肝病人的長期隨訪資料,。病人的病例資料被整齊放置在他的幾個診室的柜子里，并一一編號,。為了更好地保存病人的血清標本,，他們還購置了一批低溫冰箱，在零下80℃的環(huán)境下長期保存血清標本,。
“這些看似普通的文件資料和血清標本,，可都是‘寶藏’！”崇雨田對南方日報記者說,，它們的珍貴之處在于,，從縱向時間軸記錄了患者的病情變化。一旦與合適的基礎(chǔ)研究專家發(fā)生碰撞,，它們就會被盤活,，很可能產(chǎn)生讓百姓受益的科研成果,。
一拍即合
臨床和基礎(chǔ)研究專家一拍即合，通過檢測分析1416份血清標本,，將7種非編碼核糖核酸的數(shù)據(jù)建立成miRNA分類器,，可提前一年預警小肝癌
2009年，崇雨田遇到了一位知音,，中山大學生命科學院與中山三院肝臟病醫(yī)院實驗室的雙聘教授莊詩美,。
“當時有一個背景，我發(fā)現(xiàn)在我們隨訪幾年的近千例乙肝病人中,，出現(xiàn)了數(shù)十例肝癌患者,。由于他們是在規(guī)范的隨訪過程中，通過定期B超檢查而檢出肝癌的,，當時發(fā)現(xiàn)這些患者有小肝癌時其甲胎蛋白（AFP）卻未見異常,。”
甲胎蛋白是學界公認的肝癌檢測分子標記物,。1964年,，科學家在肝癌病人血中檢測出甲胎蛋白。它是一種糖蛋白,，正常情況下,，這種蛋白主要來自胚胎的肝細胞，胎兒出生約兩周后甲胎蛋白便會從血液中消失,，因此正常人血清中甲胎蛋白的含量不足20微克/升,。
但是當肝細胞發(fā)生癌變時，人體會恢復產(chǎn)生這種蛋白質(zhì)的功能,，而且隨著病情的惡化,，甲胎蛋白在血清中的含量也會急劇增加，因此甲胎蛋白就成了診斷肝癌的一個特異性臨床指標,。
然而大量臨床治療卻發(fā)現(xiàn),，甲胎蛋白在生殖細胞腫瘤、胰腺癌,、肺癌以及慢性肝炎,、肝硬化等患者中也可能出現(xiàn)不同程度的升高。而且,，甲胎蛋白只在大約80%的肝癌患者血清中升高,，部分晚期肝癌病人，直至病故前,，甲胎蛋白仍未顯異樣,。
對肝癌的早期診斷而言，甲胎蛋白仍不夠敏感。是否有更靈敏的,、有助于肝癌早期診斷的標志物,？
在一次學術(shù)交流中，崇雨田了解到莊詩美團隊主要從事肝癌相關(guān)的基礎(chǔ)研究,，并有不少創(chuàng)新,，尤其是，已在與肝癌相關(guān)miRNA的基礎(chǔ)研究方面做了大量工作,，便主動邀請莊詩美及其團隊來到中山三院考察他的隨訪隊列臨床資料及血清標本庫,。
從2009年8月1日起，中山三院團隊聯(lián)合中山大學附屬腫瘤醫(yī)院,、中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院的相關(guān)研究人員,，對健康人群、肝炎患者,、乙肝病毒陽性攜帶者,、肝硬化和肝癌患者的血清進行檢測、分析,，并對中山三院長期隨訪的1400多名乙型肝炎病人進行研究,，病人每3個月到醫(yī)院復診，一旦發(fā)現(xiàn)為肝癌,，則對其留存的血液樣本進行回溯性檢測,。
最終，通過檢測分析1416份血清標本,，聯(lián)合團隊發(fā)現(xiàn),，血清中的miR-29a、miR-29c,、miR-133a、miR-143,、miR-145,、miR-192、miR-505這7種非編碼核糖核酸在肝癌患者血清中均明顯升高,。結(jié)合分析結(jié)果,，聯(lián)合團隊將7種非編碼核糖核酸的數(shù)據(jù)建立成miRNA分類器。
“miRNA分類器對于肝癌的診斷有預警作用,，如果將來能應用于臨床,，有利于肝癌的早期發(fā)現(xiàn)?！迸R床上通常將腫瘤小于3厘米大的早期肝癌稱為“小肝癌”,，崇雨田表示，從2008年至2014年的6年時間里，在長期隨訪的乙肝病人中共有27人查出小肝癌,，這些小肝癌病人在臨床診斷前九個月血清檢測甲胎蛋白,，約11%為異常，而采用miRNA分類器進行檢測,，48%的患者出現(xiàn)異常,；而采用miRNA分類器對患者診斷肝癌前一年的血清進行檢測，發(fā)現(xiàn)29％的患者出現(xiàn)異常,，同期僅有7%的患者甲胎蛋白異常,。因此，miRNA的分類器提前一年“揪出”肝癌的能力得到了驗證,。
前景廣闊
miRNA分類器敏感性更高,，可用于提示肝癌的發(fā)生，但不可取代甲胎蛋白及B超等檢查,；未來將研究乙肝“自然轉(zhuǎn)陰”患者血清
崇雨田與莊詩美團隊的這一成果已在國際著名腫瘤學期刊《柳葉刀腫瘤學》（The Lancet Oncology）發(fā)表,，并得到高度評價。
“不過,，miRNA分類器的建立只是在肝癌的早期預警,、早期診斷上開辟了一個新的研究方向?！背缬晏镏毖?，目前miRNA分類器研究成果還無法直接應用于臨床，還需要繼續(xù)進行大量的研究才可能用于臨床,，所以miRNA分類器的發(fā)現(xiàn)并不能取代現(xiàn)行的診斷肝癌檢測方法,，如甲胎蛋白、B超等,。
“miRNA分類器具有敏感性更高的優(yōu)勢,，可用于提示肝癌的發(fā)生，相比之下,，甲胎蛋白的特異性更高,，對于肝癌的確診可能更有意義?！背缬晏镎f,。
不僅如此，當前,，甲胎蛋白的檢測方法在臨床應用中也十分成熟,，大部分基層醫(yī)院都能使用。崇雨田也強調(diào),，肝癌的臨床診斷目前主要還得靠B超,、CT,、MR等影像學手段。
目前,，崇雨田已著手構(gòu)想下一步研究,。“首先,，我們希望進一步完善miRNA分類器模型,，提高其敏感性和特異性。另外,，我們也會嘗試新的思路,，尋找能與miRNA分類器組合使用的其他指標?！?/p>
崇雨田關(guān)注的遠不止于此,。他透露，數(shù)千例慢性乙型肝炎隨訪病人中,，發(fā)現(xiàn)超過100多例病人出現(xiàn)了乙型肝炎表面抗原“自然轉(zhuǎn)陰”這種少見的現(xiàn)象,。
“以前醫(yī)生會以為這是偶發(fā)現(xiàn)象，甚至以為檢測結(jié)果出錯,。但現(xiàn)在通過回顧檢測血清標本發(fā)現(xiàn),，這并非個例，只是我們還無法解釋這種現(xiàn)象的具體發(fā)生機制,?！背缬晏锵Ｍ蘸竽芘c更多免疫學,、分子生物學等專家共同研究其中的奧秘,，進一步挖掘這批血清“寶藏”。
廣東是肝癌全球最高發(fā)地區(qū)之一
目前,，中國肝癌發(fā)病率約為25.7/10萬,，成為死亡率僅次于肺癌、胃癌的第三大惡性腫瘤,。
國家和廣東省的最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,，廣東是全球肝癌最高發(fā)地區(qū)之一，且呈現(xiàn)高危群體年輕化的傾向,。與全國相比較，廣東省肝癌死亡率較全國平均水平高出50%,，是世界平均水平的3-4倍,。
《廣州社區(qū)人群肝癌高危因素調(diào)查》顯示，肝炎病毒,、黃曲霉素污染,、酗酒,、飲用水污染和肝寄生蟲感染是誘發(fā)肝癌的五大高危因素。
專家表示,，廣東肝癌發(fā)病率高,，一方面是因為我省病毒性肝炎攜帶者高于全國平均水平。另一方面,，廣東人愛吃魚生,，因食用淡水魚生而導致的肝吸蟲病較多，成為誘發(fā)肝癌的原因之一,。此外,，研究表明，在濕熱天氣下,，花生,、玉米易霉變產(chǎn)生黃曲霉素。長期食用含黃曲霉素的花生油,、玉米油會加劇肝癌的發(fā)展,。
目前，B超和血清甲胎蛋白檢測仍可有效排查早期肝癌,。但是,，專家提醒，要注意飲食習慣,，適當戒煙,、戒酒，避免食用霉變的食物和食用腌制等含亞硝胺的食物,，注意飲水衛(wèi)生,。此外，適當補充維生素和硒,，維生素C和維生素E具有抗氧化作用,，可以清除人體內(nèi)自由基，降低人體細胞氧化應激損害,，減少基因突變,。
