細(xì)胞培養(yǎng)行業(yè)隨著重組DNA技術(shù)和細(xì)胞工程的出現(xiàn)而興起于20世紀(jì)80年代，該行業(yè)同時(shí)也是制藥市場(chǎng)形成的主要推動(dòng)者,，而該市場(chǎng)的很大份額也逐漸為生物制劑占據(jù),。在未來(lái)幾年內(nèi)，不僅細(xì)胞培養(yǎng)行業(yè)的貢獻(xiàn)可能會(huì)呈暴發(fā)式增長(zhǎng),，哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)行業(yè)帶來(lái)的貢獻(xiàn)也將占主要地位,。在生物制藥市場(chǎng)這一新興領(lǐng)域，德國(guó)柏林的ProBiogen公司已取得了初步成功,，其新型生物反應(yīng)器技術(shù)得到了業(yè)界贊譽(yù),。
ProBioGen公司創(chuàng)立于1994年，最初是一家體外診斷產(chǎn)品制造商,。6年后，公司意識(shí)到,，他們應(yīng)充分利用自身的專門(mén)技術(shù)和專業(yè)知識(shí)成為一流的細(xì)胞系領(lǐng)域的專家,，并提供依合同進(jìn)行cGMP生產(chǎn)的服務(wù)。因此,，首席執(zhí)行官M(fèi)ichael Schlenk就改革了公司的商業(yè)模式,。同時(shí)，他們還開(kāi)始完善從基因到市場(chǎng)這個(gè)過(guò)程相關(guān)的服務(wù),，該服務(wù)覆蓋了從蛋白表達(dá)到cGMP制造過(guò)程中的每一個(gè)步驟,，包括完整的項(xiàng)目經(jīng)營(yíng)的技術(shù)支持。
ProBioGen公司的獨(dú)特賣點(diǎn)在于其細(xì)胞系工程方面的能力,。他們?cè)趶膭?dòng)物到人的原代細(xì)胞的培養(yǎng)方面積累了比較豐富的經(jīng)驗(yàn)和專門(mén)技術(shù),，提供大量可預(yù)先定制的細(xì)胞系，力圖滿足所有統(tǒng)一定制的需要及消費(fèi)者的特殊需要,。公司的發(fā)展基于對(duì)細(xì)胞系工程平臺(tái)的專利權(quán),，該平臺(tái)可為消費(fèi)者生產(chǎn)出最優(yōu)和免許可執(zhí)照的CHO細(xì)胞系，而從獲取基因到獲得成熟細(xì)胞系的過(guò)程需用6個(gè)月的時(shí)間就能完成,。
除了為消費(fèi)者提供定做的細(xì)胞系,，公司還可以提供原代細(xì)胞的專利權(quán)從而讓用戶獲得使用許可。目前,，公司擁有兩種細(xì)胞系的專利權(quán)：一種是從鴨胚發(fā)展而來(lái)的禽類細(xì)胞系,，該細(xì)胞系適合生產(chǎn)廣泛的人類和動(dòng)物疫苗，另一種是來(lái)源于人神經(jīng)細(xì)胞前體組織的人類神經(jīng)細(xì)胞系,。
用于生產(chǎn)病毒疫苗的禽類細(xì)胞系
“目前,，用于生產(chǎn)人類疫苗的培養(yǎng)基主是雞卵和雞胚成纖維細(xì)胞。雖然這些培養(yǎng)基允許包括減毒株在內(nèi)的眾多病毒在其中增殖,，但其在疫苗成本方面仍有許多明顯的劣勢(shì),，”ProBioGen公司病毒和分子生物學(xué)分部副總裁Volker Sandig先生說(shuō),，“如同動(dòng)物的原代細(xì)胞一樣，上述細(xì)胞也會(huì)衰老,，因此每批細(xì)胞都需要新鮮制備,。這就要求生產(chǎn)該細(xì)胞的種群不應(yīng)含有病原體，對(duì)其應(yīng)經(jīng)常進(jìn)行檢測(cè),。這些細(xì)胞也需培養(yǎng)在含胎牛血清的固體培養(yǎng)基表面,，因此生產(chǎn)過(guò)程非常復(fù)雜。”
這些困難不僅增加了成本,，如果遇到疫情流行,，還會(huì)對(duì)疫苗的生產(chǎn)造成相當(dāng)大的阻礙，因?yàn)樯a(chǎn)能力無(wú)法隨之迅速提高,。為了克服這些困難并最大程度上確保安全,，ProBioGen公司研發(fā)了一種擁有專利權(quán)的來(lái)源于鴨胚的永久細(xì)胞系。整個(gè)研發(fā)過(guò)程是在專用的GMP環(huán)境中進(jìn)行的,，公司還對(duì)整個(gè)研發(fā)過(guò)程提供了文件數(shù)據(jù),，這樣該細(xì)胞系就可用于臨床材料的研發(fā)。另外,，與轉(zhuǎn)染的雞細(xì)胞及其原代細(xì)胞不同,，我們的細(xì)胞系經(jīng)Q-PERT分析后表明缺乏逆轉(zhuǎn)錄病毒活性。Q-PERT分析用來(lái)對(duì)疫苗及細(xì)胞系的逆轉(zhuǎn)錄酶活性進(jìn)行定量檢測(cè),。
ProBioGen公司的禽類細(xì)胞系來(lái)源于經(jīng)非病毒基因誘導(dǎo)的不同組織,，該基因可誘發(fā)細(xì)胞增殖并抑制其凋亡。這些細(xì)胞系中的兩個(gè)細(xì)胞系現(xiàn)在可穩(wěn)定維持一年半以上,，其中之一已經(jīng)能夠在無(wú)動(dòng)物細(xì)胞成分培養(yǎng)基的激發(fā)系統(tǒng)中生長(zhǎng),，這樣該細(xì)胞系就可用于病毒的大規(guī)模生產(chǎn)。此細(xì)胞系能以10~15代/星期的速度傳代培養(yǎng),，濃度可達(dá)9×106個(gè)細(xì)胞/ml,。該細(xì)胞系還允許MVA和禽痘在其中增殖，這兩個(gè)病毒疫苗都是構(gòu)建重組病毒疫苗的重要平臺(tái),。病毒滴度能達(dá)到甚至超過(guò)用雞原代細(xì)胞系獲得的病毒滴度的水平,。它們還可用于流感毒株和黃病毒科、細(xì)小病毒科病毒及彈狀病毒的增殖,。目前從流感毒株獲得的資料確實(shí)令人振奮,。
“服務(wù)與創(chuàng)新技術(shù)的結(jié)合構(gòu)成了公司風(fēng)險(xiǎn)與利潤(rùn)相平衡的特征。提供服務(wù)的商家為我們提供穩(wěn)定的資金,，從而使我們能夠?qū)Ｗ⒂趯?duì)經(jīng)過(guò)篩選的,，具有高創(chuàng)新性和有市場(chǎng)前景的產(chǎn)品的研發(fā)，”Schlenk先生評(píng)論說(shuō),，“這樣的結(jié)合讓我們將自身定位成生物制劑行業(yè)中最具創(chuàng)新而且最值得信賴的合作伙伴,。此外,，我們正在美國(guó)和歐洲以外的地區(qū)擴(kuò)大活動(dòng)，并正在尋求包括中國(guó)在內(nèi)的世界各地有前景的生物技術(shù)中心,。”
