在第五屆國際轉(zhuǎn)基因動物學(xué)術(shù)研討會上,來自上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,、上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和上海第二醫(yī)科大學(xué)的研究人員公布了他們合作進(jìn)行的有關(guān)豬克隆研究的進(jìn)展(論文的作者為張德福,、王英,、陳茵等)。
研究人員以卵丘細(xì)胞為核供體細(xì)胞組成重構(gòu)胚,,卵裂率達(dá)到56.7%,,發(fā)育至桑椹胚達(dá)11.7%、囊胚率為6.7%,,顯著高于成纖維細(xì)胞重構(gòu)胚,。他們還研究了卵母細(xì)胞的采集方法、激活程序和卵齡對卵丘細(xì)胞核移植重構(gòu)胚體外發(fā)育的影響,。以血清饑餓法將卵丘細(xì)胞誘導(dǎo)至G0/G1期,,抽吸法/解剖法采集卵母細(xì)胞,體外培養(yǎng)33/44h,,將卵丘細(xì)胞放至去核卵母細(xì)胞的卵周隙中,,重構(gòu)胚以鈣離子載體A23817或電脈沖結(jié)合6-DMAP激活處理,體外培養(yǎng)6天,。
研究表明,,卵母細(xì)胞采集方法、激活液中細(xì)胞松弛素(CB),、激活程序并不影響重構(gòu)胚發(fā)育(以卵齡33h的卵母細(xì)胞為受體),。研究顯示,以電脈沖結(jié)合6-DMAP激活卵丘細(xì)胞重構(gòu)胚,,體外能發(fā)育至胚囊,。