方　佳　陳常慶　中國(guó)科學(xué)院上海生物工程研究中心,上海200233,；

王德寶　中國(guó)科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所,上海200031

摘要　　將兩種人腫瘤壞死因子(hTNF)受體hTNFR55和hTNFR75基因分別克隆到表達(dá)載體pcDNA3,、pDR2以及pXJ-41中,以脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)染BHK細(xì)胞,用［125I］TNF-α篩選出陽(yáng)性克隆,并進(jìn)一步鑒定了表達(dá)兩種hTNFRs的細(xì)胞株；反轉(zhuǎn)錄(RT)-PCR和ELISA結(jié)果表明兩種hTNFRs在RNA轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)合成水平均獲得了表達(dá)。但hTNF-α不能引發(fā)這些細(xì)胞株的細(xì)胞毒活性,；結(jié)合野生型hTNF-α及其突變體R2K的細(xì)胞毒活性和體內(nèi)毒性的測(cè)定結(jié)果,利用這些細(xì)胞株進(jìn)一步測(cè)定了突變體hTNF-α-R2K和野生型hTNF-α分別與兩種受體的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合活性,從而為兩種受體以及hTNF-α的結(jié)構(gòu)和功能研究的進(jìn)一步深入奠定了一定的基礎(chǔ),。
關(guān)鍵詞　　人腫瘤壞死因子受體；表達(dá),；人腫瘤壞死因子α(hTNF-α),；結(jié)構(gòu)功能

生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào) 1999年 第31卷 第1期 Vol.31  No.1 1999