DNA疫苗開(kāi)創(chuàng)了免疫學(xué)和疫苗學(xué)的新領(lǐng)域,，提出了一個(gè)全新的概念,。其最大優(yōu)點(diǎn)是可以通過(guò)質(zhì)粒攜帶多個(gè)抗原基因而構(gòu)成多價(jià)或多聯(lián)疫苗，相對(duì)一,、二代疫苗，DNA免疫更加安全穩(wěn)定。DNA免疫和病毒的自然感染過(guò)程相似,，激發(fā)較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。此外,，其生產(chǎn)周期短,，使用和保存運(yùn)輸方便，便于推廣應(yīng)用,。
時(shí)至今日,，禽流感已是一個(gè)讓人們談虎色變的話題。世界衛(wèi)生組織（WTO）認(rèn)為,，目前全球正處于禽流感爆發(fā)的前期,，一種新的可致人類(lèi)發(fā)病的病毒亞型正在悄悄蔓延開(kāi)來(lái),，只不過(guò)至今為止還未造成人與人之間的傳播和擴(kuò)散。據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示,，截至2006年7月4日,，全球已有229例患者遭遇了禽流感的侵襲，其中已有131人死亡,，死亡率為57%,，且在男性中的發(fā)病率相對(duì)較低。在這些患者中,，除1例外,，其余的感染途徑均由禽傳染。
世界衛(wèi)生組織指出,，高致病性禽流感易發(fā)生變異,，并有可能引起人類(lèi)流感大流行。一旦病毒突破了人群的免疫防線,，演變?yōu)閷?duì)人具有高致病性的流感病毒,，將造成大量的感染和死亡病例。進(jìn)行有效的疫苗接種是迅速建立人群免疫屏障,、阻斷流感蔓延,、減少和降低其危害的有效手段。因此,，各國(guó)都在加緊研制人用疫苗,，以抗擊即將爆發(fā)的流感危機(jī)。
流感疫苗市場(chǎng)潛力可觀
專(zhuān)家認(rèn)為,，若想避免禽流感病毒對(duì)人類(lèi)造成災(zāi)難的發(fā)生,，則必須開(kāi)發(fā)出有效的治療藥物或者疫苗以阻止禽流感病毒在人類(lèi)的傳播，這也是人類(lèi)有望抵御流感病毒侵襲的唯一出路,。
要想成功地開(kāi)發(fā)出一種可有效對(duì)抗禽流感的疫苗是頗有難度的事情,，這是因?yàn)椴《镜膫鞑ニ俣戎煲h(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)疫苗的開(kāi)發(fā)進(jìn)度。在1957年流感大規(guī)模暴發(fā)之時(shí),，病毒僅僅用了4個(gè)月的時(shí)間就迅速傳遍了亞洲,，且在接下來(lái)的2個(gè)月內(nèi)又更進(jìn)一步擴(kuò)散到了全世界。因此,，可以說(shuō)要想在較短的時(shí)間內(nèi)鑒定出接下來(lái)可能大規(guī)模流行疾病的發(fā)病原因,，開(kāi)發(fā)成功有效的疫苗且按比例放大生產(chǎn)幾乎是不太可能的事情。尤其是從1957年開(kāi)始,，空氣傳播也成了流感病毒傳播的一種途徑,，這更使得有效疫苗的適時(shí)開(kāi)發(fā)難上加難。上述種種原因?qū)е铝巳虺^(guò)40個(gè)國(guó)家有意識(shí)地儲(chǔ)存包括瑞士羅氏公司的磷酸奧塞米韋（達(dá)菲,，Tamiflu）在內(nèi)的抗病毒藥物以作為其一旦暴發(fā)禽流感后的短期治療方案,。
盡管開(kāi)發(fā)困難重重,，但疫苗仍然是阻止流感暴發(fā)的最有效方法。為滿足當(dāng)前流行前期的市場(chǎng)需求,，全球有20多個(gè)國(guó)家都先后加入了流感疫苗的研究開(kāi)發(fā)之中,，且其中大多數(shù)國(guó)家的開(kāi)發(fā)都是以H5N1型病毒為基礎(chǔ)的。2005年,，全球流感疫苗的市場(chǎng)規(guī)模高達(dá)16億美元,。據(jù)預(yù)計(jì)，該市場(chǎng)的增長(zhǎng)趨勢(shì)仍將繼續(xù),。另?yè)?jù)Datamonitor公司最近發(fā)表的一份報(bào)告預(yù)測(cè),，到2010年，光是在全球七大藥品市場(chǎng)上,，流感疫苗的市場(chǎng)規(guī)模就有可能超過(guò)30億美元,。
生產(chǎn)技術(shù)亟待更新
盡管市場(chǎng)潛力巨大,，但流感疫苗市場(chǎng)的發(fā)展還取決于各地政府所制定的接種目標(biāo)是否能夠?qū)崿F(xiàn),，以及生產(chǎn)能力的進(jìn)一步擴(kuò)大。由于季節(jié)性流感疫苗的組成每年必須經(jīng)過(guò)一些調(diào)整和改良,，一般每年針對(duì)疫苗開(kāi)發(fā)都會(huì)選擇3種可能在冬天造成大規(guī)模流行的菌株進(jìn)行,，這樣才能適應(yīng)病毒演變的發(fā)展步伐。因此,，對(duì)疫苗的要求必然是生產(chǎn)周期短,、應(yīng)用及時(shí)且產(chǎn)量能應(yīng)對(duì)流感的大規(guī)模爆發(fā),。
然而,，現(xiàn)階段流感病毒疫苗的生產(chǎn)仍依靠傳統(tǒng)的老技術(shù)手段——雞胚培養(yǎng)制備，該培養(yǎng)周期非常緩慢,，且不易于控制產(chǎn)量,。由于雞胚生產(chǎn)流感疫苗需要消耗大量的SPF級(jí)的雞胚，因此很難擴(kuò)大生產(chǎn),。此外,，許多存在的問(wèn)題也不容回避。比如,，在確定新流感菌株的類(lèi)型和可利用的疫苗時(shí)就有相當(dāng)多的時(shí)間遲滯（需大量生產(chǎn)則要6~9個(gè)月的時(shí)間）,，緩慢的生產(chǎn)進(jìn)程勢(shì)必延誤疫情控制的最佳時(shí)機(jī)。除此之外,，雞胚還具有極易受到污染的特點(diǎn),。上述種種原因決定了這項(xiàng)應(yīng)用了50多年的技術(shù)不利于應(yīng)對(duì)大規(guī)模的流感暴發(fā)。為此,，世界衛(wèi)生組織,、美國(guó)政府等都鼓勵(lì)發(fā)展細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來(lái)替代目前的雞胚培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)流感疫苗,。據(jù)預(yù)測(cè)，今后新的生產(chǎn)技術(shù)（尤其是以細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)的生產(chǎn)技術(shù)）有可能占到整個(gè)流感疫苗生產(chǎn)能力的15%,。
國(guó)內(nèi)：人用疫苗尚處試驗(yàn)階段
目前,，中國(guó)已報(bào)告19例人禽流感病例，其中12例已死亡,。根據(jù)衛(wèi)生部公布的信息,，我國(guó)雖然還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)人類(lèi)大規(guī)模感染的疫情，然而隨著流感的步步逼近,，在大勢(shì)所趨之下,，全球疫情的發(fā)展使得我國(guó)必須正視禽流感，提前做好藥品準(zhǔn)備工作以應(yīng)對(duì)隨時(shí)可能發(fā)生的疫情,，
為應(yīng)對(duì)由于禽流感病毒的變異而導(dǎo)致的流感大流行,，我國(guó)正在加緊開(kāi)展原型疫苗——人用禽流感疫苗的研究。經(jīng)過(guò)1年多的努力,，目前人用禽流感疫苗項(xiàng)目已完成了臨床前研究,。科學(xué)家通過(guò)反向遺傳技術(shù)構(gòu)建的毒種建立了疫苗生產(chǎn)的種子庫(kù),，對(duì)病毒擴(kuò)增能力,、遺傳穩(wěn)定性、滅活效果和工藝進(jìn)行了研究,，確定了純化工藝和病毒檢定方法,，現(xiàn)已完成試驗(yàn)疫苗的制備，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明所制備的試驗(yàn)疫苗具有良好的安全性和免疫原性,。
疫苗正式投入市場(chǎng)前,，還需要通過(guò)臨床研究來(lái)進(jìn)一步證明其安全性和有效性。中國(guó)疾病與控制中心已向國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局提交了臨床研究申請(qǐng),，中國(guó)藥品生物制品檢定所已完成了疫苗用毒種的檢測(cè)并發(fā)出檢定合格報(bào)告,。到目前為止，雖然尚無(wú)人用疫苗正式投入應(yīng)用的消息,，但“人用禽流感疫苗”研制項(xiàng)目進(jìn)入臨床試驗(yàn),，將為我國(guó)預(yù)防流感大流行提供重要的技術(shù)與疫苗儲(chǔ)備,。這同時(shí)也意味著一旦流感疫情暴發(fā),，我國(guó)將有能力依靠自己的研發(fā)成果有效控制疾病的迅速傳播。
國(guó)外：DNA疫苗已露尖尖角
全球目前有30多家藥廠生產(chǎn)的20多種H5N1型禽流感病毒的疫苗都處在人體試驗(yàn)階段,，也有一些國(guó)家的研究機(jī)構(gòu)研制出了針對(duì)H5N1型禽流感的疫苗，但是這些疫苗不是引起人體免疫反應(yīng)的效果不理想，就是需要對(duì)人體進(jìn)行大劑量注射,，難以大規(guī)模推廣,。7月26日，英國(guó)葛蘭素史克公司稱(chēng)其研制出了一種預(yù)防H5N1型禽流感的疫苗,，人體對(duì)其產(chǎn)生抗體的比例達(dá)到了80%,。如果后續(xù)試驗(yàn)證明這種疫苗安全有效,，則最早可以在明年投入大批量生產(chǎn),。但是在該疫苗被正式進(jìn)行大批量生產(chǎn)之前，在人用禽流感疫苗的研發(fā)領(lǐng)域,，國(guó)內(nèi)與國(guó)外的進(jìn)展可謂是旗鼓相當(dāng),。
然而盡管如此，從疫苗技術(shù)的角度來(lái)看,，在流感疫苗的研發(fā)領(lǐng)域,，國(guó)外要比國(guó)內(nèi)略勝一籌，其開(kāi)發(fā)的觸角已逐漸向DNA疫苗領(lǐng)域延伸,。
DNA疫苗又稱(chēng)核酸疫苗或基因疫苗,，是編碼免疫原或與免疫原相關(guān)的真核表達(dá)質(zhì)粒DNA（有時(shí)也可以是RNA），它可經(jīng)一定途徑進(jìn)入機(jī)體內(nèi),，被宿主細(xì)胞攝取后能轉(zhuǎn)錄和翻譯表達(dá)出抗原蛋白,，此抗原蛋白能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生非特異性和特異性兩種免疫應(yīng)答反應(yīng),，從而起到免疫保護(hù)作用,。DNA疫苗是以質(zhì)粒結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的，這些質(zhì)粒來(lái)源于可編碼病毒抗原的DNA,。疫苗中包含的DNA是通過(guò)一個(gè)極具特征的大腸桿菌（E.coli）發(fā)酵過(guò)程而得到。在接種的過(guò)程中,，質(zhì)粒在注射位點(diǎn)被細(xì)胞（例如皮膚或者肌肉中的樹(shù)狀突細(xì)胞）吸收,，從而使編碼病毒抗原的基因被轉(zhuǎn)錄。表達(dá)蛋白的片段降解成多肽,，且被MHC類(lèi)Ⅰ型和MHC類(lèi)Ⅱ型分子所表達(dá)出來(lái),，因此誘導(dǎo)了抗體和細(xì)胞應(yīng)答的產(chǎn)生。
DNA疫苗開(kāi)創(chuàng)了免疫學(xué)和疫苗學(xué)的新領(lǐng)域,，提出了一個(gè)全新的概念。其最大優(yōu)點(diǎn)是可以通過(guò)質(zhì)粒攜帶多個(gè)抗原基因而構(gòu)成多價(jià)或多聯(lián)疫苗,，相對(duì)一,、二代疫苗，DNA免疫更加安全穩(wěn)定,。DNA免疫和病毒的自然感染過(guò)程相似,，激發(fā)較強(qiáng)的免疫應(yīng)答,。此外，其生產(chǎn)周期短,，使用和保存運(yùn)輸方便,，便于推廣應(yīng)用。
到目前為止,，全球有3家公司已經(jīng)將開(kāi)發(fā)重心轉(zhuǎn)移到DNA疫苗上,，這3家公司分別是美國(guó)默克公司、Vical公司和PowderMed公司,，其中的Vical公司一直是DNA疫苗開(kāi)發(fā)領(lǐng)域的領(lǐng)頭羊,。然而隨著PowderMed公司的產(chǎn)品進(jìn)入了Ⅰ期臨床研究階段，如今后者已直逼Vical公司的王者地位,。
PowderMed：快鳥(niǎo)先飛于抗流感前沿
位于英國(guó)牛津的疫苗制造商PowderMed公司早前已向英國(guó)藥品和保健品監(jiān)管署（MHRA）申請(qǐng)?jiān)谥驹刚咧袑?duì)其H5N1型流感病毒疫苗（influenza vaccine,， DNA，Powder）進(jìn)行臨床研究,，該疫苗為一種質(zhì)粒DNA流感疫苗,，如今正處于Ⅰ期臨床研究階段。本品的Ⅱ期臨床研究有望于2006年內(nèi)進(jìn)行,。一旦試驗(yàn)成功,，PowderMed公司將成為全球第一家銷(xiāo)售人H5N1型禽流感無(wú)針疫苗的公司。
在2005年12月,，PowderMed公司對(duì)外公布了一系列其DNA疫苗針對(duì)36個(gè)健康志愿者進(jìn)行的早期Ⅰ期臨床研究數(shù)據(jù),，該概念性研究所得的結(jié)果表明，一個(gè)包含有紅細(xì)胞凝集素H3基因（來(lái)源于流感菌株A/Panama/2007/99）的DNA流感疫苗可誘導(dǎo)產(chǎn)生H3/panama免疫反應(yīng),。重要的是,，該疫苗對(duì)3種遺傳學(xué)變異型流感H3型菌株均有較好的作用，這意味著本品有望在將來(lái)用于對(duì)抗?jié)撛诔霈F(xiàn)的流感菌株,。
最近,，PowderMed公司又宣布其疫苗的Ⅰ期臨床研究正集中于紅細(xì)胞凝集素H5基因，該基因來(lái)自于流感菌株A/Vietnam/1194/2004,。H5型流感菌株很大可能將會(huì)是引發(fā)下一場(chǎng)大規(guī)模流感的罪魁禍?zhǔn)住?/p>
對(duì)于當(dāng)前H5N1型禽流感將在未來(lái)引發(fā)的人類(lèi)之間的流行,，PowderMed公司肯定地認(rèn)為，其正在開(kāi)發(fā)的流感疫苗能夠有效地與之對(duì)抗,。然而盡管如此,，除非流感真正襲來(lái)，我們并不能確定下一場(chǎng)流感病毒將會(huì)是何種類(lèi)型,，更不能確定現(xiàn)有的治療手段是否真正有效,。盡管DNA疫苗有許多優(yōu)點(diǎn)，但目前絕大部分DNA疫苗的研究還僅局限于實(shí)驗(yàn)室階段。如何盡快地大批量投入臨床應(yīng)用,，最關(guān)鍵的問(wèn)題是如何開(kāi)發(fā)價(jià)格低廉和高效,、實(shí)用的DNA疫苗。隨著細(xì)胞因子的大量試用,、減毒細(xì)菌載體的研究成功和新劑型開(kāi)發(fā)及分子生物學(xué)等其他實(shí)用技術(shù)的發(fā)展,，這些問(wèn)題有可能得到很好的解決。而國(guó)內(nèi)企業(yè)在走自己的路,、開(kāi)發(fā)出適合我國(guó)現(xiàn)階段疫苗水平產(chǎn)品的同時(shí),，也應(yīng)借鑒國(guó)外前沿的開(kāi)發(fā)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)，提高開(kāi)發(fā)水平,，才能將這場(chǎng)抗流感戰(zhàn)役打得更漂亮,。
