Proteorhodopsin(變形菌視紫質(zhì))是多種海洋細(xì)菌中都擁有的光敏感性蛋白,。美國能源部Lawrence Berkeley實驗室和加州大學(xué)伯克利分校的研究人員證明,,當(dāng)環(huán)境中氧氣不足時,,擁有Proteorhodopsin的細(xì)菌將改用太陽能完成重要的生命活動。
“我們的研究顯示Proteorhodopsin只有在特定環(huán)境中,,即細(xì)胞的呼吸能力被削弱時才彌補(bǔ)細(xì)菌的能量平衡,,”研究人員Jan Liphardt說,“Proteorhodopsin如同一個細(xì)胞能量源,,通過捕獲光能彌補(bǔ)細(xì)菌呼吸作的不足,。這種抵擋氧剝奪的能力可用于解釋為何如此多的海洋細(xì)菌表達(dá)Proteorhodopsin。”Liphardt認(rèn)為,,利用多種能源的細(xì)菌比利用單一能源的細(xì)菌,,可能更適合生物能源產(chǎn)業(yè)。研究結(jié)果刊登于PNAS,,題為《Light-powering Escherichia coli with proteorhodopsin》,。
當(dāng)proteorhodopsin編碼基因在2000年首度“亮相”于海洋細(xì)菌基因組時,在生物界引發(fā)了不小轟動,,這項發(fā)現(xiàn)提示擁有proteorhodopsin的細(xì)菌也具有呼吸能力,。
后繼實驗證明proteorhodopsin是一個光驅(qū)動質(zhì)子泵(light-driven proton pump),能夠傳送質(zhì)子通過細(xì)胞膜,,以儲存電能,。在這一點上,proteorhodopsin與另一個蛋白——bacteriorhodopsin非常相似,,bacteriorhodopsin是生長在鹽池中的細(xì)菌彌補(bǔ)呼吸所用,。然而將含有proteorhodopsin的細(xì)菌暴露于陽光,proteorhodopsin并不起作用,。那么proteorhodopsin的實際作用是什么,?Kalmar大學(xué)Jarone Pinhassi最近發(fā)現(xiàn),,光可刺激某些攜帶proteorhodopsin的海洋細(xì)菌生長,說明某些細(xì)菌可以利用proteorhodopsin為能源,,彌補(bǔ)呼吸不足,,但proteorhodopsin用哪種波長的光仍不清楚。
“我們認(rèn)為,,如果你擁有可以捕獲兩種不同能源能量的系統(tǒng),,除去其中的一種能源,很可能會增加對另外一種能源(的使用),,”Liphardt說,,“想象一個電容器,如果容量已滿,,接通一組電池不會引起任何反應(yīng),。但是當(dāng)你清空電容器后再接通電池,,會有電流出現(xiàn),。”
為了觀察proteorhodopsin的作用,以及測量效果的大小,,Liphardt與其同事利用遺傳工程方法,,得到能夠表達(dá)光-敏感蛋白的Escherichia coli, Walter說
E.coli的能量代謝已經(jīng)被研究透徹,是觀測proteorhodopsin活性的一個極好模型,??梢酝ㄟ^氧損耗或者呼吸鏈毒物削弱細(xì)菌的呼吸作用。
Berkeley研究人員操縱單一E.coli,,觀察其對質(zhì)子動力(proton motive force,,pmf)光的反應(yīng)??缂?xì)胞膜的質(zhì)子的電化學(xué)潛力作為細(xì)菌所用能源,,除了其它功能外,驅(qū)動鞭毛回轉(zhuǎn)馬達(dá),。“我們發(fā)現(xiàn)削弱E.coli的呼吸作用后,,如果對E.coli細(xì)胞進(jìn)行光照,它們根據(jù)光的顏色決定是游動還是停止,,”Walter說,,“proteorhodopsin的吸收光譜在綠色波長處有峰,細(xì)胞暴露于綠光后會游動,,暴露于紅光后會停止,。”
沒有呼吸毒素的情況下,綠光對這些遺傳工程改造E.coli的鞭毛馬達(dá)不起作用,。研究人員通過測量不同濃度毒素或者各種光照強(qiáng)度情況下單一細(xì)胞的pmf,,量化光驅(qū)動和呼吸鏈質(zhì)子流之間的相關(guān)性,。在最高毒素濃度以及綠光源下,細(xì)胞運動速度平均上升70%,。對照組正常E.coli細(xì)胞,,對綠光源沒有反應(yīng)。
接下來是摸索遺傳工程菌所吸收的最優(yōu)化光量,。研究人員首先鑒別proteorhodopsin的最有效形式,,然后通過增加或減少關(guān)鍵基因,對細(xì)菌的基因組進(jìn)行改造,。