微生物學(xué)報(bào)Acta Microbiologica Sinica
48(9)：1141~1146;4 September 2008
3種植物花螺原體的分離及其基本特性
于漢壽，阮康勤,，紀(jì)燕玲,，陳永萱,，王志偉
(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)環(huán)境微生物工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,，南京 210095)
摘要：【目的】調(diào)查我國植物花上的螺原體的存在,，搜集我國的螺原體資源,，并研究它們的基本生物學(xué)特性,?！痉椒ā砍Ｒ?guī)螺原體分離、培養(yǎng)方法,，應(yīng)用暗視野顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察螺原體形態(tài),，根據(jù)16S rDNA和ITS序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹研究螺原體分離菌株可能的分類地位?！窘Y(jié)果】分別從油菜(Brassica napus),、杜鵑(Rhododendron simsii)、紅花酢漿草(Oxalis corymbosa)3種植物花表分離到4株螺原體CNR-1和CNR-2,、CNA-1,、CRW-1，對其形態(tài),、部分生理生化特性及分子生物學(xué)特性進(jìn)行了初步研究,。這4株螺原體在R-2液體培養(yǎng)基中生長良好，都能通過孔徑為0.22 m的微孔濾膜,；在R-2固體培養(yǎng)基上呈圓形或顆粒狀菌落,，菌落直徑約50~600 m；在生長的某個(gè)階段可呈典型的螺旋狀,，菌體直徑為37.04~370.40 nm,，長度約0.89~11.88 m；它們都能利用葡萄糖作為碳源,，不能利用尿素,；在不含胎牛血清的R-2培養(yǎng)基中，它們都不能生長,；菌株CNR-1,、CNA-1能強(qiáng)烈代謝精氨酸，而CNR-2和CRW-1不能代謝精氨酸,；在氨芐青霉素鈉濃度高達(dá)2000 U/mL的R-2培養(yǎng)基中,，分離菌株生長良好。根據(jù)16S rDNA序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,，分離菌株CNR-1和CNR-2,、CNA-1與蜜蜂螺原體Spiroplasma melliferum聚類較近，而CRW-1與S. clarkii聚類較近,；根據(jù)ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,，CRW-1形成一個(gè)單獨(dú)的分枝,，其它3個(gè)菌株仍與S. melliferum聚類?！窘Y(jié)論】以上結(jié)果初步表明,，分離菌株CNR-1和CNR-2、CNA-1極有可能是Spiroplasma melliferum,，而CRW-1可能是一個(gè)新的螺原體種,，但還需要血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。
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