楊勁松（上海第二醫(yī)科大學(xué)生化教研室,、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,、人類基因治療研究中心,上海,200025）
鄭新民（美國(guó)康奈爾大學(xué), 紐約,14850）
陳詩(shī)書（上海第二醫(yī)科大學(xué)生化教研室、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,、人類基因治療研究中心,上海,200025）
摘 要：利用蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶α (PTPα)基因轉(zhuǎn)染NIH3T3細(xì)胞, 研究PTPα誘導(dǎo)前后細(xì)胞生物學(xué)行為的變化, 為腫瘤形成早期機(jī)制的研究提供細(xì)胞模型. 用攜帶PTPα基因的四環(huán)素調(diào)控體系轉(zhuǎn)染NIH3T3細(xì)胞并誘導(dǎo)24 h后, 用RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法證實(shí)PTPα在誘導(dǎo)細(xì)胞中的表達(dá)高于未誘導(dǎo)細(xì)胞, 用RT-PCR及蛋白質(zhì)印跡法發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性Src的表達(dá)水平在誘導(dǎo)與未誘導(dǎo)細(xì)胞中沒(méi)有變化, 而Src激酶的活性在誘導(dǎo)細(xì)胞中增高, 并且在誘導(dǎo)細(xì)胞中Src的酪氨酸磷酸化水平降低. 再用透射式電子顯微鏡和流式細(xì)胞技術(shù)觀察到誘導(dǎo)細(xì)胞的表型已發(fā)生變化, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明PTPα誘導(dǎo)24 h使細(xì)胞的表型開(kāi)始發(fā)生轉(zhuǎn)化, 這種變化很可能與PTPα表達(dá)水平升高使Src C末端的pTyr527去磷酸化而激活Src相關(guān).
關(guān)鍵詞：PTPα; Src ; 轉(zhuǎn)化
分類號(hào)：Q51 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
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