張萍(中山大學(xué)生物防治國家重點實驗室,廣州,510275)
楊波(中山大學(xué)生物防治國家重點實驗室,廣州,510275)
代小江(中山大學(xué)生物防治國家重點實驗室,廣州,510275)
龐義(中山大學(xué)生物防治國家重點實驗室,廣州,510275)
鐘江(復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院病毒學(xué)研究室,上海,200433)
蘇德明(復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院病毒學(xué)研究室,上海,200433)
摘 要:苜蓿丫紋夜蛾核多角體病毒(Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus, AcMNPV)感染可誘導(dǎo)斜紋夜蛾(Spodoptera litura)離體細(xì)胞Sl-zsu-1發(fā)生典型的細(xì)胞凋亡. 通過細(xì)胞松弛素(cytochalasin D)和NH4Cl的抑制實驗, 分別排除病毒粒子結(jié)合細(xì)胞受體蛋白, 和病毒在核內(nèi)體運輸過程啟動細(xì)胞凋亡信號發(fā)生的可能性. RT-PCR實驗證實, 病毒基因組進(jìn)入了細(xì)胞核, 極早期基因ie-1開始了轉(zhuǎn)錄; 而DNA聚合酶抑制劑(芽棲菌素)的存在對病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡程度與進(jìn)程均沒有明顯的影響. 這說明細(xì)胞凋亡的信號是先于病毒晚期復(fù)制事件啟動的. 單獨轉(zhuǎn)染AcMNPV極早期基因ie-1可誘導(dǎo)斜紋夜蛾離體細(xì)胞系Sl-zsu-1細(xì)胞發(fā)生部分凋亡, 轉(zhuǎn)染24 h后出現(xiàn)凋亡小體, 48 h達(dá)到高峰. 提取轉(zhuǎn)染細(xì)胞的總DNA電泳, 可檢測到典型的DNA梯形條帶(DNA ladder). 另外, AcMNPV 的ie-1基因溫度敏感突變株tsB821在非受納溫度感染細(xì)胞時, 細(xì)胞不發(fā)生凋亡. 這些結(jié)果暗示, 在AcMNPV感染誘導(dǎo)的Sl-zsu-1細(xì)胞凋亡中, ie-1基因是一個凋亡信號的直接或間接誘導(dǎo)因子.
關(guān)鍵詞:Spodoptera litura; AcMNPV; ie-1基因; 細(xì)胞凋亡
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