發(fā)育進(jìn)行過(guò)程中,，細(xì)胞不斷的獲得新的命運(yùn),，以前都是通過(guò)對(duì)其表型的識(shí)別來(lái)區(qū)分。但在細(xì)胞分化發(fā)生之前還會(huì)發(fā)生什么事件呢,？細(xì)胞命運(yùn)的決定階段是怎樣進(jìn)行的呢,？Chiang and Melton在Development Cell上新發(fā)表的研究報(bào)道了一種新方法能夠?qū)@個(gè)問(wèn)題進(jìn)行研究。他們通過(guò)單細(xì)胞PCR和DNA芯片技術(shù)對(duì)正在分化的胰臟細(xì)胞中基因表達(dá)情況進(jìn)行分析,，并通過(guò)研究的結(jié)果構(gòu)建出一個(gè)胰臟發(fā)育的模型,。
為了分析單個(gè)胰臟細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄模式，研究者改進(jìn)了基于PCR的cDNA擴(kuò)增方法,。他們將單個(gè)胰臟細(xì)胞中的cDNA與含有95個(gè)常見(jiàn)胰臟細(xì)胞表達(dá)基因的DNA芯片進(jìn)行雜交,，芯片上的基因包括轉(zhuǎn)錄因子，信號(hào)傳導(dǎo)分子以及對(duì)照基因,。
研究者用這種方法對(duì)胚胎10.5天小鼠的胰臟上皮分離出的單個(gè)細(xì)胞中的基因表達(dá)模式,。在這個(gè)時(shí)期上皮細(xì)胞的形態(tài)還是很均一的，但研究者分析出這些細(xì)胞根據(jù)基因表達(dá)模式可以分為6個(gè)不同的亞型,。I型只表達(dá)Pdx1,，Nkx2.2 and Nkx6.1，II型還表達(dá)P48,，III型還表達(dá)Ngn3,。因?yàn)镻dx1是最早表達(dá)的胰臟細(xì)胞標(biāo)記蛋白,，因此研究者認(rèn)為I型細(xì)胞是最好的胰臟干細(xì)胞候選者。II型細(xì)胞表達(dá)的P48是外分泌胰臟細(xì)胞的標(biāo)記,，而Nkx2.2和Nkx6.1是內(nèi)分泌細(xì)胞分化所必須的,。研究者根據(jù)這些研究結(jié)果推測(cè)出一個(gè)胰臟細(xì)胞分化的模型，每一個(gè)階段都對(duì)應(yīng)相應(yīng)的基因表達(dá)模式,。
Chiang and Melton提出的新方法肯定還適用與許多其它器官的發(fā)育過(guò)程,，對(duì)器官發(fā)育的研究有很大的推動(dòng)。
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Chiang, M.-K. & Melton, D. A. Single-cell transcript analysis of pancreas development. Dev. Cell 4, 383-393 (2003) | PubMed |
FURTHER READING
Edlund, H. Pancreatic organogenesis -- developmental mechanisms and implications for therapy. Nature Rev. Genet. 3, 524-532 (2002) | Article | PubMed | ChemPort |
