發(fā)育進行過程中,，細胞不斷的獲得新的命運,，以前都是通過對其表型的識別來區(qū)分,。但在細胞分化發(fā)生之前還會發(fā)生什么事件呢,？細胞命運的決定階段是怎樣進行的呢,？Chiang and Melton在Development Cell上新發(fā)表的研究報道了一種新方法能夠?qū)@個問題進行研究。他們通過單細胞PCR和DNA芯片技術(shù)對正在分化的胰臟細胞中基因表達情況進行分析,，并通過研究的結(jié)果構(gòu)建出一個胰臟發(fā)育的模型,。
為了分析單個胰臟細胞的轉(zhuǎn)錄模式,，研究者改進了基于PCR的cDNA擴增方法,。他們將單個胰臟細胞中的cDNA與含有95個常見胰臟細胞表達基因的DNA芯片進行雜交，芯片上的基因包括轉(zhuǎn)錄因子,，信號傳導(dǎo)分子以及對照基因,。
研究者用這種方法對胚胎10.5天小鼠的胰臟上皮分離出的單個細胞中的基因表達模式,。在這個時期上皮細胞的形態(tài)還是很均一的,，但研究者分析出這些細胞根據(jù)基因表達模式可以分為6個不同的亞型,。I型只表達Pdx1,，Nkx2.2 and Nkx6.1,，II型還表達P48,，III型還表達Ngn3,。因為Pdx1是最早表達的胰臟細胞標記蛋白，因此研究者認為I型細胞是最好的胰臟干細胞候選者,。II型細胞表達的P48是外分泌胰臟細胞的標記,，而Nkx2.2和Nkx6.1是內(nèi)分泌細胞分化所必須的。研究者根據(jù)這些研究結(jié)果推測出一個胰臟細胞分化的模型,，每一個階段都對應(yīng)相應(yīng)的基因表達模式,。
Chiang and Melton提出的新方法肯定還適用與許多其它器官的發(fā)育過程，對器官發(fā)育的研究有很大的推動,。
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Chiang, M.-K. & Melton, D. A. Single-cell transcript analysis of pancreas development. Dev. Cell 4, 383-393 (2003) | PubMed |
FURTHER READING
Edlund, H. Pancreatic organogenesis -- developmental mechanisms and implications for therapy. Nature Rev. Genet. 3, 524-532 (2002) | Article | PubMed | ChemPort |
