發(fā)育進(jìn)行過程中,，細(xì)胞不斷的獲得新的命運,，以前都是通過對其表型的識別來區(qū)分。但在細(xì)胞分化發(fā)生之前還會發(fā)生什么事件呢,？細(xì)胞命運的決定階段是怎樣進(jìn)行的呢,？Chiang and Melton在Development Cell上新發(fā)表的研究報道了一種新方法能夠?qū)@個問題進(jìn)行研究。他們通過單細(xì)胞PCR和DNA芯片技術(shù)對正在分化的胰臟細(xì)胞中基因表達(dá)情況進(jìn)行分析,，并通過研究的結(jié)果構(gòu)建出一個胰臟發(fā)育的模型,。
為了分析單個胰臟細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄模式，研究者改進(jìn)了基于PCR的cDNA擴(kuò)增方法,。他們將單個胰臟細(xì)胞中的cDNA與含有95個常見胰臟細(xì)胞表達(dá)基因的DNA芯片進(jìn)行雜交,，芯片上的基因包括轉(zhuǎn)錄因子，信號傳導(dǎo)分子以及對照基因,。
研究者用這種方法對胚胎10.5天小鼠的胰臟上皮分離出的單個細(xì)胞中的基因表達(dá)模式,。在這個時期上皮細(xì)胞的形態(tài)還是很均一的，但研究者分析出這些細(xì)胞根據(jù)基因表達(dá)模式可以分為6個不同的亞型,。I型只表達(dá)Pdx1,，Nkx2.2 and Nkx6.1，II型還表達(dá)P48,，III型還表達(dá)Ngn3,。因為Pdx1是最早表達(dá)的胰臟細(xì)胞標(biāo)記蛋白，因此研究者認(rèn)為I型細(xì)胞是最好的胰臟干細(xì)胞候選者,。II型細(xì)胞表達(dá)的P48是外分泌胰臟細(xì)胞的標(biāo)記,，而Nkx2.2和Nkx6.1是內(nèi)分泌細(xì)胞分化所必須的,。研究者根據(jù)這些研究結(jié)果推測出一個胰臟細(xì)胞分化的模型,，每一個階段都對應(yīng)相應(yīng)的基因表達(dá)模式,。
Chiang and Melton提出的新方法肯定還適用與許多其它器官的發(fā)育過程，對器官發(fā)育的研究有很大的推動,。
ORIGINAL RESEARCH PAPER
Chiang, M.-K. & Melton, D. A. Single-cell transcript analysis of pancreas development. Dev. Cell 4, 383-393 (2003) | PubMed |
FURTHER READING
Edlund, H. Pancreatic organogenesis -- developmental mechanisms and implications for therapy. Nature Rev. Genet. 3, 524-532 (2002) | Article | PubMed | ChemPort |
