RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP),,相信只要是稍微接觸過分子生物學(xué)的人就不會對這個(gè)名詞陌生,它的定義是:以一條DNA鏈或RNA為模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶,。
雖然對于真核與原核生物的RNAP,,科學(xué)家們了解的比較深入,但是仍然存在一些未解之謎,,在本期的Nature上,,來自美國阿拉巴馬州大學(xué)生物化學(xué)與分子遺傳學(xué)系,威斯康辛州大學(xué)生物分子化學(xué)系的研究人員發(fā)表兩篇互補(bǔ)的文章,,公布了他們在細(xì)菌RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)和功能方面的研究成果,。
催化轉(zhuǎn)錄的RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP)是一種由多個(gè)蛋白亞基組成的復(fù)合酶,,如大腸桿菌的RNA聚合酶有五個(gè)亞基組成,,其分子量為480000,,含有α,β,,β’,,δ等4種不同的多肽,其中α為兩個(gè)分子,,所以全酶(holoenzyme)的組成是α2ββ’δ,。α亞基與RNA聚合酶的四聚體核心(α2ββ’)的形成有關(guān);β亞基含有核苷三磷酸的結(jié)合位點(diǎn),;β’亞基含有與DNA模板的結(jié)合位點(diǎn),;而Sigma因子只與RNA轉(zhuǎn)錄的起始有關(guān),與鏈的延伸沒有關(guān)系,,一旦轉(zhuǎn)錄開始,,δ因子就被釋放,而鏈的延伸則由四聚體核心酶(core enzyme)催化,。所以δ因子的作用就是識別轉(zhuǎn)錄的起始位置,,并使RNA聚合酶結(jié)合在啟動子部位。
細(xì)菌的RNA聚合酶,,像DNA聚合酶一樣,,具有很復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。其活性形式(全酶)為15S,,由5種不同的多肽鏈構(gòu)成,,按分子量大小排列分別為β'(155000),β(151000),,σ(7000),,α(36500)和ω(11000)。每分子RNA聚合酶除有兩個(gè)α亞基外,,其余亞基均只有一個(gè),,故全酶為β'βα2σω(450000)。
RNA聚合酶在DNA要將它的遺傳信息表達(dá)出去,,成為真正具有功能效應(yīng)的單位——蛋白的時(shí)候,,需要中間體RNA的幫助,而要實(shí)現(xiàn)這個(gè)過程就不能缺少這個(gè)重要的酶,。Steven Block和他的同事利用一種比之前光阱(optical trap)更穩(wěn)定的裝置發(fā)現(xiàn)在大腸桿菌轉(zhuǎn)錄的過程中,,這個(gè)酶每隔大約1000個(gè)堿基就會出現(xiàn)一個(gè)錯(cuò)誤,但是RNAP也有良好的自我糾正機(jī)制,,能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和糾正這些錯(cuò)誤,。
在第一篇文章中,研究人員將這種酶與DNA模板和RNA產(chǎn)物結(jié)合在一起,,以對轉(zhuǎn)錄伸長復(fù)合物進(jìn)行仔細(xì)觀測,。該結(jié)構(gòu)顯示了DNA到RNA的轉(zhuǎn)錄過程的詳細(xì)情況,,這個(gè)轉(zhuǎn)錄過程對于所有活細(xì)胞都是至關(guān)重要的。在第二篇論文中,,RNA聚合酶伸長復(fù)合物是與各種不同的基質(zhì)類比物和一種抗生素結(jié)合在一起的,,顯示了基質(zhì)加載和抗生素抑制的機(jī)制。對人類和細(xì)菌
RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)進(jìn)行對比,,將有助于進(jìn)行藥物設(shè)計(jì):RNA聚合酶是包括利福霉素(rifamycin)及其衍生物在內(nèi)的抗生素的一個(gè)作用目標(biāo),。