近年來(lái),，越來(lái)越多的研究證實(shí)一種小分子RNA——microRNA（miRNA）與高等動(dòng)植物大量基因的調(diào)節(jié)有關(guān),，并且還與癌癥等人類疾病有關(guān),。這種分子的研究也是近年來(lái)生命科學(xué)領(lǐng)域一個(gè)越來(lái)越熱的研究聚焦點(diǎn)。
來(lái)自中科院上海生命科學(xué)研究院的沈南教授的研究組對(duì)miRNA介導(dǎo)的編碼區(qū)同義SNP的功能進(jìn)行了深入的研究,。
通過(guò)結(jié)合生物信息學(xué)分析,，研究組對(duì)報(bào)告基因熒光素酶（luciferase）的編碼區(qū)進(jìn)行定點(diǎn)突變（同義突變），使其與miR-10a的“種子區(qū)域”完全配對(duì),。
研究人員在對(duì)293T細(xì)胞的miR-10a的表達(dá)水平進(jìn)行定量,，發(fā)現(xiàn)293T細(xì)胞內(nèi)源性表達(dá)較高水平的miR-10a。
當(dāng)分別將突變的熒光素酶基因表達(dá)載體（實(shí)驗(yàn)組）和未突變的熒光素酶基因表達(dá)載體（對(duì)照組）轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞時(shí),，研究組得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期結(jié)果一致：與對(duì)照相比,，突變的熒光素酶的表達(dá)明顯下調(diào)。
當(dāng)進(jìn)一步外源性過(guò)表達(dá)miR-10a后,，突變與未突變的熒光素酶的表達(dá)都會(huì)下降,，但是突變的熒光素酶的表達(dá)下降幅度更大——這意味著，編碼區(qū)的同義突變可通過(guò)miRNA來(lái)影響基因的表達(dá)從而發(fā)揮功能,。
接著,，研究組利用生物信息學(xué)方法，在與炎癥相關(guān)的基因中尋找能影響miRNA調(diào)節(jié)作用的同義SNP,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)干擾素β（IFNB）編碼區(qū)里的一個(gè)同義SNP（rs1051922,，C/T）可能會(huì)影響到miR-98的結(jié)合：rs1051922-C和mir-98 5’端第8位核苷酸G形成C：G強(qiáng)配對(duì)，而rs1051922-T則只能形成U：G弱配對(duì),。
于是,，該研究組構(gòu)建了兩種不同基因型的IFNB1表達(dá)載體（IFNB1-C，IFNB1-T）,，分別將它們與miR-98過(guò)表達(dá)載體共轉(zhuǎn)293T細(xì)胞之后,，ELESA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)IFNB1-C的表達(dá)水平比IFNB1-T明顯要低。
293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系,，293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生,，同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原，含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動(dòng)子區(qū)的質(zhì)?？梢詮?fù)制,。用Ca3(PO4)2轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50%。蛋白表達(dá)水平高,，轉(zhuǎn)染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測(cè)到表達(dá)的蛋白,。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞是過(guò)表達(dá)蛋白并獲得細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式,。
沈南，生物化學(xué)與分子生物學(xué)教授,，主要研究方向是系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機(jī)理的研究,。
沈教授近年主攻SLE的分子遺傳機(jī)制，在國(guó)內(nèi)率先建立高效敏感基因突變篩選鑒定體系及表達(dá)定量體系,，開(kāi)展了一系列有關(guān)狼瘡疾病相關(guān)基因的研究,。在國(guó)際上首先發(fā)現(xiàn)并證實(shí)三種基因編碼區(qū)的突變及建立了凋亡基因表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)了狼瘡病人具有獨(dú)特的表達(dá)特征,，發(fā)現(xiàn)了多個(gè)基因位點(diǎn)與狼瘡發(fā)病相關(guān)聯(lián),，為最終闡明SLE的致病基因奠定了基礎(chǔ)。目前主要致力于系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機(jī)理的研究,，主要集中在狼瘡易感基因,、干擾素通路、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞等的研究,。目前已完成10項(xiàng)研究課題,，其中國(guó)家自然基金2項(xiàng)，省部級(jí)7項(xiàng),，目前在研的國(guó)家自然基金1項(xiàng),。
